"HCE-T Cell:人角膜上皮細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：角膜上皮細胞；Ad-SV４０轉化；女性
RKO-E6細胞系相關產品：RetroPack PT67細胞、HMEL細胞、SF126細胞
H2452細胞系相關產品：BrCL12細胞、PTK2細胞、EB2細胞
WM-239-A細胞系相關產品：Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞
ChaGo-K1細胞系相關產品：U-118 MG細胞、MDA-330細胞、alpha TC1.6細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HCE-T Cell:人角膜上皮細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CCD966SK細胞系相關產品：KYSE-150細胞、Hs821T細胞、YD38細胞
DSL-6A/C1細胞系相關產品：OVCAR-420細胞、MDA175細胞、A427細胞
H-2030細胞系相關產品：OCIAML4細胞、HCC827細胞、H-128細胞
NCI-H524細胞系相關產品：DHL8細胞、IMR32細胞、UPCI-SCC090細胞
NCI H2106細胞系相關產品：IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞
細胞生長特性：貼壁
HCE-T Cell:人角膜上皮細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
MLA-144細胞系相關產品：H-1963細胞、WEHI 231細胞、P3X63Ag8653細胞
UPCI-SCC-154細胞系相關產品：C-28/I2細胞、NCIH209細胞、WM-115細胞
HCT 15細胞系相關產品：COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
H2009細胞系相關產品：MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞
AML-193細胞系相關產品：SNU878細胞、KYSE 30細胞、Kelly細胞
K7M2 wt細胞系相關產品：Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞
VMRC-RCZ細胞系相關產品：SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
HCE-T Cell:人角膜上皮細胞系
NCIH526細胞系相關產品：Panc8.13細胞、WERI Rb-1細胞、ATC241細胞
M-NFS-60細胞系相關產品：ACC-2細胞、EOL1細胞、Caco-2 BBe細胞
RS(4;11)細胞系相關產品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
HGMC細胞系相關產品：MFE 296細胞、DSL-6A/C1細胞、OVCAR-8細胞
NCI-H1404細胞系相關產品：THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞
TE85細胞系相關產品：tdott細胞、NCIH208細胞、Hs 840.T細胞
MDCC-MSB-1細胞系相關產品：C-33-A細胞、RDES-1細胞、NCI-H1623細胞
P3X63NS1細胞系相關產品：KYSE 30細胞、RSC 96細胞、VP 267細胞
H2170細胞系相關產品：MBdSMC細胞、IM95細胞、MADB 106細胞
Leghorn Male Hepatoma cell line細胞系相關產品：2V6.11細胞、P-19細胞、COR-L 105細胞
RS(4;11)細胞系相關產品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
PC-9/S1細胞系相關產品：SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞
U-266細胞系相關產品：EA.hy 926細胞、NCI H508細胞、HCC-1500細胞
BEL/FU細胞系相關產品：KOSC-2 cl3-43細胞、HBL1細胞、RT-BM細胞
HUT 28細胞系相關產品：NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞
SJRH 30細胞系相關產品：NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞
CT26.CL25細胞系相關產品：MDA-435細胞、H-64細胞、H2122細胞
Leghorn Male Hepatoma cell line細胞系相關產品：2V6.11細胞、P-19細胞、COR-L 105細胞
NUGC-2細胞系相關產品：LNCaP C4-2細胞、HBE 135-E6/E7細胞、H1703細胞
Human Microglia Clone 3細胞系相關產品：HCC2108細胞、SCL2細胞、32Dcl3細胞
NIT-1細胞系相關產品：NPA 87細胞、Co-115細胞、HCC202細胞
ECC-1細胞系相關產品：3T3 Swiss Albino細胞、Neuro2a細胞、H2126細胞
mousepodocyte細胞系相關產品：HH [Human lymphoma]細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、MCA-38細胞
M3 Clone M-3細胞系相關產品：HMy2.CIR細胞、HN-6細胞、T/G HA-VSMC細胞
Hs839T細胞系相關產品：U-87MG ATCC細胞、PANC0203細胞、SK-Hep1細胞
RMa-bm細胞系相關產品：CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞
FRTL-5細胞系相關產品：Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞
RPTEC/TERT 1細胞系相關產品：RFL6細胞、NCIH1568細胞、Psi2 DAP細胞
32D.3細胞系相關產品：TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞
SK-GT-4細胞系相關產品：6-10B細胞、H1963細胞、M2-10B4細胞
REC1細胞系相關產品：MKN-7細胞、HEMCSS細胞、CEM clone 7細胞
HANK1細胞系相關產品：MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞
PLC/PRF/5細胞系相關產品：Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞
NIH:OVCAR-8細胞系相關產品：X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞
MCF7/WT細胞系相關產品：MDAMB134VI細胞、MMAc-Serum Free細胞、C26細胞
MN9D細胞系相關產品：U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞
L428細胞系相關產品：Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、MCF-7/AdrR細胞、H82細胞
SUSM-1細胞系相關產品：NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞
B16-F10細胞系相關產品：Sp2/mIL-6細胞、HEK293-A細胞、EU-4細胞
National Medical Center-Glioma 1細胞系相關產品：HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞
Normal Rat Kidney-49F細胞系相關產品：A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞
343 MG細胞系相關產品：SUD6細胞、alpha-TC1.6細胞、H-747細胞
HCC-95細胞系相關產品：Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞
HCE-T Cell:人角膜上皮細胞系
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GS-9L細胞系相關產品：BC-028細胞、Neukoplast細胞、OAW42細胞
NCIH211細胞系相關產品：NIH:OVCAR-10細胞、MDA-361細胞、NCI-H740細胞
Namalwa細胞系相關產品：A 253細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞、Mc Ardle 7777細胞
NIH-OVCAR-3細胞系相關產品：251 MG細胞、Mono-Mac-6細胞、High-5細胞
HEK (AD293)細胞系相關產品：WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞
HEB細胞系相關產品：KMS26細胞、H-847細胞、EB1細胞
SW48細胞系相關產品：NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
NPA-87細胞系相關產品：RC92A細胞、H-4細胞、SUPT-1細胞
TT細胞系相關產品：IEC 6細胞、no.11細胞、GM04154B細胞
MDA435細胞系相關產品：NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞
MUG-Chor1細胞系相關產品：Mv1.Lu細胞、OCI Ly3細胞、EBC1細胞
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