"L-132 Cell:人胚胎肺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：胚肺；女性
MDA-kb2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-699細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞
JC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H157細(xì)胞、THEECs細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞
SCCVII/St細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-327細(xì)胞、LNCaP-ATCC細(xì)胞、LS 180細(xì)胞
PL11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞、PF-382細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
L-132 Cell:人胚胎肺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問(wèn)題：可以這樣說(shuō)，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過(guò)這個(gè)問(wèn)題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過(guò)幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問(wèn)題，可以非?？隙ǖ卣f(shuō)，你的消化環(huán)節(jié)出問(wèn)題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過(guò)程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問(wèn)題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒(méi)有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來(lái)對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來(lái)。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過(guò)的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來(lái)的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來(lái)的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒(méi)辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒(méi)必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來(lái)做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過(guò)２０%，因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足，過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購(gòu)買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購(gòu)買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
ECV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S91細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞、H1954細(xì)胞
RBL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS79細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞
RT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRFCEM細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞、ASH-3細(xì)胞
Y3-Ag1,2,3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910細(xì)胞、CD18/HPAF細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞
Kasumi 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2-11細(xì)胞、PC.3細(xì)胞、SK_N_FI細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
L-132 Cell:人胚胎肺上皮細(xì)胞系
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢？沒(méi)錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來(lái)復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō)，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書
H1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T3細(xì)胞、AML193細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞
C4-2 B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR41P細(xì)胞、EB-3細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞
ID8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPI-2I細(xì)胞、RA 1細(xì)胞、FHs 74 Int細(xì)胞
HuTu 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT483細(xì)胞、MPC-83細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞
LAN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞
B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC7721細(xì)胞、NCI-HUT-460細(xì)胞、LSC-1細(xì)胞
MKN7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 1細(xì)胞、HS-445細(xì)胞、WM266mel細(xì)胞
L-132 Cell:人胚胎肺上皮細(xì)胞系
IHH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS5細(xì)胞、Jurkat-E6細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞
B6Tert-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-0細(xì)胞、EL4細(xì)胞、SNT8細(xì)胞
COV 504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGBEC細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞、L-132細(xì)胞
MCF 7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-111細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞
LUDLU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY3細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞、K562細(xì)胞
C2-C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AQ-Mel細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞
Hs683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-F細(xì)胞、LK 2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞
KU 812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226S細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞
BMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK10細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞、N9細(xì)胞
BMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK10細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞、N9細(xì)胞
RPMI 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT細(xì)胞、HuLEC-5a細(xì)胞、H-735細(xì)胞
M 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.cl3細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞、639 V細(xì)胞
CHO Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2/BBe細(xì)胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞、A375S2細(xì)胞
2B4-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNF1細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞、GM04680細(xì)胞
HMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML-2細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞
Caco-2/BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB-1 Lu細(xì)胞、NB4細(xì)胞、TE 671細(xì)胞
TF-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas299細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞、S37細(xì)胞
T98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPB-15細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞
Panc813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero-E6細(xì)胞、HPB-ALL細(xì)胞、SuDHL 2細(xì)胞
NCI-H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-8細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞
ROS-17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA2B細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞
ROS-17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA2B細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞
BJA-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me Wo細(xì)胞、Granta 519細(xì)胞、TR146細(xì)胞
Hs294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPCa-2b細(xì)胞、DanG細(xì)胞、J-82細(xì)胞
CL1-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞、NCIADR.RES細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞
bEnd.3[BEND3]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1819細(xì)胞、FL83B細(xì)胞、BC3 H1細(xì)胞
MCF 7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-111細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞
KOPN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 94細(xì)胞、OE-19細(xì)胞、BS-C-1細(xì)胞
AA-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1463細(xì)胞、L 929細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞
UM-UC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF-1 MEF細(xì)胞、GL261細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞
SKES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192B細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞
HT-55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-474細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞
JC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H157細(xì)胞、THEECs細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞
SLMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、SNU1細(xì)胞、BV173細(xì)胞
SupB15WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1944細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞、ME 180細(xì)胞
CFSC-8B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6 myoblast細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞
RFL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1197細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞
Hs 934.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4-11細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞、G 401細(xì)胞
SUM102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-920細(xì)胞、TE 354.T細(xì)胞、Chang liver細(xì)胞
HCA 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-292細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞、AR4-IP細(xì)胞
SUDHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98-G細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞、KP 4細(xì)胞
TE13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1944細(xì)胞、GM05372細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞
HEP-3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-2Z細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞
L-132 Cell:人胚胎肺上皮細(xì)胞系
MGH-U3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-K8細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞、PANC1005細(xì)胞
OAW-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNDZ細(xì)胞、Granta519細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞
HG2855細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P116細(xì)胞、H-735細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞
NCI-SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞
U-373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Astrocyte type I clone細(xì)胞、FU-97細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞
SUM-102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1651細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞
B78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI6666細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞、ASH3細(xì)胞
BT-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H719細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞、Dami細(xì)胞
SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL7702細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞
HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACT-1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、MIHA細(xì)胞
RK13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCLP1細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞、H-2444細(xì)胞
H-1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A1847細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞、C 643細(xì)胞
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