"GES-1 Cell:人胃黏膜上皮細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長:貼壁 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 SCI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞、SK-NSH細(xì)胞、PIGI細(xì)胞 SW 1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC202細(xì)胞、H-345細(xì)胞、GT38細(xì)胞 PL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-3細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞 NCI-H1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H748細(xì)胞、L363細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 GES-1 Cell:人胃黏膜上皮細(xì)胞系 如何把細(xì)胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細(xì)胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個(gè)不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細(xì)胞生長的空間密度問題。有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時(shí)候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了,老化的會(huì)比較多,對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。2.對(duì)于有些人總是會(huì)遇到養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對(duì)于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn),已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺(tái),底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個(gè)是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細(xì)胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細(xì)胞反而是培養(yǎng)基少一點(diǎn)相反細(xì)胞形態(tài)會(huì)長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對(duì)于生長速度快的細(xì)胞,易生長的細(xì)胞加少一點(diǎn)培養(yǎng)基細(xì)胞形態(tài)會(huì)更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個(gè)人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細(xì)胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會(huì)比一次性相對(duì)好一些。而對(duì)于同一種細(xì)胞,在其生長旺盛快速的時(shí)期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因?yàn)楸炔A扛菀踪N壁。生長速度快的細(xì)胞在這種相對(duì)“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對(duì)于生長速度慢的細(xì)胞如果想要更漂亮的細(xì)胞狀態(tài),比玻璃瓶會(huì)好,對(duì)于生長速度慢的細(xì)胞,玻璃瓶則會(huì)更好。同樣,對(duì)于同一種細(xì)胞,在其生長速度慢的時(shí)候,會(huì)好一點(diǎn),比如剛剛復(fù)蘇的時(shí)候,或者原代培養(yǎng)的時(shí)候。而在其生長旺盛的時(shí)候,玻璃瓶則相對(duì)會(huì)好一點(diǎn)。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HCC-1187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High 5細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞 Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT3細(xì)胞、MOLM-13細(xì)胞、RAW264細(xì)胞 LS411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2195細(xì)胞、NCI-H1668細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞 B16 F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-704細(xì)胞、253JBV細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞 OVMANA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-5細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞、PA317細(xì)胞 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 GES-1 Cell:人胃黏膜上皮細(xì)胞系 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉! 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 MES-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSK-1細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞、Calu3細(xì)胞 Panc 4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-3細(xì)胞、RTE細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞 VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hce8693細(xì)胞、Calu3細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞 NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THC-8307細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞 MC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD1112Sk細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞 BJ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、T241細(xì)胞、NCI-H510A細(xì)胞 NCIH508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC893細(xì)胞、SUM-52PE細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞 GES-1 Cell:人胃黏膜上皮細(xì)胞系 TMD8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH/DF-1細(xì)胞、H-1915細(xì)胞、SNU387細(xì)胞 NCI-H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC-5細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞 P3HR1-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pan02細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞 HO8910/PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac12F5細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞 NCI-H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1-hTERT細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞、22Rv-1細(xì)胞 RL-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266S細(xì)胞、MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞、MDA468細(xì)胞 MDBK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC10細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞 MES23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-1040細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞、SN12CPM6細(xì)胞 MV-4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159-PT細(xì)胞、FHs74 Int細(xì)胞、H-1755細(xì)胞 MV-4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159-PT細(xì)胞、FHs74 Int細(xì)胞、H-1755細(xì)胞 4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞 Ramos (RA)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、H19-7細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞 MADB 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT FET細(xì)胞、KMS18細(xì)胞、KMS18細(xì)胞 MCF-12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-741細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞、GRSL細(xì)胞 C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞 SJRH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEL細(xì)胞、SKOV3細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞 CAMA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microglia Clone 3細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞、WERI細(xì)胞 HS-766-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCCT-1細(xì)胞、COLO 394細(xì)胞、ONS-76細(xì)胞 SNU407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL6細(xì)胞、SNU251細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞 BT474細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-727細(xì)胞、McA-RH8994細(xì)胞、MS-751細(xì)胞 HP615細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 8.13細(xì)胞、HPASMC細(xì)胞、PIG1細(xì)胞 Human Microglia Clone 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2108細(xì)胞、SCL2細(xì)胞、32Dcl3細(xì)胞 BHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEC細(xì)胞、I90細(xì)胞、H2085細(xì)胞 SKRC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32 mel細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞 NPA-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC92A細(xì)胞、H-4細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞 H35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞、RN細(xì)胞、MMAc-SF細(xì)胞 HCCC9810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 840.T細(xì)胞、MEL細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞 U-251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1116細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞、P 3 HR 1細(xì)胞 WSU-HN13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8402細(xì)胞、H2073細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞 3T3-Swiss細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 24細(xì)胞、LIPF155C細(xì)胞、DMS-79細(xì)胞 HFTF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞 SCL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC clone 1469細(xì)胞、HTR-8細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞 IOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、LO2細(xì)胞、H1781細(xì)胞 95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCUM-1細(xì)胞、C4-2細(xì)胞、NTHY-ORI3.1細(xì)胞 DHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 BL6細(xì)胞、HCC-366細(xì)胞、PL-12細(xì)胞 2V6.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21AE細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞、WC00044細(xì)胞 HT29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 962細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞 BC-020細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-8161細(xì)胞、Vero E6細(xì)胞、B-16細(xì)胞 SCLC-21H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA-1細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞、231-luc細(xì)胞 H-2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA433_Bast細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞、Panc 02細(xì)胞 KYSE-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/293細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞、Nthy-ori 3.1細(xì)胞 GM-637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL1339細(xì)胞、CHAGOK1細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞 GI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-10細(xì)胞、SW-1088細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞 GES-1 Cell:人胃黏膜上皮細(xì)胞系 RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 266-4細(xì)胞、H-2195細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞 HEK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0366細(xì)胞、SUM-102細(xì)胞、Namalva細(xì)胞 HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-813細(xì)胞、CX-1細(xì)胞、KNS62細(xì)胞 University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 375細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞 PAMC82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mousepodocyte細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞 HCoEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P36細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞 T. T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、FDC-P1細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞 TCam 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320-HSR細(xì)胞、OCI-Ly 7細(xì)胞、LNT-229細(xì)胞 SUM-159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs683細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞 TCMK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-02細(xì)胞、LM1細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞 MBT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/GR細(xì)胞、M-14細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞 Hep-G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1-6細(xì)胞、SNU-16細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞 "
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