"MGC-803 Cell:人胃癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:1980年建系,人胃癌低分化黏液腺癌組織小塊用RPMI-1640培養(yǎng)液培養(yǎng)4天細胞開始生長,首次傳代8日。免疫抑制的Wistar雄幼大鼠皮下移植成功。 Bovine ENDometrial cells細胞系相關產(chǎn)品:N9細胞、MDA-MB-134-VI細胞、CF Pac1細胞 NPC-TW01細胞系相關產(chǎn)品:Pfeiffer細胞、H1770細胞、C57/B6-L細胞 OVCA8細胞系相關產(chǎn)品:GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞 H-2087細胞系相關產(chǎn)品:PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 MGC-803 Cell:人胃癌細胞系 細胞培養(yǎng)實驗相關問題總結(jié):支原體(mycoplasma)污染的細胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前,必須確認細胞為mycoplasma-free,實驗結(jié)果之數(shù)據(jù)方有意義;偵測出細胞株有支原體污染時,該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調(diào)整pH值;購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:3傳代,2-3天換液一次 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 HT(H9)細胞系相關產(chǎn)品:Jurkat E6-1細胞、PLA-801C細胞、CG-4細胞 CEMC7細胞系相關產(chǎn)品:HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞 PC-12細胞系相關產(chǎn)品:SW-13細胞、P3X63NS1細胞、KM933細胞 GLAG-66細胞系相關產(chǎn)品:Molm 13細胞、RPMI7666細胞、SV-HUC-1細胞 BEL-7405細胞系相關產(chǎn)品:H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞 細胞生長特性:貼壁生長 MGC-803 Cell:人胃癌細胞系 正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 細胞形態(tài)特性:上皮樣 M-1 myeloid leukemia細胞系相關產(chǎn)品:NCI H69細胞、H69/P細胞、RAT2細胞 NCI-H1437細胞系相關產(chǎn)品:H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞 M2-10B4細胞系相關產(chǎn)品:CMT 64細胞、IOSE-Van細胞、H522細胞 CAL-33細胞系相關產(chǎn)品:COLO 678細胞、WM451細胞、hTERT-HPNE細胞 SW-1463細胞系相關產(chǎn)品:HO1-N-1細胞、MCF.7細胞、BEAS2B細胞 Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞 CCD1112Sk細胞系相關產(chǎn)品:NB1RGB細胞、BL6細胞、MV-4:11細胞 MGC-803 Cell:人胃癌細胞系 MEG-01細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H165細胞、CAL 33細胞、LOU-NH91細胞 Ej138細胞系相關產(chǎn)品:Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞 SUDHL16細胞系相關產(chǎn)品:NK92-MI細胞、ARO81-1細胞、NCIH146細胞 H-4細胞系相關產(chǎn)品:MV522細胞、EOC20細胞、RBL 1細胞 ST2細胞系相關產(chǎn)品:R D細胞、RS4:11細胞、Hs675細胞 H774細胞系相關產(chǎn)品:IAR 20細胞、C28/I2細胞、Functional Liver Cell-7細胞 Y3-Ag 1.2.3細胞系相關產(chǎn)品:0V-1063細胞、DU_145細胞、ECC-10細胞 MA-782細胞系相關產(chǎn)品:NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞 Hs27細胞系相關產(chǎn)品:K299細胞、OS-732細胞、HCC-44細胞 H1781細胞系相關產(chǎn)品:MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞 GM16136細胞系相關產(chǎn)品:RGM1細胞、MUS-M1細胞、C3H10T1-2細胞 NCI-H524細胞系相關產(chǎn)品:DHL8細胞、IMR32細胞、UPCI-SCC090細胞 SKLU1細胞系相關產(chǎn)品:BTI-Tn-5B1-4細胞、H2085細胞、CNE2細胞 RFL6細胞系相關產(chǎn)品:HT-1197細胞、CAKI.1細胞、COLO 738細胞 MDA-435細胞系相關產(chǎn)品:GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞 251 MG細胞系相關產(chǎn)品:2BS細胞、NCIH1618細胞、Hep G2/C3A細胞 Panc4.03細胞系相關產(chǎn)品:RMG-1細胞、EB2細胞、Melanoma 14細胞 SW-1353細胞系相關產(chǎn)品:AZ521細胞、NCIH146細胞、C42細胞 AAV293細胞系相關產(chǎn)品:COS1細胞、MLE12細胞、NCIH2171細胞 NCI-H1975細胞系相關產(chǎn)品:LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞 GM07404A細胞系相關產(chǎn)品:SNU407細胞、HTori-3細胞、CTLL(2)細胞 H740細胞系相關產(chǎn)品:Neuro2a細胞、SUM-190細胞、IOSE80細胞 NCI-BL1339細胞系相關產(chǎn)品:Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞 50.B1細胞系相關產(chǎn)品:TOV21G細胞、WIL2 S細胞、SW579細胞 NUGC-3細胞系相關產(chǎn)品:H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞 MADB106細胞系相關產(chǎn)品:JEG3細胞、SUM159PT細胞、Hs604T細胞 L M (TK-)細胞系相關產(chǎn)品:UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞 SU 86.86細胞系相關產(chǎn)品:UWB1.289細胞、HEK-293 c18細胞、Hs840_T細胞 ACC-M細胞系相關產(chǎn)品:MCF10-A細胞、NFS60細胞、HN13細胞 Normal Rat Kidney-52E細胞系相關產(chǎn)品:U-138-MG細胞、MDA-MB157細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞 DoTc2細胞系相關產(chǎn)品:Hs 688(A).T細胞、FU-OV-1細胞、MV4:11細胞 GM03570細胞系相關產(chǎn)品:Onda 11細胞、NIHOVCAR3細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞 CCRFCEM細胞系相關產(chǎn)品:MM-1S細胞、SR786細胞、HTori:3細胞 SW 13細胞系相關產(chǎn)品:CCD18Co細胞、UMUC-14細胞、CAOV4細胞 NCI-A549細胞系相關產(chǎn)品:M14-MEL細胞、AdHek細胞、U266 Bl細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞系相關產(chǎn)品:EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞 NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞系相關產(chǎn)品:293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞 HuO9細胞系相關產(chǎn)品:SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞 KYSE-70細胞系相關產(chǎn)品:HEK/293細胞、NCI-H82細胞、Nthy-ori 3.1細胞 N2a細胞系相關產(chǎn)品:MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞 KYSE-450細胞系相關產(chǎn)品:MHHCALL2細胞、LA-N-1細胞、SW480細胞 HCC-78細胞系相關產(chǎn)品:H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞 201T細胞系相關產(chǎn)品:Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、KALS-1細胞、MDBK (NBL-1)細胞 MGC-803 Cell:人胃癌細胞系 RGC5細胞系相關產(chǎn)品:HeLa.S3細胞、L- cell細胞、SW839細胞 NCIH1385細胞系相關產(chǎn)品:P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞 HNE-3細胞系相關產(chǎn)品:SK ES 01細胞、SK 1細胞、HOS-MNNG細胞 SKOV-3細胞系相關產(chǎn)品:MOLT 3細胞、MADB-106細胞、G-292細胞 6T-CEM細胞系相關產(chǎn)品:SNU-449細胞、MALME 3M細胞、Cattle chondrocytes細胞 COS-1細胞系相關產(chǎn)品:OACP4C細胞、H-2172細胞、CL-34細胞 Blotchy fibroblast-11細胞系相關產(chǎn)品:Mevo細胞、OCI-AML-3細胞、UMC11細胞 2PK3細胞系相關產(chǎn)品:NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞 Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞系相關產(chǎn)品:B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞 NCI-H1651細胞系相關產(chǎn)品:Caco-2/ATCC細胞、NCI/ADRRES細胞、ARO 81-1細胞 HMEL細胞系相關產(chǎn)品:Strain V細胞、HEK 293A細胞、H1184細胞 Tca8113細胞系相關產(chǎn)品:Hs 695T細胞、NR 8383細胞、Pa017C細胞 "
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