"BGC-823 Cell:人胃腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長:貼壁 細(xì)胞背景資料:建自一位62歲的胃癌患者 HCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-AD293細(xì)胞、AG 9細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞 CHL-IU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812-F細(xì)胞、SK-BR3細(xì)胞、QGY-7703細(xì)胞 NOZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H196細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞、THP-1細(xì)胞 SW-1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞、MODE-K細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 BGC-823 Cell:人胃腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)相關(guān)問題總結(jié):支原體(mycoplasma)污染的細(xì)胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗(yàn)之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細(xì)胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會對細(xì)胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細(xì)胞之生長參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前,必須確認(rèn)細(xì)胞為mycoplasma-free,實(shí)驗(yàn)結(jié)果之?dāng)?shù)據(jù)方有意義;偵測出細(xì)胞株有支原體污染時(shí),該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細(xì)胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果,將造成細(xì)胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時(shí),可以通入無菌過濾之CO2,以調(diào)整pH值;購買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:3傳代,2-3天換液一次 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 MLO-Y4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELF細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞、Jiyoye (P-2003)細(xì)胞 FTC133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1395細(xì)胞、HSAS1細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞 AA-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1463細(xì)胞、L 929細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞 BT 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-460細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞 HFL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tregs細(xì)胞、HT1376細(xì)胞、H-295細(xì)胞 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 BGC-823 Cell:人胃腺癌細(xì)胞系 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉! 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 BEAS-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-1細(xì)胞、143TK-細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞 E304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR-786細(xì)胞、3LL細(xì)胞、U138細(xì)胞 HL7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAFII細(xì)胞、MCAEC細(xì)胞、H-1373細(xì)胞 WEHI 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H292細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞 Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1569細(xì)胞、H-69細(xì)胞、KATO III細(xì)胞 UMUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞、H-2029細(xì)胞 Caco 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEM-L細(xì)胞、hSCC-25細(xì)胞、FRO細(xì)胞 BGC-823 Cell:人胃腺癌細(xì)胞系 SKMEL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細(xì)胞、HCC1954BL細(xì)胞、CHO-Lec1細(xì)胞 Hs-729-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8226細(xì)胞、OCILY-10細(xì)胞、MM96L細(xì)胞 SCC 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE-12細(xì)胞、SK-MEL-24細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞 P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-3細(xì)胞、GM 2132細(xì)胞、SHP-77細(xì)胞 JIMT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-28細(xì)胞、CL40細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞 HCA 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-292細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞、AR4-IP細(xì)胞 RGC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-295細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞 H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-676細(xì)胞、L cells細(xì)胞、EL 4細(xì)胞 Y-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT2細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞、CX-1細(xì)胞 LIXC-002細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B4G12細(xì)胞、MRC9細(xì)胞、M059J細(xì)胞 UWB1-289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP細(xì)胞、HHFK細(xì)胞、DBTRG-05MG細(xì)胞 HCC-1954BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker256-TC細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞、MEF細(xì)胞 SupB15W細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU387細(xì)胞、EOMA細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞 FDCP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M21細(xì)胞、HCC1599細(xì)胞、GT1-1細(xì)胞 TE 354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-80細(xì)胞、EB-1細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞 TE-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GOS-3細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞 Calu3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PY8119細(xì)胞、CV1細(xì)胞、TM3細(xì)胞 Namalwa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 253細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞 C32r細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19細(xì)胞、HEI193細(xì)胞、SF763細(xì)胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM19細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞、U937細(xì)胞 NCIH2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-3細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞 SUDHL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly19細(xì)胞、N1E115細(xì)胞、GM05887細(xì)胞 SUM190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-801C細(xì)胞、MLE 12細(xì)胞、NOMO1細(xì)胞 NHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP-89細(xì)胞、CNE細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞 IPLB-SF-21-AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL24細(xì)胞、SCC154細(xì)胞、JC細(xì)胞 KMS-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MALME.3M細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞 SKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGMC細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞、L cells細(xì)胞 MiaPaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW-039細(xì)胞、FET細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞 HCC 2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1930細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、N2a細(xì)胞 JF305細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT115細(xì)胞、HT22細(xì)胞、HTh74細(xì)胞 HS-766-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCCT-1細(xì)胞、COLO 394細(xì)胞、ONS-76細(xì)胞 KYSE 410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR7530細(xì)胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、786.O細(xì)胞 PG-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 5細(xì)胞、786-O細(xì)胞、Karpas299細(xì)胞 4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞 OKAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR1細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、MC57細(xì)胞 OCI/AML-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDST8細(xì)胞、293FT細(xì)胞、He La細(xì)胞 C-33 A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST2細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞、VP 229細(xì)胞 LOU-NH-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/AdrR細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞 Ca Ski細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞、D-407細(xì)胞 PLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs739T細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞 NIH 3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CP70細(xì)胞、H1373細(xì)胞、SKNBE(2c)細(xì)胞 BRL 3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK細(xì)胞、UO.31細(xì)胞、HCC1954BL細(xì)胞 CHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBMEC細(xì)胞、NCI-H220細(xì)胞、MDA157細(xì)胞 BGC-823 Cell:人胃腺癌細(xì)胞系 HFF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-L細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞、HCC827細(xì)胞 TOV-21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H22-H8D8細(xì)胞、H865細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞 RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、H-1793細(xì)胞、HFLS細(xì)胞 MuM-2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs688(A)T細(xì)胞、Calu6細(xì)胞、OV2008細(xì)胞 Daoy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB-17細(xì)胞、UMRC-2細(xì)胞、Rat-2細(xì)胞 VAESBJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ELD-1細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞 A-375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647ell細(xì)胞、A.704細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞 NK10a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuTu 80細(xì)胞、UMUC14細(xì)胞、SN12PM6細(xì)胞 HLMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 7細(xì)胞、ML-2細(xì)胞、HPaSteC(HPSC)細(xì)胞 HEK293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SKG3A細(xì)胞、B4G12細(xì)胞 FHL124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT0404細(xì)胞、MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞 CAL 78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-387細(xì)胞、H-1915細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞 "
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