"786-O Cell:人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞源自一位原發(fā)性腎透明細(xì)胞癌患者。該細(xì)胞有微絨毛和橋粒,能在軟瓊脂上生長(zhǎng)。此細(xì)胞生成一種PTH(甲狀旁腺素)樣的多肽,與乳癌和肺癌中生成的肽相似,其N端序列與PTH相似,具有PTH樣活性,分子量為6000D。 OCI-LY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 445細(xì)胞、L6細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞 HECV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 19Lu細(xì)胞、NCTC 3960細(xì)胞、PANC-28細(xì)胞 KYSE 270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP92細(xì)胞、Hs739T細(xì)胞、G-361細(xì)胞 293/EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-180細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 786-O Cell:人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞凍存基本方法:1.細(xì)胞:選對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,收集細(xì)胞24小時(shí)前換液一次。2.計(jì)數(shù):按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù),令細(xì)胞密度達(dá)5×10(6)/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。4.分裝:分裝入無(wú)菌安剖中,每安剖加1.5毫升細(xì)胞懸液。5.封口:用塑料安剖時(shí)擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細(xì)檢查,定要封嚴(yán),必要時(shí)可浸入藍(lán)色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時(shí)因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細(xì)胞名稱,凍存日期,以便日后查找。細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 如何進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時(shí)搖動(dòng)令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細(xì)胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,計(jì)數(shù),調(diào)整細(xì)胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)?!緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存,但為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí),要做好防護(hù)工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細(xì)胞復(fù)蘇的時(shí)候,有些初次實(shí)驗(yàn)員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時(shí)候是否有哪些細(xì)節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺(tái)中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有37度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 PSN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞、293E細(xì)胞 HET-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3190細(xì)胞、Caco2-BBE細(xì)胞、LX-2細(xì)胞 SRA 01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN4細(xì)胞、CEM-0細(xì)胞、MC38細(xì)胞 HS-766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1353細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞、C32r細(xì)胞 T173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-G2/C3A細(xì)胞、GOS3細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 786-O Cell:人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)菌操作步驟和注意事項(xiàng):1.打開無(wú)菌工作臺(tái)及凈化室的紫外燈,消毒半小時(shí)以上。2.進(jìn)入凈化室前先關(guān)閉紫外燈,打開超凈臺(tái)風(fēng)機(jī),等待30min以上,以排盡臭氧。3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。4.風(fēng)淋2分鐘。5.0.1%水泡手,擦干。6.點(diǎn)燃酒精燈;超凈臺(tái)內(nèi)應(yīng)避免放入過多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。7.打開各類瓶蓋前先過火,以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰,鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。8.水平式風(fēng)機(jī)的超凈臺(tái),應(yīng)使瓶口斜置,應(yīng)盡量避免瓶口敞開直立。9.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個(gè)不同的細(xì)胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細(xì)胞系的互相混雜污染。10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺(tái)上的液體,立即用酒精棉球擦凈。11.操作完畢后恢復(fù)工作臺(tái)面。 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 NTera2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK13細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞 M210B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞 C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT4細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞 Kit 225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-F442A細(xì)胞、PIEC細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞 SKLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel1細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞 NCIH1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2-C12細(xì)胞、MH-S細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞 BE2-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/FU細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞 786-O Cell:人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞系 UPCI:SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞 NCIH1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570E細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞 MC-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CESS細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞 A2780CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞 COV434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRS-82細(xì)胞、NWA細(xì)胞、FL83B細(xì)胞 H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-1細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、H1618細(xì)胞 SupT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB611細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞 NCI-H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞 Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL 100細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞 Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL 100細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞 ELD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP-1細(xì)胞、22Rv-1細(xì)胞、BT-483細(xì)胞 ASPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-144細(xì)胞、TE671/RD細(xì)胞、MFM223細(xì)胞 HS-683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori3細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞 KNS-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1876細(xì)胞、RS1細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞 Eca-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL1細(xì)胞、F-36P細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞 SW1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63NS1細(xì)胞、SUDHL-2細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞 P3X63NS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 30細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞、VP 267細(xì)胞 NCI-H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GRSL細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞 NCIH748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375S2細(xì)胞、Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、SUDHL-10細(xì)胞 MUTZ3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-76細(xì)胞、HCC202細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞 LAPC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA Dx5細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞、B95.8細(xì)胞 MSTO-211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-748細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞 MHCC97L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSADX5細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞 hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞 OVCA432_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-A549細(xì)胞、130-T細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞 HCT-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293E細(xì)胞、J-82細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞 MC3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Panc 02細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞 EB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo320細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞 M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GBCSD細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞、H676B細(xì)胞 SNGM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2009細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞、293-FT細(xì)胞 DOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM12878細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞 PLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs739T細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞 NCIH82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT55細(xì)胞、NTera 2細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞 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