"BT-549 Cell:人乳腺導管癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:該細胞1978年由W.G.Coutinho和E.Y.Lasfargues建系,源自一位72歲患有乳腺導管癌的白人女性,來源組織包括乳頭及浸潤導管。該細胞形態(tài)包括上皮樣細胞及多核巨細胞,可分泌一種粘性物質。 SK-N-MC細胞系相關產(chǎn)品:Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞 VK2細胞系相關產(chǎn)品:COR-L26細胞、H2170細胞、H2171細胞 Line 207細胞系相關產(chǎn)品:HCC1806細胞、BC-022細胞、U251-MG細胞 U87-MG細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 BT-549 Cell:人乳腺導管癌細胞系 細胞凍存基本方法:1.細胞:選對數(shù)生長期細胞,收集細胞24小時前換液一次。2.計數(shù):按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液,計數(shù),令細胞密度達5×10(6)/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細胞懸液。5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細檢查,定要封嚴,必要時可浸入藍色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細胞名稱,凍存日期,以便日后查找。細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2傳代 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 U-226AR1細胞系相關產(chǎn)品:H-1417細胞、U-937細胞、WML2細胞 KPL1細胞系相關產(chǎn)品:HS-940-T細胞、C2BBe1細胞、MV 3細胞 TM-4細胞系相關產(chǎn)品:OAC-P4C細胞、HEC-1-B細胞、CCD966SK細胞 Hs281T細胞系相關產(chǎn)品:HBdSMC細胞、T9細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞 293S細胞系相關產(chǎn)品:CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞 細胞生長特性:貼壁生長 BT-549 Cell:人乳腺導管癌細胞系 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! 細胞形態(tài)特性:上皮樣 SN12-PM6細胞系相關產(chǎn)品:Panc08.13細胞、CNE-1細胞、108CC15細胞 CFSC-2G細胞系相關產(chǎn)品:H2405細胞、CCD-18Co細胞、NK 10a細胞 EFO27細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞 CCD-841-CoTr細胞系相關產(chǎn)品:MEF (CF-1)細胞、LS513細胞、HCoEpiC細胞 H1876細胞系相關產(chǎn)品:22Rv-1細胞、Mo7e細胞、GC9811-P細胞 hEEC細胞系相關產(chǎn)品:Pa017C細胞、A-2780細胞、MM.1S細胞 Mac-1細胞系相關產(chǎn)品:U87細胞、SNU761細胞、3396細胞 BT-549 Cell:人乳腺導管癌細胞系 H1581細胞系相關產(chǎn)品:HSC-6細胞、L 132細胞、SPDC-CCL141細胞 NCI-H292細胞系相關產(chǎn)品:FC33細胞、GM04671細胞、Eca-109細胞 SNU-407細胞系相關產(chǎn)品:HCC-44細胞、SK UT 1細胞、TE-1細胞 NE-1細胞系相關產(chǎn)品:159 PT細胞、MGC803細胞、HSC-6細胞 RGB細胞系相關產(chǎn)品:RL細胞、LTEP a2細胞、SK-MES細胞 MNNG/HOS Clone F-5細胞系相關產(chǎn)品:SJSA1細胞、DHL-16細胞、GM02131A細胞 VM-CUB-1細胞系相關產(chǎn)品:BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞 Okayama University Medical School-27細胞系相關產(chǎn)品:EHEB細胞、HT 1080.T細胞、2008細胞 U-2 OS細胞系相關產(chǎn)品:CL 1-0細胞、HSAS3細胞、MMQ細胞 U-2 OS細胞系相關產(chǎn)品:CL 1-0細胞、HSAS3細胞、MMQ細胞 U-87MG ATCC細胞系相關產(chǎn)品:BJ [Human fibroblast]細胞、SW 1222細胞、HT-1376細胞 SW-620細胞系相關產(chǎn)品:COR-L51細胞、CHO/dhFr-細胞、SW1088細胞 PANC0203細胞系相關產(chǎn)品:SK-BR3細胞、SNU423細胞、HeLa 229細胞 SG231細胞系相關產(chǎn)品:K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞 CORL88細胞系相關產(chǎn)品:H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞 CCRF/CEM-C7細胞系相關產(chǎn)品:SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞 Hs839T細胞系相關產(chǎn)品:U-87MG ATCC細胞、PANC0203細胞、SK-Hep1細胞 SKMEL3細胞系相關產(chǎn)品:H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞 HCC366細胞系相關產(chǎn)品:L-363細胞、KYSE70細胞、GM00637H細胞 LL/2 (LLC1)細胞系相關產(chǎn)品:HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞 HM細胞系相關產(chǎn)品:HCC1143細胞、P388D1細胞、SK-Mel 1細胞 THC-8307細胞系相關產(chǎn)品:LS 123細胞、SW-403細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞 PVEC細胞系相關產(chǎn)品:L-5178-Y細胞、MDAMB453細胞、HeLaS3細胞 HPMEC細胞系相關產(chǎn)品:Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞 CHP-100細胞系相關產(chǎn)品:PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞 H-196細胞系相關產(chǎn)品:HCC941122細胞、NCIH510細胞、X63Ag8-653細胞 LA-N-6(OAN)細胞系相關產(chǎn)品:Mel RM細胞、MHCC97H細胞、NG 108-15細胞 H-1993細胞系相關產(chǎn)品:Panc02細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、293A細胞 ES-2細胞系相關產(chǎn)品:OCI/AML-2細胞、GMK,BSC-1細胞、TOV-112細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關產(chǎn)品:GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞 HME-1細胞系相關產(chǎn)品:ACT-1細胞、GM02219C細胞、MIHA細胞 CHP 212細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1806細胞、H-1155細胞、KMS-11細胞 PANC.1細胞系相關產(chǎn)品:HEK293T/17細胞、Kupffer細胞、SCC 9細胞 AN3 CA細胞系相關產(chǎn)品:BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞 COLO206F細胞系相關產(chǎn)品:TC7細胞、INS1細胞、MonoMac6細胞 MM1-S細胞系相關產(chǎn)品:NR8383細胞、L-M (TK-)細胞、UMRC2細胞 OK細胞系相關產(chǎn)品:Y3-Ag123細胞、C-8161細胞、KU 812細胞 H-508細胞系相關產(chǎn)品:LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞 SNU-423細胞系相關產(chǎn)品:CNE-2細胞、SRA01/04 (HLE)細胞、CTLA4 Ig-24細胞 Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞 MIN-6細胞系相關產(chǎn)品:SCC090細胞、DCS細胞、Caov-4細胞 RPMI 2650細胞系相關產(chǎn)品:JIMT細胞、HuLEC-5a細胞、H-735細胞 OVCA433_Bast細胞系相關產(chǎn)品:AE 1201細胞、Bat lung細胞、T1-73細胞 BT-549 Cell:人乳腺導管癌細胞系 EoL-1 cell細胞系相關產(chǎn)品:Hs746-T細胞、NGP細胞、143BTK-細胞 CCK-81細胞系相關產(chǎn)品:H6c7細胞、MA-c細胞、Mouse Colon 38細胞 KYSE 50細胞系相關產(chǎn)品:HeLa S3細胞、HM1900細胞、Huh7.5.1細胞 ECC1細胞系相關產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 24細胞、GM-3573細胞、DKMG細胞 Mo7e細胞系相關產(chǎn)品:H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞 1.1B4細胞系相關產(chǎn)品:LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞 P3-X63-Ag8-653細胞系相關產(chǎn)品:H250細胞、JKT1細胞、SJSA細胞 HMCB細胞系相關產(chǎn)品:Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MDCKII-WT細胞、NPC-TW 01細胞 JM細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H929細胞、Pro-5WgaRI3C細胞、GM03190A細胞 RT4-D6P2T細胞系相關產(chǎn)品:Jiyoye(P-2003)細胞、IAR 20細胞、QSG-7701細胞 H-345細胞系相關產(chǎn)品:V79細胞、X63.Ag8.653細胞、MDA-PCa-2b細胞 K 562細胞系相關產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC 256細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞、SNU16細胞 "
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