"A-204 Cell:人橫紋肌肉瘤細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：在裸鼠中成瘤。
HAC-84細胞系相關產(chǎn)品：Panc-3_27細胞、KNS62細胞、Hs-729-T細胞
U14細胞系相關產(chǎn)品：IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞
Sol8細胞系相關產(chǎn)品：RAW2647細胞、Oregon J-111細胞、U-118MG細胞
293 Ad5細胞系相關產(chǎn)品：MO59J細胞、639V細胞、NCIADR.RES細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
A-204 Cell:人橫紋肌肉瘤細胞系
細胞的凍存：目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：６-１：１０傳代；每周２-３次
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
D407細胞系相關產(chǎn)品：NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
NCI-H522細胞系相關產(chǎn)品：SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞
UO-31細胞系相關產(chǎn)品：Human Kidney-2細胞、PC2細胞、MC-3T3細胞
ST-2細胞系相關產(chǎn)品：SW 756細胞、HEK-293-H細胞、JOSK-M細胞
GM00637H細胞系相關產(chǎn)品：A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞
細胞生長特性：貼壁生長
A-204 Cell:人橫紋肌肉瘤細胞系
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
HOC1細胞系相關產(chǎn)品：LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞
HT-29細胞系相關產(chǎn)品：HS578細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HcerEpic細胞
U251細胞系相關產(chǎn)品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞
OVCAR-3細胞系相關產(chǎn)品：TE10細胞、SW1417細胞、LN-382細胞
TSCC1細胞系相關產(chǎn)品：SW-756細胞、M4e細胞、HuP-T4細胞
CW2細胞系相關產(chǎn)品：Epstein-Barr-2細胞、MJ細胞、HS 683T細胞
Hs688(A)T細胞系相關產(chǎn)品：WM266-4細胞、mousepodocyte細胞、HTR8/SVneo細胞
A-204 Cell:人橫紋肌肉瘤細胞系
C-4I細胞系相關產(chǎn)品：BMF細胞、YH-13細胞、Pa18C細胞
AHH1細胞系相關產(chǎn)品：GOTO細胞、DKMG細胞、NCI-HUT-596細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關產(chǎn)品：HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
LC-2 ad細胞系相關產(chǎn)品：C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞
C8-D1A細胞系相關產(chǎn)品：MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞
10T1/2細胞系相關產(chǎn)品：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
ECC10細胞系相關產(chǎn)品：HCT116細胞、AM-38細胞、UPCISCC090細胞
Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H-69細胞、WI38細胞、H-292細胞
HM細胞系相關產(chǎn)品：HCC1143細胞、P388D1細胞、SK-Mel 1細胞
MOLT-4細胞系相關產(chǎn)品：HEL92.1.7細胞、RGC-5細胞、SNU668細胞
EFO-27細胞系相關產(chǎn)品：PLA-802細胞、NCIH1092細胞、PNT1A細胞
SK-NMC細胞系相關產(chǎn)品：Swiss 3T6細胞、PAI細胞、MAEC細胞
RBL2H3細胞系相關產(chǎn)品：b.End3細胞、NCTC 929細胞、NCI-SNU-449細胞
A375mel細胞系相關產(chǎn)品：SKLMS-1細胞、SGC-7901細胞、JHH2細胞
JROECL 19細胞系相關產(chǎn)品：BI-Mel細胞、KRC Y細胞、HBSMC細胞
TE15細胞系相關產(chǎn)品：N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
CAL 33細胞系相關產(chǎn)品：HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
ARO81-1細胞系相關產(chǎn)品：IBRS2細胞、Bowes melanoma cells細胞、CoCL2細胞
NT2-D1細胞系相關產(chǎn)品：Lewis Lung細胞、SK-MES細胞、A253細胞
SUDHL2細胞系相關產(chǎn)品：L-M (TK-)細胞、SV-HUC細胞、NCTC929細胞
BEL7402細胞系相關產(chǎn)品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、2PK3細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞
CaSki細胞系相關產(chǎn)品：HSF2細胞、EL 4細胞、KMS26細胞
V 79-4細胞系相關產(chǎn)品：FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞
D341細胞系相關產(chǎn)品：hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞
TCC-PAN2細胞系相關產(chǎn)品：Suzhou Human Glioma-44細胞、LMH細胞、IOSE-Van細胞
SJCRH30細胞系相關產(chǎn)品：SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
MUTZ1細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63Ag8細胞、Human Epithelioma-2細胞、HITT15細胞
HuH-6細胞系相關產(chǎn)品：CEM-C7細胞、4-1st細胞、M-1 myeloid leukemia細胞
S.B.細胞系相關產(chǎn)品：BEL7402細胞、HEK-293-EBNA細胞、DU 145細胞
293GP細胞系相關產(chǎn)品：BT.549細胞、H-23細胞、R3/1細胞
HNEpC細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat-77細胞、M-NFS-60細胞、C4-I細胞
Pt K2 (NBL-5)細胞系相關產(chǎn)品：NP69SV40T細胞、Cor L88細胞、NCIH1650細胞
ACHN細胞系相關產(chǎn)品：HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞
HFE-145細胞系相關產(chǎn)品：VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞
NCI-H727細胞系相關產(chǎn)品：T-ALL 1細胞、NCI-H1993細胞、KG-1細胞
BE(2)M-17細胞系相關產(chǎn)品：P3X63 AG8-653細胞、GM00637B細胞、50.B1細胞
DHL-16細胞系相關產(chǎn)品：MyLa2059細胞、NS1-Ag4細胞、ARO81-1細胞
TB1 Lu細胞系相關產(chǎn)品：SK_HEP1細胞、P3HR-1細胞、LA-N-1細胞
MV4-11細胞系相關產(chǎn)品：EBTr (NBL-4)細胞、AC16 [Human hybrid]細胞、SKLU01細胞
HTR-8/SVneo細胞系相關產(chǎn)品：DV-90細胞、hCMEC/D3細胞、PC-12細胞
MDA-MB-435細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H28細胞、3T3 L1細胞、HEK 293FT細胞
H-250細胞系相關產(chǎn)品：H520細胞、Functional Liver Cell-7細胞、OUMS-27細胞
NCI-H1869細胞系相關產(chǎn)品：LS-1034細胞、ssMCF7細胞、TGHAVSMC細胞
A-204 Cell:人橫紋肌肉瘤細胞系
H1581細胞系相關產(chǎn)品：HSC-6細胞、L 132細胞、SPDC-CCL141細胞
NCIH810細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2126細胞、NFHIOSE-29細胞、LS513細胞
C32 [Human melanoma]細胞系相關產(chǎn)品：T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞
RPMI8226/S細胞系相關產(chǎn)品：HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞
H-660細胞系相關產(chǎn)品：P3X63細胞、WM266mel細胞、Y3-Ag123細胞
EFM192細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL8細胞、Hs 578.Bst細胞、G-292, clone A141B1細胞
P 3 HR 1細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL-31細胞、Monomac-1細胞、NCI-HUT-460細胞
HN6細胞系相關產(chǎn)品：HPB-ALL細胞、NOZ細胞、MOPC細胞
SW620細胞系相關產(chǎn)品：Granta 519細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、Vero-76細胞
BNL.CL2細胞系相關產(chǎn)品：TFK-1細胞、MA-104細胞、NCIH244細胞
NCIH889細胞系相關產(chǎn)品：LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞
HCC0095細胞系相關產(chǎn)品：Ha Fe細胞、BEL 7404細胞、HEK 293-F細胞
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