"NB4 Cell:急性早幼粒細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 WI-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞 SKG IIIa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS578T細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞 COR-L23/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-E6細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞 L cells (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas 422細(xì)胞、H1882細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 NB4 Cell:急性早幼粒細(xì)胞系 細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中相關(guān)問(wèn)題總結(jié):懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無(wú)法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過(guò)高之轉(zhuǎn)速,將造成細(xì)胞死亡;細(xì)胞之接種密度為何?依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)之一重要原因;細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來(lái)細(xì)胞生長(zhǎng)用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級(jí)和無(wú)菌過(guò)濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級(jí),必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無(wú)菌狀況,次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機(jī)會(huì)。若要過(guò)濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細(xì)胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽vaporphase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。-20°C不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細(xì)胞欲冷凍保存時(shí),細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度?冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 SNU601細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0030細(xì)胞、WiDr-TC細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞 Ishikawa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C166細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞 PG-4 (S+L-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SB細(xì)胞、MCF7細(xì)胞、COC1/CDDP細(xì)胞 LOU-NH-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/AdrR細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞 B35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-3細(xì)胞、NCI-H1688細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) NB4 Cell:急性早幼粒細(xì)胞系 細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書 P3X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3570細(xì)胞、L6565細(xì)胞、TE 354.T細(xì)胞 As-PC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435-S細(xì)胞、U373細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞 MDA175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL28細(xì)胞、HN6細(xì)胞、MDA-MB-435細(xì)胞 HLMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 7細(xì)胞、ML-2細(xì)胞、HPaSteC(HPSC)細(xì)胞 TOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、H441細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞 H4-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-624細(xì)胞、CESS細(xì)胞、THEECs細(xì)胞 NB19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHC-ST1細(xì)胞、U-251 MG細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞 NB4 Cell:急性早幼粒細(xì)胞系 TE 85.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)M17細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞 WIL2S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW細(xì)胞、HOC細(xì)胞、SF-539細(xì)胞 Hs-578-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2196細(xì)胞、OKa-C-1細(xì)胞、H-2228細(xì)胞 HS-294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-4細(xì)胞、RIN-m5F細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞 Ly8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vx-2細(xì)胞、LU451細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞 HCT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-3J細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞、OVCAR 8細(xì)胞 RH-35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2452細(xì)胞、Psi2-DAP細(xì)胞、H498細(xì)胞 COV 434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/EBNA細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞、HT1197細(xì)胞 IOSE80UBC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL1細(xì)胞、SW 962細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞 HANK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-38細(xì)胞、H-1781細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞 LNCaP-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL26細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞、RA 1細(xì)胞 MOLT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HME-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞 OVCAR 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb-2細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞、SW527細(xì)胞 SNGM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2009細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞、293-FT細(xì)胞 PVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-5178-Y細(xì)胞、MDAMB453細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞 G 401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9細(xì)胞、HO8910細(xì)胞、HEB細(xì)胞 HL-60 Clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHUA細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、TE-6細(xì)胞 HMEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain V細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞、H1184細(xì)胞 Ramos 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE 135-E6/E7細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞 JTC-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、HSC2細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞 HEK 293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKML-28細(xì)胞、FHs 74 Int細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞 NCI-H1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JBV細(xì)胞、NHEK細(xì)胞、ESC-410細(xì)胞 J774 A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1040細(xì)胞、F-81細(xì)胞、MCA205細(xì)胞 Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-10細(xì)胞、JEG3細(xì)胞、HBVP細(xì)胞 NCI-H1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL2141細(xì)胞、Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞 NCIH1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1498細(xì)胞、NR-8383細(xì)胞、ES2細(xì)胞 Nthy-ori 3-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 636 T細(xì)胞、LYR細(xì)胞、L 929細(xì)胞 Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupT1細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、IR983F細(xì)胞 WI-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞 Caco-2 BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 6666細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞 HEK;293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954 BL細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞 SKG3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE29細(xì)胞、B-3細(xì)胞、SW-48細(xì)胞 C1498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-3細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞 UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞 HFLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC11細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞、HEM細(xì)胞 TE 32.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 767細(xì)胞、WEHI-3B細(xì)胞、C1498細(xì)胞 NCI-H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82COT細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞、HT144-mel細(xì)胞 C8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1238細(xì)胞、H196細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞 TFK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1A細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞 NCI-H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS-1細(xì)胞、MAC1細(xì)胞、K-1735細(xì)胞 Jurkat E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CLL-CII細(xì)胞、Colon-26細(xì)胞、HB 611細(xì)胞 YD-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ketr3細(xì)胞、NSC34細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞 NCTC clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB157細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞 NB4 Cell:急性早幼粒細(xì)胞系 H22-H8D8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞 SK.MEL.28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1770細(xì)胞、U-251細(xì)胞、Z138細(xì)胞 NIT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA 87細(xì)胞、Co-115細(xì)胞、HCC202細(xì)胞 C-4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan2細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞 Oregon J-111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC6細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞、ARIP細(xì)胞 TOV21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1563細(xì)胞、MDA-231細(xì)胞、OCI-Ly18細(xì)胞 HCC 2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1930細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、N2a細(xì)胞 SVHUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2052細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞 MOVAS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Liver-7702細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞、WM266細(xì)胞 MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly3細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞 SKNBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PZ-HPV-7細(xì)胞、L-132細(xì)胞、H-446細(xì)胞 Hs821T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATC241細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞、HFF1細(xì)胞 "
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