"NCI-H1975 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 細(xì)胞背景資料:這株細(xì)胞于1988年七月建株。組織提供者是一位非吸煙人士。 HCV 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly19細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞 PANC-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHAGOK1細(xì)胞、NCI-H510A細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞 SK MEL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 420細(xì)胞、AKR細(xì)胞、Case 3細(xì)胞 KPL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-940-T細(xì)胞、C2BBe1細(xì)胞、MV 3細(xì)胞 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 NCI-H1975 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)相關(guān)問(wèn)題總結(jié):支原體(mycoplasma)污染的細(xì)胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗(yàn)之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細(xì)胞株,無(wú)法以其外觀分辨之;支原體污染會(huì)對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細(xì)胞之生長(zhǎng)參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前,必須確認(rèn)細(xì)胞為mycoplasma-free,實(shí)驗(yàn)結(jié)果之?dāng)?shù)據(jù)方有意義;偵測(cè)出細(xì)胞株有支原體污染時(shí),該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細(xì)胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每?jī)芍芤淮? 以無(wú)菌蒸餾水或無(wú)菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會(huì)偏暗紅色,且pH值會(huì)越來(lái)越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會(huì)逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來(lái)越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會(huì)隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果,將造成細(xì)胞生長(zhǎng)停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時(shí),可以通入無(wú)菌過(guò)濾之CO2,以調(diào)整pH值;購(gòu)買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購(gòu)買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 504細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞 MOVAS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Liver-7702細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞、WM266細(xì)胞 H-2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149-PT細(xì)胞、SCL II細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞 HEK293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC 4-10細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞、PL12細(xì)胞 AZ-521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞、T98-G細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) NCI-H1975 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒(méi)有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過(guò)度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉! 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣 Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2452細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞 RINm-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-2細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞、hs 68細(xì)胞 MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly3細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞 MGC-803細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMC-G1細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞、SKMEL-24細(xì)胞 LC2/Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM1細(xì)胞、McG-1細(xì)胞、Hep II細(xì)胞 MDCK.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞 HCC-2279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAEC細(xì)胞、UMRC2細(xì)胞、UO31細(xì)胞 NCI-H1975 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系 HCC2218細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 819.T細(xì)胞、rHSC-99細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞 MDAMB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-V細(xì)胞、H-596細(xì)胞、no-11細(xì)胞 PC3M-1E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMx721.174.T2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞 RMG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-GalK1細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞 University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC366細(xì)胞、CG4細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞 MG-HU-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-32細(xì)胞、CCD-1112sk細(xì)胞、LTEPa2細(xì)胞 NHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP-89細(xì)胞、CNE細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞 LCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC-Y細(xì)胞、Tj-905細(xì)胞、CT-26細(xì)胞 LC-1-sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH35細(xì)胞、P30OHK細(xì)胞、Panc_03_27細(xì)胞 LC-1-sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH35細(xì)胞、P30OHK細(xì)胞、Panc_03_27細(xì)胞 PLC/PRF5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 510細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞 3T3-442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-MeWo細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞 WSU-DLCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-95-2細(xì)胞、MIO-M1細(xì)胞、CEM/C1細(xì)胞 M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:1E8-H細(xì)胞、H548細(xì)胞、Panc-03.27細(xì)胞 VE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-2spd(ts)細(xì)胞、LM3細(xì)胞、EA.Hy926細(xì)胞 CMT-167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCLC21H細(xì)胞、Hs-578-T細(xì)胞、SU8686細(xì)胞 NCTC-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1417細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞 MCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM15452細(xì)胞、293T細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞 H-EMC-SS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-40細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞 HCC0366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF/Adr細(xì)胞、RN-c細(xì)胞、NTC200細(xì)胞 TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:tdott細(xì)胞、NCIH208細(xì)胞、Hs 840.T細(xì)胞 MHCC-LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-28I2細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞 A-72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-157細(xì)胞、aTC1 Clone 6細(xì)胞、NU-GC-4細(xì)胞 KM12SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV90細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞、SW 948細(xì)胞 NeHepLxHT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C2A細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞、SNU449細(xì)胞 OCI-Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T84細(xì)胞、K-1735細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞 ML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA細(xì)胞、H2452細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞 BV-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG IIIa細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞、Mo7e細(xì)胞 FTC-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C1細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞、NSC34細(xì)胞 QBC-939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC13細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞 H-35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 394細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞 GalK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaEs17細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞、MB-49細(xì)胞 T-CAM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52PE細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞、H1993細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞、FHL124細(xì)胞 NCI-H165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H69C細(xì)胞、MC-4細(xì)胞、HPF細(xì)胞 H-2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT116/L細(xì)胞、LoVo細(xì)胞、H1563細(xì)胞 NCI-HUT-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J HR-1細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞、MF2059細(xì)胞 C8166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 84細(xì)胞、Pa17C細(xì)胞、L-929細(xì)胞 NCIH2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-62細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞 SHEE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320/DM細(xì)胞、SBC5細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞 SHEE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320/DM細(xì)胞、SBC5細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞 GM00346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞、BT474細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞 Jiyoye (P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1299細(xì)胞、COS1細(xì)胞、HMCB細(xì)胞 NCI-H1975 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系 Duck embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC12細(xì)胞、SCLC21H細(xì)胞、Sp 2817細(xì)胞 CemT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1937細(xì)胞、X63-Ag8細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞 MV4II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞 AC16 [Human hybrid]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86.86細(xì)胞、L2細(xì)胞、L23/P細(xì)胞 P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1618細(xì)胞、NBLS細(xì)胞、TGW細(xì)胞 CAL 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK2細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞 NCI-H748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARH 77細(xì)胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞、COR-L26細(xì)胞 NR8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAPI細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞、HEK293細(xì)胞 LNCaP FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H446細(xì)胞、SMC-1細(xì)胞、H1092細(xì)胞 TE32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-3T3細(xì)胞、LC1-Sq細(xì)胞、MDA-MB-415細(xì)胞 CHP 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1806細(xì)胞、H-1155細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞 SUP-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7951細(xì)胞、WC00079細(xì)胞、Cor L88細(xì)胞 "
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