來源于BL21菌株。
是大腸桿菌B/r型菌株(E.coli B/r),在araBAD操縱子的araB位點(diǎn)含有T7 RNA聚合酶基因,T7 RNA聚合酶基因的表達(dá)可以通過阿拉伯糖或者葡萄糖來調(diào)節(jié),但菌株不含有l(wèi)on蛋白酶。
菌株的蛋白表達(dá)量往往低于BL21(DE3).
BL21-AI是膜外蛋白酶OMPT的缺陷型菌株。該酶的缺失能夠有效防止表達(dá)的異源目的蛋白在細(xì)菌體內(nèi)的降解。
Brian Caliendo (Voigt 實(shí)驗(yàn)室)報(bào)道過pCP20質(zhì)粒比較難于轉(zhuǎn)化到這個(gè)感受態(tài)細(xì)胞中,而pCP20轉(zhuǎn)化到其他菌株中都很正常,但是菌體原因未知。
使用L-阿拉伯糖誘導(dǎo)araBAD啟動(dòng)子下游的蛋白表達(dá)。使用葡萄糖可以抑制araBAD啟動(dòng)子下游的蛋白表達(dá)。注意:即使不加葡萄糖,BL21AI細(xì)胞的araBAD啟動(dòng)子下游的本底蛋白表達(dá)水平仍然很低,加入葡萄糖后能夠進(jìn)一步的降低本底蛋白的表達(dá)水平。
BL21-AI感受態(tài)細(xì)胞適用于任何以T7啟動(dòng)子為基礎(chǔ)的表達(dá)載體,能夠進(jìn)行高水平的重組蛋白表達(dá)。
因?yàn)榫牦w內(nèi)的T7 RNA聚合酶水平能夠進(jìn)行有效調(diào)節(jié),BL21-AI感受態(tài)細(xì)胞能夠有效表達(dá)對(duì)其他BL21細(xì)胞有毒或生長(zhǎng)抑制的蛋白。從BL21-AI菌株中獲得目的重組蛋白產(chǎn)量,和其他BL21菌株產(chǎn)量相當(dāng)。
建議選擇該菌株進(jìn)行蛋白表達(dá)的條件如下:1. 你 在使用T7啟動(dòng)子載體(高拷貝或者低拷貝都可以)進(jìn)行蛋白表達(dá)。2.使用其他BL21進(jìn)行蛋白表達(dá)時(shí),你觀察到明顯的細(xì)菌生長(zhǎng)的抑制作用。3.你在表達(dá)一個(gè)已知的毒性蛋白。
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