BL21-Gold(DE3)是BL21系列細胞的升級版,提升了轉(zhuǎn)化效率并且能夠產(chǎn)生高質(zhì)量的小提DNA。
BL21-Gold(DE3)是利用T7 RNA聚合酶啟動進行蛋白表達的載體的高效表達菌株。本宿主菌來源于E.coli B,缺乏Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶,能夠有效防止目標蛋白降解。
BL21-Gold(DE3)感受態(tài)細胞具有Hte表型,該表型增加了細胞的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率。另外,菌株內(nèi)的endonuclease I (endA)編碼基因被失活了,而該蛋白酶(endA)能夠在大部分的質(zhì)粒小提時,快速降解質(zhì)粒DNA。這兩個菌株明顯特征,使得該菌株能夠直接用來擴增克隆蛋白表達構(gòu)建質(zhì)粒。
由于在未使用IPTG進行誘導表達時,宿主菌內(nèi)仍然有少量T7 聚合酶合成,這能夠?qū)е律倭康哪康牡鞍缀铣伞H绻康牡鞍资嵌拘缘鞍椎脑?,會抑制細菌生長,甚至導致細菌死亡。所以本菌株不適合表達對細菌有毒性或生長抑制的蛋白。
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