"SNU-182：人肝癌傳代細(xì)胞
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
CoCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞
Hs 863.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-Lec1細(xì)胞、A431細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞(絕大部分１min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-３細(xì)胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個(gè)細(xì)胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
SNU-182：人肝癌傳代細(xì)胞
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
COLO678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30 OHK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞、H9細(xì)胞
MLE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA361細(xì)胞、Sp 2817細(xì)胞、TMK1細(xì)胞
MGH-U1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML2細(xì)胞、IM-9細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SNU-182：人肝癌傳代細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
MESSADX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME 3M細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞
no-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaca.2細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞、HRIF細(xì)胞
NCI-SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL4細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞
H-1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-64細(xì)胞、L02細(xì)胞、PA-TU S細(xì)胞
傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng)，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶?jī)?nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
Tu-212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-475細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞、V79-4細(xì)胞
Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABC-1細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞、3AO細(xì)胞
Hs 688(A).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC25細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞
C-8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB-985細(xì)胞、BS-C-1細(xì)胞、SNU-423細(xì)胞
CAL-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7404細(xì)胞、RF/6A細(xì)胞、NCI-HUT-292細(xì)胞
MRC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE-1細(xì)胞、DSL6A/C1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞
KYSE180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC-96細(xì)胞、SU4細(xì)胞、JROECL21細(xì)胞
Hs-274-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GI-1細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞、Pfeiffer細(xì)胞
MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN 45細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞
RPTEC TERT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786O細(xì)胞、H2591細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞
IPI-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞、TE-14細(xì)胞
McA-RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1373細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞、SMC-1細(xì)胞
H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH295R細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞
Hs888 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE-4C細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞
Hs888T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4 I細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞、GOS3細(xì)胞
H1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-CA 432細(xì)胞、KCL22S細(xì)胞、YAC細(xì)胞
H1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-CA 432細(xì)胞、KCL22S細(xì)胞、YAC細(xì)胞
RPE-hTERT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1.6細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞、D-283MED細(xì)胞
HCC1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞
SKNFI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞、NCI-H1155細(xì)胞、WBF344細(xì)胞
Lu99A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F1細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞、MBT2細(xì)胞
HEK 293 EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rca-B細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞
MHH-CALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283MED細(xì)胞、W133細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞
NCI H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2/0 Ag-14細(xì)胞、SNU668細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞
DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1184細(xì)胞、UPCI:SCC090細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞
H-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSU-Pr1細(xì)胞、TGBC-11-TKB細(xì)胞、HEp-2細(xì)胞
SNU-182：人肝癌傳代細(xì)胞
Strain L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LED-WiDr細(xì)胞、H1915細(xì)胞、MT-4細(xì)胞
H-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPC-Y5細(xì)胞、H727細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞
HFL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLaS3細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞
DU 4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL68細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞
alpha-TC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-527細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞、SLK細(xì)胞
COLO-824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 341細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞、M1細(xì)胞
Panc05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCPEpiC細(xì)胞、SW.620細(xì)胞、AtT20細(xì)胞
Strain V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NeHepLxHT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞
H-740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 812細(xì)胞、H-1436細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞
H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUASMC細(xì)胞、JHH-2細(xì)胞、Daudi細(xì)胞
MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CALU1細(xì)胞、GT38細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞
RSC-96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-52細(xì)胞、769-P細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞
NALM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos (RA)細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞、CTV1細(xì)胞
H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞
NCI H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC78細(xì)胞、BAR-T細(xì)胞
NP69SV40T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3E1細(xì)胞、HOEC細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞
P3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW48細(xì)胞、P3-x63-Ag8 653細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞
HCC366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-363細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞
V-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-5細(xì)胞、H9細(xì)胞、SKM1細(xì)胞
AtT 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN13細(xì)胞、A549/ATCC細(xì)胞、MCF7/WT細(xì)胞
RPMI 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 53細(xì)胞、SR-786細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞
Panc05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCPEpiC細(xì)胞、SW.620細(xì)胞、AtT20細(xì)胞
MT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAC細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞、BBE細(xì)胞
Panc 10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373-MG細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞、SNUC2A細(xì)胞
RBE4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95-8細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞
HCC1143細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、NL-20細(xì)胞、MDCK-II細(xì)胞
LTPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH244細(xì)胞、HT-55細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞
Lieming Xu-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC細(xì)胞、H810細(xì)胞、U251n細(xì)胞
C33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細(xì)胞、A-498細(xì)胞、NGP細(xì)胞
OKT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TNC-1B12B4細(xì)胞、Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、343 MG細(xì)胞
EU-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0203細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞、DHL-5細(xì)胞
LIPF155C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-114細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞
751-NA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞、138MG細(xì)胞
BCaP-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-FET細(xì)胞、High Five細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞
SNU-182：人肝癌傳代細(xì)胞
WM 266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 167細(xì)胞、SNU484細(xì)胞、CTLL-2細(xì)胞
HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JurkatE6-1細(xì)胞、HS5細(xì)胞、ABE8.1/2細(xì)胞
143 B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-407細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞、M059J細(xì)胞
Hs 683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES細(xì)胞、LC-1細(xì)胞、138MG細(xì)胞
OVCA-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2/D1細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞
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關(guān)鍵字： SNU-182：人肝癌傳代細(xì)胞;
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