"ETCC007：人乳腺導(dǎo)管癌傳代細胞
細胞背景資料：原位導(dǎo)管癌；女性
H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞
Hs 822.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
ETCC007：人乳腺導(dǎo)管癌傳代細胞
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
TE354T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2008細胞、RPMI6666細胞、PANC 813細胞
Hs-578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV411細胞、SGC-996細胞、H-2126細胞
LTEPa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-484細胞、PTK-1細胞、MADB106細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
貼壁細胞凍存注意事項：細胞凍存液需提前配制，不可直接將DMSO加入細胞懸液中；不同細胞消化時間有差異，以實際鏡檢結(jié)果為準，大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化，消化時間不宜過長；應(yīng)選擇匯合度80%-90%左右，細胞處于對數(shù)生長期時進行凍存操作，確保細胞凍存時狀態(tài)，凍存密度可根據(jù)細胞特性進行調(diào)整；凍存細胞保存溫度應(yīng)低于-130℃，不可在-80℃長期保存。貼壁細胞凍存操作步驟：從培養(yǎng)箱中取出準備凍存的細胞；顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)并拍照記錄；酒精消毒培養(yǎng)瓶后放入安全柜中；吸去多余的培養(yǎng)基，加人2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；將細胞懸液移入15ml離心管中離心，1000rpm/min（約200g）離心3-5min；吸去多余的液體，向細胞沉淀中加入適量的凍存液，輕輕吸打混勻；按比例分裝至凍存管中；貼好標(biāo)簽后放入梯度凍存盒中；將凍存盒放入-80℃，降溫過夜后，移入液氮中保存。貼壁細胞凍存實驗準備事項：將15mL離心管、凍存管、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、細胞凍存液等從4℃冰箱中取出后，復(fù)溫至室溫，備用；程序降溫盒復(fù)溫至室溫備用。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
ETCC007：人乳腺導(dǎo)管癌傳代細胞
細胞生長特性：貼壁
PaTu 8988 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02細胞、PLC細胞、NCTC clone 929細胞
OVCA420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H 9細胞、MGH-U1細胞、CEM-CCRF細胞
NCI-H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞
Panc-08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
Hepa1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dx5細胞、CATH-a細胞、SAS細胞
AN3 CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞
ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞
ECC-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6-R細胞、Z138細胞、MDA-MB436細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C1細胞、NCIH1048細胞、NCIH841細胞
SJ-Rh 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC PK1細胞、H716細胞、RKN細胞
NCIH660細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-14細胞、UM-RC-2細胞、KAT5細胞
CoC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324細胞、L540細胞、74Int細胞
Hs 852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IR 983F細胞、HS852.T細胞、NTC-200細胞
JJN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞
RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL6細胞、H-740細胞、OKAC1細胞
ROS-17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA2B細胞、COLO 824細胞、GM03570E細胞
SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU8686細胞、KG-1細胞、Tu 177細胞
YAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-3細胞、Hu-P-T3細胞、THP 1細胞
GM00637F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMD-8細胞、H766T細胞、X63-Ag8細胞
GM00637F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMD-8細胞、H766T細胞、X63-Ag8細胞
NCI H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞
H-2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞
H-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞
RINm-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞
HPDE6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F1細胞、BCPAP細胞、RCC 786-O細胞
B-95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-cell細胞、CAMA細胞、KTC-1細胞
SNU-C2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞
EFM-192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞
H711細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMCD-3細胞、SW 982細胞、MGHU3細胞
ETCC007：人乳腺導(dǎo)管癌傳代細胞
Uhth-74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS (TE85, Clone F5)細胞、P30-OHK細胞、OSKM-1細胞
786-O RCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA 560細胞、Murine Carcinoma-38細胞、VK2/E6E7細胞
NK-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞
BEAS 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞
COLO 357細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB-49細胞、PC 61-5-3細胞、AR42J細胞
C8D1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1930細胞、HELA-GFP細胞、Dunn LM8細胞
GM01232E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.times.63 Ag8.653細胞、CATH.a細胞、RS 4;11細胞
MOLT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HME-1細胞、VeroE6細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞
PA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2a細胞、EJ-1細胞、K-562細胞
253J-Bladder-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞
HS 445T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA.MB.435細胞、PK15細胞、L-cells細胞
NPA87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU 145細胞、Sc-1細胞、SHEP1細胞
NG10815細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞
HGMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 296細胞、DSL-6A/C1細胞、OVCAR-8細胞
BE(2)M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mhh-Call 2細胞、MPP-89細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞
BLO-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-Swiss細胞、MCF 7B細胞、16HBE細胞
B16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-08.13細胞、CCD33Co細胞、Panc-8_13細胞
NBLAN5T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞
NPA'87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis-Lung細胞、HBZY1細胞、87 MG細胞
RPPVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H209細胞、HCT FET細胞、UACC893細胞
COLO-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1105細胞、COV 434細胞、NMCG-1細胞
COLO-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1105細胞、COV 434細胞、NMCG-1細胞
J82COT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MES 1細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞、SJCRH30細胞
HEK-293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：brain-derived Endothelial cells.3細胞、Caki2細胞、GES-1細胞
Potorous tridactylus Kidney 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE30細胞、RCC 7860細胞、Farage細胞
Hs294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPCa-2b細胞、DanG細胞、J-82細胞
BXPC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
HUT-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞
GM05862細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞
WiDr/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
EBC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 04.03細胞、NK 10a細胞、KNS-62細胞
Hs343T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon 26細胞、HPDLF細胞、FAO-1細胞
H-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
BIC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
ETCC007：人乳腺導(dǎo)管癌傳代細胞
J774A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676細胞、OVCAR 432細胞、CaEs17細胞
STC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-686細胞、PASMCS細胞、CHO-Lec1細胞
J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、SUM 102細胞
ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARA-B細胞、HEK-AD293細胞、Psi-2-DAP細胞
P-388細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CW-2細胞、NCIH1836細胞、Saos2細胞
"
關(guān)鍵字： ETCC007：人乳腺導(dǎo)管癌傳代細胞;
上海弘順生物科技有限公司長期為高校和科研單位等提供優(yōu)良的科研產(chǎn)品，在生物化學(xué)行業(yè)內(nèi)獲得良好的客戶口碑。目前，公司提供近十萬余種科研產(chǎn)品，其中涵蓋化學(xué)、細胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域。同時，我司不斷拓展產(chǎn)品種類，為用戶提供質(zhì)量更優(yōu)、價格更實惠的科研產(chǎn)品。 上海弘順生物科技有限公司 主營產(chǎn)品有： 1.生化試劑：上海弘順生物科技有限公司 在上?；瘜W(xué)工業(yè)區(qū)設(shè)有生產(chǎn)研發(fā)基地。目前，我司生化試劑產(chǎn)品已達60000多種，并呈不斷增長態(tài)勢。經(jīng)過不斷的創(chuàng)新與發(fā)展，上海弘順生物科技有限公司創(chuàng)立了公司自主試劑品牌（品牌：HonSun），為廣大科研工作者提供了高品質(zhì)的實驗試劑。我司生化試劑種類涵蓋氨基酸類、蛋白質(zhì)