"HMEL:永生上皮傳代細胞
細胞背景資料:上皮細胞;永生化
MAVER細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞
AML12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3-E1細胞、PIG3細胞、Panc-08.13細胞
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HMEL:永生上皮傳代細胞
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
UPCISCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FTC133細胞、SK-N-BE(1)n細胞、138 MG細胞
DI-TNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞
LL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍快融》當細胞冷到零度以下,可以產(chǎn)生以下變化:細胞器脫水,細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高,并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍,可使細胞逐步脫水,細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶;相反,結(jié)晶就大,大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序:采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時,1~2℃/min;當溫度達-25℃以下時,5~10℃/min;當溫度達-100℃時,可迅速放入液氮中。2.簡易程序:將冷凍管(管口要朝上)放入紗布袋內(nèi),紗布袋系以線繩,通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口,按每分鐘溫度下降1~2℃的速度,在40min內(nèi)降至液氮表面過夜,次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序:冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法:1.預(yù)先配制凍存液》(1)8%DMSO+細胞生長液(92%血清)2.取對數(shù)生長期細胞,經(jīng)胰酶消化后,加入適量凍存液,用吸管吹打制成細胞懸液(1×10(6)~5×10(6)細胞/ml)。3.加入1ml細胞于凍存管中,密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復(fù)蘇方法:1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動冷凍管,使其在1分鐘內(nèi)全部融化(不要超過3分鐘)。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng),24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑,然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HMEL:永生上皮傳代細胞
細胞生長特性:貼壁
MDA-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOAS451細胞、BNL-CL.2細胞、HUT28細胞
WEHI 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
JJN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC1細胞、CW2細胞、UMUC14細胞
LC-2-Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC 39細胞、HLFa細胞、WB-F344細胞
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
BRL-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-6細胞、Hi5細胞、KM.12細胞
A2780-CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578.T細胞、NG10815細胞、KM-H2細胞
AMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Th17細胞、SSP-25細胞、VP303細胞
SKN-SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs606細胞、GOS-3細胞、B16-F0細胞
SW480細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAEpiC細胞、SK-LMS-1細胞、TK-1細胞
RTE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
MHCC97-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞
KYSE-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs604T細胞、Calu 3細胞、SW 620細胞
WiDr-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、SUM-190PT細胞、WIL2 Secreting細胞
SW1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞
CA 46細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283 Med細胞、WERI-Rb 1細胞、Colo741細胞
MN-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞
DKMG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383.1細胞、ECC 12細胞、Hs821T細胞
FRO 81-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-RPE1細胞、Ect1/E6E7細胞、IMCD3細胞
TCCPAN2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞
SK-N-BE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNT8細胞、NCI-H676B細胞、SUM159細胞
SK-N-BE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNT8細胞、NCI-H676B細胞、SUM159細胞
OCLY8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF-382細胞、Hs940T細胞、U251MG細胞
NB4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2細胞、H524細胞、COR-L105細胞
NCIH1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞
RS 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞
HSC-T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞
SKLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn-5B1-4細胞、H2085細胞、CNE2細胞
TE354.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S.B.細胞、HCC44細胞、RS1細胞
OV-1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C127細胞、SKMES1細胞、HCT-15細胞
HOC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞
HMEL:永生上皮傳代細胞
SK-MEL-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞
T 98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞
TPC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-4細胞、Mono Mac 1細胞、U-373MG細胞
Hs 445細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OP9細胞、TK.10細胞、H-1963細胞
Hs 888Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞
NCIH146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H64細胞、A375SM細胞、293-F細胞
PL 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK 13細胞、HC-11細胞、Human Embryo Lung-1細胞
HOP62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞
SK-OV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-450細胞、WIL2S細胞、DMS 273細胞
HEL-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 737.T細胞、NCIH1184細胞、PT-K75細胞
MDA231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CSQT-2細胞、Leukemia L1210細胞、HCT-FET細胞
NCIH2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH-4細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、HCT/Taxo1細胞
OCIAML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BetaTC6細胞、GM2132細胞、HS-5細胞
SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN4細胞、CEM-0細胞、MC38細胞
VMRC-LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞
VMRCLCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞
AG06814-J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
Loucy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞
Hs600T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK1細胞、Hs832T細胞、U20-S細胞
OCI-Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m 14B細胞、Hs 578T細胞、P388.D1細胞
RAT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 2細胞、Walker256細胞、P31 FUJ細胞
BT549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1-A細胞、U343MG細胞、DMS79細胞
T98細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPB-15細胞、CF PAC-1細胞、MV-4-11細胞
CV-1 in Origin Simian-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR細胞、U937細胞、Vero C1008細胞
NG10815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞
HSC(Human Schwann)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HHM-2細胞、SupB15W細胞、GM17219細胞
A2780/CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375SM細胞、SNU-16細胞、alpha TC1-6細胞
Mouse Bladder Tumor line-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87-1細胞、Porcine Kidney-15細胞、IPLB-SF-21細胞
OCI/AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞
TGHAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC70細胞、Hs839.T細胞、Raji細胞
P388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞
hEEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa017C細胞、A-2780細胞、MM.1S細胞
Hep G2-Luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞
OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WML2細胞、MBT2細胞、H-2591細胞
HMEL:永生上皮傳代細胞
NCI-H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 212細胞、LS 174T細胞、WEHI3細胞
DH-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-03-27細胞、WSU-DLCL-2細胞、WEHI 164細胞
VAESBJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ELD-1細胞、H-2108細胞、Malme-3 M細胞
AMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Th17細胞、NBLS細胞、CHL-IU細胞
Rat Skin 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-30細胞、2B4細胞、Sp2/0-Ag14細胞
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上海弘順生物科技有限公司長期為高校和科研單位等提供優(yōu)良的科研產(chǎn)品,在生物化學(xué)行業(yè)內(nèi)獲得良好的客戶口碑。目前,公司提供近十萬余種科研產(chǎn)品,其中涵蓋化學(xué)、細胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域。同時,我司不斷拓展產(chǎn)品種類,為用戶提供質(zhì)量更優(yōu)、價格更實惠的科研產(chǎn)品。 上海弘順生物科技有限公司 主營產(chǎn)品有: 1.生化試劑:上海弘順生物科技有限公司 在上海化學(xué)工業(yè)區(qū)設(shè)有生產(chǎn)研發(fā)基地。目前,我司生化試劑產(chǎn)品已達60000多種,并呈不斷增長態(tài)勢。經(jīng)過不斷的創(chuàng)新與發(fā)展,上海弘順生物科技有限公司創(chuàng)立了公司自主試劑品牌(品牌:HonSun),為廣大科研工作者提供了高品質(zhì)的實驗試劑。我司生化試劑種類涵蓋氨基酸類、蛋白質(zhì)