"Clone M-3：小鼠黑色素瘤傳代細胞
細胞背景資料：黑色素瘤；雄性；DBA
U-87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞
CCD-19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh74細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞、H358細胞
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Clone M-3：小鼠黑色素瘤傳代細胞
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
SK-RC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC細胞、H4IIE細胞、HT 1080.T細胞
SK-RC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC細胞、H4IIE細胞、HT 1080.T細胞
MDA-MB-231 #4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Clone M-3：小鼠黑色素瘤傳代細胞
細胞生長特性：貼壁
HAPI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO細胞、H1944細胞、NCIH2227細胞
HeLa S 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-38細胞、C2BBe 1細胞、L-363細胞
A549/ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-4475細胞、ReNcell CX細胞、CCD-841CoTr細胞
H-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-F細胞、HTR8/SVneo細胞、H-1703細胞
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻模〖毎坏┟撀淙霊乙豪锬愫茈y再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
Gerner 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 821.T細胞、RT 112細胞、HEK 293A細胞
SUP-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞
HEK293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞
OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WML2細胞、MBT2細胞、H-2591細胞
Med 283細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT5A細胞、CHO-Lec1細胞、MS751細胞
MEF (CF-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE6c7細胞、RMG-I細胞、1301細胞
SCLC-21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPCA-1細胞、NCIH2107細胞、231-luc細胞
HCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞
BEL7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、2PK3細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞
AMC-HN8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746T細胞、LTEP-a-2細胞、PC3M細胞
CEMC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
C-Li-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-780細胞、SJSA1細胞、KU 812F細胞
TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI3B細胞、CCD966SK細胞、SKRC-39細胞
KU-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞
NGP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C1細胞、K299細胞、MRC-9細胞
DHL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、Hu-P-T4細胞、SBC5細胞
DHL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、Hu-P-T4細胞、SBC5細胞
WM-2664細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mahlavu細胞、SNUC2B細胞、MDCK supertube細胞
GM04680細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL11細胞、KYSE270細胞、WSU-HN13細胞
SKMEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256細胞、ST 486細胞、MC3T3-E1細胞
HOEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT(H9)細胞、GDM1細胞、EA. hy 926細胞
P3/X63/Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1666細胞、HFSF細胞、CAL-62細胞
KTC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226細胞、UMC11細胞、A 375細胞
TNC-1B12B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa18C細胞、G-402細胞、U373MG細胞
293T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-64細胞、HL-60 clone15細胞、SMA560細胞
HANK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞
Clone M-3：小鼠黑色素瘤傳代細胞
HEY-A8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1395細胞、SNU520細胞、CHO cell clone K1細胞
NCIH2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞
Alpha Mouse Liver 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞
HL-60 clone15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLOY4細胞、Tn-5B1-4細胞、NIH-OVCAR-3細胞
MKN 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞
U-266細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA.hy 926細胞、NCI H508細胞、HCC-1500細胞
KYSE140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1573細胞、BJ1細胞、H1299細胞
XuanWei Lung Cancer-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM 2132細胞、MFE 280細胞、R D細胞
DMS273細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞
Hopkins-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBr3細胞、H1650細胞、Panc 4.03細胞
Chinese Hamster Ovary細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs934T細胞、SKBR-3細胞、MGC-803細胞
SCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175-VII細胞、SO-RB50細胞、NCI-H1581細胞
H-35 Reuber細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 394細胞、SHSY5Y細胞、HCC1569細胞
TE 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞
Vero 76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
OsA-CL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞
OCI-LY-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-251細胞、SK-ES-1細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞
CEM/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2106細胞、DH-82細胞、NK-92.05細胞
SKRC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞
T-98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞
N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞
MA-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rin-M-5F細胞、RT4-D6P2T細胞、UMR106細胞
NTERA-2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RM-1細胞、H-520細胞、MAVER-1細胞
NCI-H1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/0HK細胞、Normal fibroblast-10細胞、SKRC-42細胞
PCI-04B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 39細胞、SUM 190PT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞
FL83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞
HBZY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞
HSCT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSECs細胞、BI-Mel細胞、SVGp12細胞
U20S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP-293細胞、HNE-1細胞、GA-10(Clone 4)細胞
HEC-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPB/ALL細胞、SW-982細胞、H226細胞
DMS 153細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs852T細胞、CHO細胞、T/G HA VSMC細胞
JB 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1417細胞、16-HBE細胞、FC33細胞
GES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293FT細胞、Hs832.Tc細胞、MG-HU-3細胞
P3X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 48細胞、CMT-167細胞、Beta-TC-6細胞
Clone M-3：小鼠黑色素瘤傳代細胞
PNT1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-1細胞、HCCLM6細胞、HLEC-SRA 01/04細胞
18G3.cl 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-216細胞、COV362細胞、ID8細胞
RPMI8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-1細胞、BT474細胞、OsACL細胞
HEK293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63Ag8.653細胞、GM3190細胞、BEL 7405細胞
OSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM0637細胞、MPC-11細胞、MGC803細胞
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上海弘順生物科技有限公司長期為高校和科研單位等提供優(yōu)良的科研產(chǎn)品，在生物化學(xué)行業(yè)內(nèi)獲得良好的客戶口碑。目前，公司提供近十萬余種科研產(chǎn)品，其中涵蓋化學(xué)、細胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域。同時，我司不斷拓展產(chǎn)品種類，為用戶提供質(zhì)量更優(yōu)、價格更實惠的科研產(chǎn)品。 上海弘順生物科技有限公司 主營產(chǎn)品有： 1.生化試劑：上海弘順生物科技有限公司 在上?；瘜W(xué)工業(yè)區(qū)設(shè)有生產(chǎn)研發(fā)基地。目前，我司生化試劑產(chǎn)品已達60000多種，并呈不斷增長態(tài)勢。經(jīng)過不斷的創(chuàng)新與發(fā)展，上海弘順生物科技有限公司創(chuàng)立了公司自主試劑品牌（品牌：HonSun），為廣大科研工作者提供了高品質(zhì)的實驗試劑。我司生化試劑種類涵蓋氨基酸類、蛋白質(zhì)