pTNF-α-promoter-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)
pTNF-α-promoter-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)是信裕生物自行研發(fā)的用于檢測(cè)TNF-α promoter轉(zhuǎn)錄活性水平的報(bào)告基因質(zhì)粒。
pTNF-α-promoter-luc是以信裕生物的pGL6質(zhì)粒為模板，在其多克隆位點(diǎn)插入了human TNF-α的啟動(dòng)子序列(-991bp～+1bp)，可以高靈敏度地檢測(cè)human TNF-α promoter的激活水平。
TNF-α(Tumor Necrosis Factor α)，中文名為腫瘤壞死因子α，是一種非常重要的炎性細(xì)胞因子，在炎性疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用，常作為炎癥反應(yīng)的重要指標(biāo)。
pGL6質(zhì)粒是用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行螢火蟲螢光素酶(firefly luciferase)報(bào)告基因檢測(cè)的新一代質(zhì)粒。該報(bào)告基因質(zhì)粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改進(jìn)，一方面對(duì)于luciferase的編碼進(jìn)行了改進(jìn)，確保能更好地在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)，同時(shí)對(duì)整個(gè)質(zhì)粒中所有可以被預(yù)測(cè)出的可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)全部進(jìn)行了適當(dāng)?shù)耐蛔兲幚?，在保持原有功能不變的情況下，使各種轉(zhuǎn)錄因子在質(zhì)粒上的非特異性結(jié)合降到最低。
螢光素、螢光素酶、螢火蟲螢光素酶和海腎螢光素酶也經(jīng)常被稱作熒光素、熒光素酶、螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶。
pTNF-α-promoter-luc質(zhì)粒的主要信息如下：
luc2 reporter gene
1056-2708
SV40 late poly(A)signal
2743-2964
SV40 early enhancer/promoter
3012-3430
Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor)coding region
3455-4249
Synthetic poly(A)signal
4274-4322
Reporter Vector primer 4(RVprimer4)binding region
4389-4408
ColE1-derived plasmid replication origin
4646
Synthetic Beta-lactamase(Ampr)coding region
5437-6297
Synthetic poly(A)signal/transcriptional pause site
6402-6555
Reporter Vector primer 3(RVprimer3)binding region
6504-6523
pTNF-α-promoter-luc質(zhì)粒的圖譜如下：
pTNF-α-promoter-luc的多克隆位點(diǎn)及TNF-α promoter的詳細(xì)圖譜如下：
1
GGCCTAACTG
GCTCCTGGGA
GATATGGCCA
CATGTAGCGG
CCGGATTGAC
CGAGGACCCT
CTATACCGGT
GTACATCGCC
51
CTCTGAGGAA
TGGGTTACAG
GAGACCTCTG
GGGAGATGTG
ACCACAGCAA
GAGACTCCTT
ACCCAATGTC
CTCTGGAGAC
CCCTCTACAC
TGGTGTCGTT
101
TGGGTAGGAG
AATGTCCAGG
GCTATGGAAG
TCGAGTATGG
GGACCCCCCC
ACCCATCCTC
TTACAGGTCC
CGATACCTTC
AGCTCATACC
CCTGGGGGGG
151
TTAACGAAGA
CAGGGCCATG
TAGAGGGCCC
CAGGGAGTGA
AAGAGCCTCC
AATTGCTTCT
GTCCCGGTAC
ATCTCCCGGG
GTCCCTCACT
TTCTCGGAGG
201
AGGACCTCCA
GGTATGGAAT
ACAGGGGACG
TTTAAGAAGA
TATGGCCACA
TCCTGGAGGT
CCATACCTTA
TGTCCCCTGC
AAATTCTTCT
ATACCGGTGT
251
CACTGGGGCC
CTGAGAAGTG
AGAGCTTCAT
GAAAAAAATC
AGGGACCCCA
GTGACCCCGG
GACTCTTCAC
TCTCGAAGTA
CTTTTTTTAG
TCCCTGGGGT
301
GAGTTCCTTG
GAAGCCAAGA
CTGAAACCAG
CATTATGAGT
CTCCGGGTCA
CTCAAGGAAC
CTTCGGTTCT
GACTTTGGTC
GTAATACTCA
GAGGCCCAGT
351
GAATGAAAGA
AGAAGGCCTG
CCCCAGTGGG
GTCTGTGAAT
TCCCGGGGGT
CTTACTTTCT
TCTTCCGGAC
GGGGTCACCC
CAGACACTTA
AGGGCCCCCA
401
GATTTCACTC
CCCGGGGCTG
TCCCAGGCTT
GTCCCTGCTA
CCCCCACCCA
CTAAAGTGAG
GGGCCCCGAC
AGGGTCCGAA
CAGGGACGAT
GGGGGTGGGT
451
GCCTTTCCTG
AGGCCTCAAG
CCTGCCACCA
AGCCCCCAGC
TCCTTCTCCC
CGGAAAGGAC
TCCGGAGTTC
GGACGGTGGT
TCGGGGGTCG
AGGAAGAGGG
501
CGCAGGGACC
CAAACACAGG
CCTCAGGACT
CAACACAGCT
TTTCCCTCCA
GCGTCCCTGG
GTTTGTGTCC
GGAGTCCTGA
GTTGTGTCGA
AAAGGGAGGT
551
ACCCCGTTTT
CTCTCCCTCA
AGGACTCAGC
TTTCTGAAGC
CCCTCCCAGT
TGGGGCAAAA
GAGAGGGAGT
TCCTGAGTCG
AAAGACTTCG
GGGAGGGTCA
601
TCTAGTTCTA
TCTTTTTCCT
GCATCCTGTC
TGGAAGTTAG
AAGGAAACAG
AGATCAAGAT
AGAAAAAGGA
CGTAGGACAG
ACCTTCAATC
TTCCTTTGTC
651
GCCACAGACC
TGGTCCCCAA
AAGAAATGGA
GGCAATAGGT
TTTGAGGGGC
CGGTGTCTGG
ACCAGGGGTT
TTCTTTACCT
CCGTTATCCA
AAACTCCCCG
701
ATGGGGACGG
GGTTCAGCCT
CCAGGGTCCT
ACACACAAAT
CAGTCAGTGG
TACCCCTGCC
CCAAGTCGGA
GGTCCCAGGA
TGTGTGTTTA
GTCAGTCACC
751
CCCAGAAGAC
CCCCCTCGGA
ATCGGAGCAG
GGAGGATGGG
GAGTGTGAGG
GGGTCTTCTG
GGGGGAGCCT
TAGCCTCGTC
CCTCCTACCC
CTCACACTCC
801
GGTATCCTTG
ATGCTTGTGT
GTCCCCAACT
TTCCAAATCC
CCGCCCCCGC
CCATAGGAAC
TACGAACACA
CAGGGGTTGA
AAGGTTTAGG
GGCGGGGGCG
851
GATGGAGAAG
AAACCGAGAC
AGAAGGTGCA
GGGCCCACTA
CCGCTTCCTC
CTACCTCTTC
TTTGGCTCTG
TCTTCCACGT
CCCGGGTGAT
GGCGAAGGAG
901
CAGATGAGCT
CATGGGTTTC
TCCACCAAGG
AAGTTTTCCG
CTGGTTGAAT
GTCTACTCGA
GTACCCAAAG
AGGTGGTTCC
TTCAAAAGGC
GACCAACTTA
951
GATTCTTTCC
CCGCCCTCCT
CTCGCCCCAG
GGACATATAA
AGGCAGTTGT
CTAAGAAAGG
GGCGGGAGGA
GAGCGGGGTC
CCTGTATATT
TCCGTCAACA
1001
AGATCTGCAG
AAGCTTGGCA
ATCCGGTACT
GTTGGTAAAG
TCTAGACGTC
TTCGAACCGT
TAGGCCATGA
CAACCATTTC
pTNF-α-promoter-luc中沒有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pTNF-α-promoter-luc)包括：
Aat II
Afl II
Asc I
Ase I
BsaA I
BsiW I
BspM II
BssH II
Eco72 I
EcoR V
Mlu I
Nde I
Nhe I
Nru I
PaeR7 I
Pme I
Pml I
Psp1406 I
Rsr II
SnaB I
Spl I
pTNF-α-promoter-luc中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut ppTNF-α-promoter-luc once)包括：
Sfi I
GGCCN,NNN`NGGCC
9
EcoN I
CCTNN`N,NNAGG
3930
Bgl I
GCCN,NNN`NGGC
9
BsiC I
TT`CG,AA
4325
Acc65 I
G`GTAC,C
15
BstB I
TT`CG,AA
4325
Asp718
G`GTAC,C
15
Sal I
G`TCGA,C
4339
Kpn I
G,GTAC`C
19
ApaL I
G`TGCA,C
4903
Bsa I
GGTCTC 7/11
66
HgiE II
ACCNNNNNNGGT
-1/13 5168
EcoR I
G`AATT,C
388
Not I
GC`GGCC,GC
5409
Tth111 I
GACN`N,NGTC
661
BstE II
G`GTNAC,C
5436
Sac I
G,AGCT`C
911
Ahd I
GACNN,N`NNGTC
5511
Bgl II
A`GATC,T
1012
Pvu I
CG,AT`CG
5881
Hind III
A`AGCT,T
1022
Sac II
CC,GC`GG
5905
BsrG I
T`GTAC,A
1547
Bst1107 I
GTA|TAC
6021
Dra III
CAC,NNN`GTG
2203
Xca I
GTA|TAC
6021
Mun I
C`AATT,G
2883
Spe I
A`CTAG,T
6340
BamH I
G`GATC,C
2976
BsmB I
CGTCTC 7/11
6353
pTNF-α-promoter-luc質(zhì)粒中推薦使用的測(cè)序引物序列如下：
RVprimer3(6504-6523):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
pTNF-α-promoter-luc的全序列信息： D2480-pTNF-α-promoter-luc-seq.txt
包裝清單：
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝
KL-2480-1μg
pTNF-α-promoter-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)
1μg
KL-2480-100μg
pTNF-α-promoter-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)
100μg
保存條件：
-20℃保存。
注意事項(xiàng)：
本質(zhì)粒未經(jīng)信裕生物書面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實(shí)驗(yàn)室外的任何個(gè)人或單位。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。使用說明：
1. 首次使用1μg包裝的本產(chǎn)品時(shí)，請(qǐng)先取少量本質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，進(jìn)行質(zhì)粒小量、中量或大量抽提后再用于后續(xù)用抽提獲得的質(zhì)?？梢酝ㄟ^酶切電泳進(jìn)行鑒定，或通過測(cè)序進(jìn)行鑒定。
2. 100μg包裝的本產(chǎn)品質(zhì)粒濃度為0.1μg/μl，共1ml。可以直接用于酶切或者轉(zhuǎn)染細(xì)胞。
3. pTNF-α-promoter-luc可以用常規(guī)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染細(xì)胞。檢測(cè)時(shí)可以采用信裕生物的螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒(RG005/RG006)或雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒(RG027/RG028)。
4. LPS等是常見的可以激活TNF-α的轉(zhuǎn)錄的試劑，可以用作pTNF-α-promoter-luc報(bào)告基因檢測(cè)時(shí)的陽性對(duì)照。
關(guān)鍵字： pTNF-α-promoter-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)說明書；pTNF-α-promoter-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)廠家
上?？道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè)，專營生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細(xì)胞生物學(xué)，分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品?？偛课挥谏虾＃⒃诒本?、廣東，江西，吉林等全國30多個(gè)省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦，上海交大，復(fù)旦醫(yī)學(xué)院，上海中醫(yī)藥大學(xué)，華東師范大學(xué)，第二軍醫(yī)大學(xué)，曙光醫(yī)院，浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用，可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。