pAAT-promoter-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)
pAAT-promoter-luc(報(bào)告基因質(zhì)粒)是信裕生物自行研發(fā)的用于檢測AAT promoter轉(zhuǎn)錄活性水平的報(bào)告基因質(zhì)粒。
pAAT-promoter-luc是以信裕生物的pGL6質(zhì)粒為模板，在其多克隆位點(diǎn)插入了human AAT的啟動(dòng)子序列，可以高靈敏度地檢測AAT promoter的激活水平。
AAT(alpha 1-Antitrypsin或alpha-1 antiproteinase，也簡稱為A1AT)，又稱serine peptidase inhibitor,clade A,member 1或serine proteinase inhibitor,clade A,member 1(簡稱SERPINA1)，是一種可以被分泌到細(xì)胞外的絲氨酸蛋白酶抑制劑，可以抑制elastase、plasmin、thrombin、trypsin和chymotrypsin等。AAT基因缺陷時(shí)會(huì)導(dǎo)致肺氣腫(emphysema)或肝臟疾病等。
pGL6質(zhì)粒是用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行螢火蟲螢光素酶(firefly luciferase)報(bào)告基因檢測的新一代質(zhì)粒。該報(bào)告基因質(zhì)粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改進(jìn)，一方面對于luciferase的編碼進(jìn)行了改進(jìn)，確保能更好地在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)，同時(shí)對整個(gè)質(zhì)粒中所有可以被預(yù)測出的可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)全部進(jìn)行了適當(dāng)?shù)耐蛔兲幚?，在保持原有功能不變的情況下，使各種轉(zhuǎn)錄因子在質(zhì)粒上的非特異性結(jié)合降到最低。
螢光素、螢光素酶、螢火蟲螢光素酶和海腎螢光素酶也經(jīng)常被稱作熒光素、熒光素酶、螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶。
pAAT-promoter-luc質(zhì)粒的主要信息如下：
luc2 reporter gene
946-2598
SV40 late poly(A) signal
2633-2854
SV40 early enhancer/promoter
2902-3320
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region
3345-4139
Synthetic poly(A) signal
4164-4212
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region
4279-4298
ColE1-derived plasmid replication origin
4536
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region
5327-6187
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site
6292-6445
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region
6394-6413
pAAT-promoter-luc質(zhì)粒的圖譜如下：
pAAT-promoter-luc的多克隆位點(diǎn)及AAT-promoter的詳細(xì)圖譜如下：
BglI KpnI AAT promoter BamHI
1
GGCCTAACTG
TCCCTGGTCT
GAATGTGTGT
CCGGATTGAC
AGGGACCAGA
CTTACACACA
51
CCTGTGGGTC
ACTCGCCTGG
TAGAGCCCCA
AGGTGGAGGC
GGACACCCAG
TGAGCGGACC
ATCTCGGGGT
TCCACCTCCG
101
CTGGTGAATG
ACAGAAGGGG
CAAAAATGCA
CTCATCCATT
GACCACTTAC
TGTCTTCCCC
GTTTTTACGT
GAGTAGGTAA
151
GTATCTACGG
CACGTACGCC
AGCTCCCAAG
CAGGTTTGCG
CATAGATGCC
GTGCATGCGG
TCGAGGGTTC
GTCCAAACGC
201
CGGGCGATGC
AATCTGATTT
AGGCTTTTAA
AGGGATTGCA
GCCCGCTACG
TTAGACTAAA
TCCGAAAATT
TCCCTAACGT
251
GCCCCACTAG
CCTCAACCCT
GTACCTCCCC
TCCCCTCCAC
CGGGGTGATC
GGAGTTGGGA
CATGGAGGGG
AGGGGAGGTG
301
CTCCAAAGGC
CTCCAACAAC
CCCAGAGTGG
GGGCCATGTA
GAGGTTTCCG
GAGGTTGTTG
GGGTCTCACC
CCCGGTACAT
351
CTCCAAGCTG
TATATGGATC
ACACTGGTTT
TCCAGGAGCA
GAGGTTCGAC
ATATACCTAG
TGTGACCAAA
AGGTCCTCGT
401
CAGGCCTGAG
GCTGGTCAAA
ATTGAACCTC
CTCCTGCTCT
GTCCGGACTC
CGACCAGTTT
TAACTTGGAG
GAGGACGAGA
451
GGGGGCAGAC
TAAGCAGAGG
GCTGTGCAGA
CCCACATAAA
CCCCCGTCTG
ATTCGTCTCC
CGACACGTCT
GGGTGTATTT
501
TGTGCCAGGC
ACTTCACCCG
AGGCACTTCA
CAAGCATGCT
ACACGGTCCG
TGAAGTGGGC
TCCGTGAAGT
GTTCGTACGA
551
ACTTCCAACT
CTTTGGGATG
CAGGTGAAAC
AGTTCCTGGT
TGAAGGTTGA
GAAACCCTAC
GTCCACTTTG
TCAAGGACCA
601
GAAGCGGCCT
GCCTGAGGCA
GCACAGCTCT
TCTTTACAGA
CTTCGCCGGA
CGGACTCCGT
CGTGTCGAGA
AGAAATGTCT
651
CACCTCTACC
CTGTCTCACG
GCCCCCCATG
CCAGCCTGAC
GTGGAGATGG
GACAGAGTGC
CGGGGGGTAC
GGTCGGACTG
701
GCCTCAGTCA
TGCTCCATTT
TTCCATCGGG
ACCATCAAGA
CGGAGTCAGT
ACGAGGTAAA
AAGGTAGCCC
TGGTAGTTCT
751
GTCTAAGGCT
GACTGGGTAA
CTTTGGATGA
GCGGTCTCTC
CAGATTCCGA
CTGACCCATT
GAAACCTACT
CGCCAGAGAG
801
CTGTTTCCTC
ATCTGTCAAA
TGGGCTCTAA
CCCACTCTGA
GACAAAGGAG
TAGACAGTTT
ACCCGAGATT
GGGTGAGACT
851
CGGCAGTAAG
TCTTCAGCAT
CAGGCATTTT
GGGGTGACTC
GCCGTCATTC
AGAAGTCGTA
GTCCGTAAAA
CCCCACTGAG
901
AGATCTGCAG
AAGCTTGGCA
ATCCGGTACT
GTTGGTAAAG
CCACCATGGA
TCTAGACGTC
TTCGAACCGT
TAGGCCATGA
CAACCATTTC
GGTGGTACCT
pAAT-promoter-luc中沒有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pAAT-promoter-luc)包括：
Aat II
Afl II
Asc I
Ase I
BspM II
BssH II
Eco72 I
EcoR I
EcoR V
Mlu I
Nde I
Nhe I
Nru I
PaeR7 I
PflM I
Pme I
Pml I
Psp1406 I
PspA I
Rsr II
Sac I
Sma I
SnaB I
Srf I
Tth111 I
pAAT-promoter-luc中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pAAT-promoter-luc once)包括：
Sfi I
GGCCN,NNN`NGGCC
9
Mun I
C`AATT,G
2773
Acc65 I
G`GTAC,C
15
BsiC I
TT`CG,AA
4215
Asp718
G`GTAC,C
15
BstB I
TT`CG,AA
4215
Kpn I
G,GTAC`C
19
Sal I
G`TCGA,C
4229
BsaA I
YAC|GTR
164
Afl III
A`CRYG,T
4479
BsiW I
C`GTAC,G
164
ApaL I
G`TGCA,C
4793
Spl I
C`GTAC,G
164
Not I
GC`GGCC,GC
5299
Xcm I
CCANNNN,N`NNNNTGG
361
BstE II
G`GTNAC,C
5326
Xmn I
GAANN|NNTTC
581
Ahd I
GACNN,N`NNGTC
5401
Bsa I
GGTCTC 7/11
790
Pvu I
CG,AT`CG
5771
Bgl II
A`GATC,T
902
Sac II
CC,GC`GG
5795
Hind III
A`AGCT,T
912
Bst1107 I
GTA|TAC
5911
BsrG I
T`GTAC,A
1437
Xca I
GTA|TAC
5911
Dra III
CAC,NNN`GTG
2093
Spe I
A`CTAG,T
6230
Apo I
R`AATT,Y
2709
BsmB I
CGTCTC 7/11
6243
pAAT-promoter-luc質(zhì)粒中推薦使用的測序引物序列如下：
RVprimer3 (6394-6413):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
pAAT-promoter-luc的全序列信息： D2306 pAAT-promoter-luc-seq.txt
包裝清單：
KL-2306-1μg
pAAT-promoter-luc(報(bào)告基因質(zhì)粒)
1μg
KL-2306-100μg
pAAT-promoter-luc(報(bào)告基因質(zhì)粒)
100μg
保存條件：
-20℃保存。
注意事項(xiàng)：
本質(zhì)粒未經(jīng)信裕生物書面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實(shí)驗(yàn)室外的任何個(gè)人或單位。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說明：
1. 首次使用1μg包裝的本產(chǎn)品時(shí)，請先取少量本質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，進(jìn)行質(zhì)粒小量、中量或大量抽提后再用于后續(xù)用途。抽提獲得的質(zhì)粒可以通過酶切電泳進(jìn)行鑒定，或通過測序進(jìn)行鑒定。
2. 100μg包裝的本產(chǎn)品質(zhì)粒濃度為0.1μg/μl，共1ml?？梢灾苯佑糜诿盖谢蛘咿D(zhuǎn)染細(xì)胞。
3. pAAT-promoter-luc可以用常規(guī)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染細(xì)胞。檢測時(shí)可以采用信裕生物 的螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒(RG005/RG006)或雙螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒(RG027/RG028)。
4. 可以激活A(yù)AT promoter的試劑，可以用作pAAT-promoter-luc報(bào)告基因檢測時(shí)的陽性對照。
關(guān)鍵字： pAAT-promoter-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)說明書；pAAT-promoter-luc (報(bào)告基因質(zhì)粒)廠家
上?？道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè)，專營生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細(xì)胞生物學(xué)，分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品?？偛课挥谏虾＃⒃诒本?、廣東，江西，吉林等全國30多個(gè)省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦，上海交大，復(fù)旦醫(yī)學(xué)院，上海中醫(yī)藥大學(xué)，華東師范大學(xué)，第二軍醫(yī)大學(xué)，曙光醫(yī)院，浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用，可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。