檢測原理:
本實驗采用雙抗體夾心ELISA法??谷薋GF單抗包被于微孔板上,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品中的FGF會與固定在板上的抗體結(jié)合,游離的成分被洗去;加入辣根過氧化酶標(biāo)記的抗人FGF多抗,未結(jié)合的抗體被洗去;加入底物溶液(顯色劑),溶液顏色與結(jié)合的目標(biāo)蛋白成正比;加入終止液;用酶標(biāo)儀測定吸光度。
檢測類型:雙抗夾心法
形式:預(yù)包被96孔板
檢測樣本類型:細(xì)胞上清液,血清,血漿
上樣量:100ul
試劑盒組分:
預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、抗人FGF檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液(A、B)、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。
靈敏度:1.19 pg/mL
檢測范圍:125 - 8,000 pg/mL
回收率范圍:96-113%
保存方法:2-8℃
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
背景:
成纖維細(xì)胞生長因子酸性(FGF酸性),又稱FGF-1,內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(ECGF)和肝素結(jié)合生長因子-1 (HBGF-1)是非糖基化的17-18 kDa由多種細(xì)胞類型分泌的多肽。該分子合成為沒有明顯信號肽序列的氨基酸(aa)蛋白。因此,這排除了它通過經(jīng)典的ER/高爾基通路分泌的可能性。然而,它似乎有一個獨特的分泌途徑包括熱休克蛋白、磷脂酰絲氨酸、synaptotagmin-1,F(xiàn)GF酸性分泌的結(jié)果是胞外二硫鍵連接同質(zhì)二聚體,其共價鍵可能被還原劑破壞而釋放生物活性FGF酸性。與FGF-2不同的是,已知酸性FGF存在5'備用起始位點。一個60 aa剪接變異體的FGF酸性已被報道是由前57個氨基酸加上三個額外的c末端氨基酸組成全長分子,在實驗中它可以結(jié)合FGF受體,但不會激活它們,酸性FGF具有一個由aa殘基21-27組成的核定位序列,酸性FGF對小鼠和大鼠表現(xiàn)出95%的aa特性,對牛表現(xiàn)出92%的aa特性。已知表達(dá)酸性FGF的細(xì)胞包括乳腺上皮細(xì)胞和神經(jīng)元(運動和感覺)、骨骼肌和平滑肌細(xì)胞、腎近端小管細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞、成纖維細(xì)胞。FGF家族有5個受體(FGF R1-R5)。前四個受體都是型跨膜酪氨酸激酶受體,而FGF R5是一種IgSF沒有酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域的成員。值得注意的是,據(jù)報道酸性的FGF可以與FGF結(jié)合受體1到4,但不是FGF R5。酸性的FGF可以激活酪氨酸激酶結(jié)合或利用配體受體內(nèi)化的信號通路到達(dá)細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞器和細(xì)胞核。受體激活與并發(fā)的FGF-肝素相互作用相關(guān)。肝素可與酸性FGF結(jié)合使受體抑制或激活。當(dāng)激活時,肝素似乎是一種連接兩個FGF/FGF R復(fù)合物的中心部件。這是兩個FGF R分子的近似值啟動受體二聚和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。酸性的FGF也會結(jié)合細(xì)胞表面的肝素,有內(nèi)化但沒有細(xì)胞活化。酸性FGF以其對內(nèi)皮細(xì)胞的有絲分裂活性而聞名,膜受體的激活和內(nèi)化是完全有絲分裂的必要條件,其他對FGF酸性反應(yīng)而增殖的細(xì)胞包括絲滑細(xì)胞、肌肉細(xì)胞,肝細(xì)胞,乳腺上皮和成纖維細(xì)胞。
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