檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術。特異性抗大鼠 IL-1β抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的 IL-1β與固相抗體和檢測抗體結(jié)合,形成免疫復合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物,避光顯色。加入終止液終止反應,在450 nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測定吸光度值。
檢測類型:雙抗夾心法
形式:預包被96孔板
檢測樣本類型:細胞上清液,血清,血漿
上樣量:100ul
試劑盒組分:
預包被96孔板、標準品、抗大鼠 IL-1β檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液(A、B)、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。
靈敏度:1.8pg/mL
檢測范圍:62.5 - 4,000 pg/mL
回收率范圍:82-110%
保存方法:2-8℃
標準曲線圖
背景:
白細胞介素-1(IL-1)蛋白家族成員中包括經(jīng)典的 IL-1和 IL-1。IL-1 受體拮抗劑(IL-1RA)、IL-18、IL-33、IL-1F5-F10、IL-1?和 IL-1?有相同的細胞表面結(jié)合受體,形式相同的生物學功能。健康人未刺激的細胞是不產(chǎn)生 IL-1 的,只有皮膚角質(zhì)形成細胞、一些上皮細胞,以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的某些細胞是例外。但在響應炎癥因子、感染、或微生物內(nèi)毒素時,IL-1在巨噬細胞和其他類型細胞表達急劇增加。IL-1?在免疫和炎癥應答、骨重塑、發(fā)熱、碳水化合物代謝、GH/IGF-1 的生理過程中起重要作用。多種疾病與 IL-1 表達失調(diào)或延時表達相關,其中包括敗血癥、類風濕關節(jié)炎、炎性腸道疾病、急性和慢性髓細胞白血病、胰島素依賴型糖尿病、動脈粥狀硬化、神經(jīng)損傷和老年退化有關的疾病。
IL-1和 IL-1是結(jié)構相關的多肽,在氨基酸水平約有 25%的同源性。兩者都是先合成為 31kDa 前體,然后裂解為大約 17.5 kDa 的成熟蛋白。由 Caspase-1/ICE 對IL-1?的前體切割是炎癥反應的關鍵步驟。盡管 IL-1?和 IL-1?都不含有一個典型的疏水信號肽,但有證據(jù)表明,它們可以經(jīng)非經(jīng)典途徑分泌到胞外。未處理的IL-1部分可在細胞膜上展示,并可能保留生物活性。與 IL-1前體不同,IL-1前體與成熟的 IL-1相比,具有很少或根本不具有生物活性。IL-1前體與成熟的 IL-1都運至胞外。
IL-1和 IL-1通過免疫球蛋白超家族受體與 IL-1RA 結(jié)合發(fā)揮其效應。80 kDa 的 I型跨膜受體(IL-1RI)在多種細胞中表達,包括 T 細胞、成纖維細胞、角質(zhì)形成細胞、內(nèi)皮細胞、滑膜襯里細胞、軟骨細胞和肝細胞。68 kDa 的 II 型跨膜受體(IL-1RII)在 B 細胞、中性粒細胞和骨髓細胞中表達。IL-1RI 和 IL-1RII 的胞外區(qū)域享有 28%的同源性。但其他區(qū)域有顯著不同:II 型受體的胞內(nèi)域只有 29 個氨基酸,而 I型受體的胞內(nèi)域有 213 個氨基酸。IL-1RII 似乎對 IL-1 信號沒有響應,其功能是作為誘騙受體從而削弱 IL-1 的作用。IL-1 受體配體蛋白(IL-1 RAcP)與 IL-1RI 相互作用是 IL-1RI 信號傳導所必需的。IL-1RA 是分泌型分子,是 IL-1 的競爭性抑制劑。可溶性 IL-1RI 和 IL-1RII 存在于人的血漿、關節(jié)液、及幾種細胞株的條件培養(yǎng)基中。此外,牛痘病毒編碼類似于可溶性 IL-1RII 的 IL-1 結(jié)合蛋白。
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