pGL6-miR (報告基因質(zhì)粒)

pGL6-miR (報告基因質(zhì)粒)是信裕生物自行研發(fā)的一種用于microRNA(miRNA)等研究的螢光素酶報告基因質(zhì)粒。該質(zhì)粒可用于把目的基因的3'非翻譯區(qū)(3'-untranslated region, 3'-UTR)或其它適當序列插入到其多克隆位點，然后在哺乳動物細胞中高靈敏度地檢測特定microRNA(miRNA)或其它非編碼RNA等對該基因3'-UTR或其它靶序列調(diào)控活性的報告基因質(zhì)粒。
螢光素、螢光素酶、螢火蟲螢光素酶和海腎螢光素酶也經(jīng)常被稱作熒光素、熒光素酶、螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶。
pGL6-miR以信裕生物的pGL6質(zhì)粒為模板，具有氨芐青霉素抗性，并在螢火蟲螢光素酶基因之后添加了多克隆位點，便于插入目的基因的3'-UTR或其它適當?shù)陌行蛄小?br /> pGL6-miR的主要工作原理是，把目的基因的3'非翻譯區(qū)(3'-untranslated region, 3'-UTR)或其它適當序列插入到螢光素酶基因(luc2)的下游，轉(zhuǎn)染細胞并檢測螢光素酶的表達。如果細胞內(nèi)源或外源表達的miRNA與靶序列結(jié)合，通常會抑制螢光素酶的翻譯或促進mRNA的降解，從而使螢光素酶的表達量減少。因此通過本報告基因質(zhì)粒檢測螢光素酶的表達水平，可以檢測內(nèi)源或外源表達的miRNA是否對插入的靶序列有調(diào)控作用。并且可以通過靶序列中預測的miRNA結(jié)合位點的突變，用于比較突變前后螢光素酶表達水平的變化。如果預測的miRNA位點突變后，miRNA的調(diào)控作用消失，則基本上說明突變的位點就是miRNA在靶序列中具體的結(jié)合位點。
pGL6-miR帶有中低等強度的PGK啟動子，有利于檢測miRNA等對于螢火蟲螢光素酶表達水平的下調(diào)作用，即當miRNA的抑制作用較弱時也能檢測到。并且PGK啟動子可以在人、大鼠、小鼠甚至酵母細胞中都可以發(fā)揮作用。
pGL6-miR質(zhì)粒的主要信息如下：

pGL6-miR質(zhì)粒圖譜如下：

pGL6-miR質(zhì)粒的多克隆位點的詳細圖譜如下(請?zhí)貏e注意其中的NheI不是單酶切位點)：

pGL6-miR中沒有的酶切位點(Restriction enzymes that do not cut pGL6-miR)包括：

pGL6-miR中的單酶切位點(Restriction enzymes that cut pGL6-miR once)包括：

pGL6-miR質(zhì)粒中推薦使用的測序引物序列如下：
Forward primer (2135-2154): 5′GTTGGACGCCCGCAAGATCC 3′
Reverse primer (2303-2322): 5′GGTTTGTCCAAACTCATCAA 3′
pGL6-miR的全序列信息：D2106 pGL6-miR-seq.txt
包裝清單：

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注意事項：
本質(zhì)粒未經(jīng)信裕生物書面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實驗室外的任何個人或單位。
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