SmaI

SmaI內(nèi)切酶為進(jìn)口分裝，基本信息如下：

根據(jù)識(shí)別序列鄰近序列的不同，酶切效果受CG methylase導(dǎo)致的DNA甲基化的影響。
酶儲(chǔ)存液組成為：10mM Tris-HCl(pH7.4 at 25℃)，100mM KCl，1mM DTT，1mM EDTA，0.2mg/ml BSA and 50% glycerol。
1X Buffer Y組成為：33mM Tris-acetate(pH7.9 at 37℃)，10mM magnesium acetate，66mM potassium acetate，
0.1mg/ml BSA。
酶切和連接效率：50倍過(guò)量的本內(nèi)切酶消化1小時(shí)，>90%被酶切的片段可以被連接并被重新酶切(recut)。
活性單位定義：在37℃，50微升反應(yīng)體系中反應(yīng)1小時(shí)，將1微克的λDNA完全分解的酶量定義為1個(gè)活性單位，即1U。
包裝清單：

保存條件：
-20℃保存。
注意事項(xiàng)： 
內(nèi)切酶使用時(shí)宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上，使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。
如果發(fā)現(xiàn)預(yù)期的酶切位點(diǎn)不能切開(kāi)，請(qǐng)確認(rèn)是否存在甲基化干擾問(wèn)題。
特別注意：
本SmaI的推薦孵育溫度為30℃，37℃孵育有50%的酶活性，25℃孵育有100%的酶活性。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用說(shuō)明：
1. 單酶切時(shí)可以參考如下反應(yīng)體系進(jìn)行：

說(shuō)明：請(qǐng)注意把Buffer和水等充分混勻后再加入內(nèi)切酶，加入內(nèi)切酶后可以用槍吹打或輕輕Vortex混勻。通常參考上述條件孵育1小時(shí)已經(jīng)足夠，但多孵育數(shù)小時(shí)甚至孵育過(guò)夜也不會(huì)產(chǎn)生負(fù)面影響。如果酶切較長(zhǎng)時(shí)間甚至酶切過(guò)夜，可以使用更少量的酶。待酶切DNA量較大時(shí)，可以適當(dāng)延長(zhǎng)酶切時(shí)間或按比例放大酶切體系。
2. 雙酶切或多酶切時(shí)，需選擇適當(dāng)?shù)目梢约嫒輧蓚€(gè)或多個(gè)內(nèi)切酶的緩沖液，然后參考上表設(shè)置反應(yīng)體系。如果沒(méi)有合適的緩沖液可以選擇，可以在一種酶消化完畢后進(jìn)行純化，純化完畢后再進(jìn)行另外一種酶切反應(yīng)。