檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗人IL-10抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的IL-10與固相抗體和檢測抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物,避光顯色。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測定吸光度值。
檢測類型:雙抗夾心法
形式:預(yù)包被96孔板
檢測樣本類型:細(xì)胞上清液,血清,血漿
上樣量:100ul
試劑盒組分:
預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、IL-10檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液(A、B)、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。
靈敏度:3.9pg/mL
檢測范圍:31.2 - 2,000 pg/mL
回收率范圍:88-110%
保存方法:2-8℃
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
背景:
人白細(xì)胞介素10(IL-10),又稱為細(xì)胞生長因子合成抑制因子(CSIF),是IL-10α螺旋家族的成員,該家族還包括IL-19、IL-20、IL-22、IL-24和IL-26/ak155。IL-10可由多種活化的造血細(xì)胞、肝星狀細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞和胎盤滋養(yǎng)葉細(xì)胞分泌。人類IL-10對小鼠細(xì)胞有活性,而小鼠IL-10不能作用于人的細(xì)胞。成熟的人IL-10與馬IL-10有86%的氨基酸序列同源性,與牛、犬、貓、豚鼠、小鼠、綿羊、豬和大鼠IL-10的同源性在72-80%之間。它包含兩個鏈內(nèi)二硫鍵,以非共價結(jié)合的同源二聚體形式表達(dá),分子量36kDa。
IL-10通過由II型細(xì)胞因子IL-10受體亞基α和β異源二聚體復(fù)合物介導(dǎo)其生物活性。IL-10受體α亞基是一個110kDa的跨膜糖蛋白,主要表達(dá)于淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞、腸上皮細(xì)胞、滋養(yǎng)層細(xì)胞和活化的肝星狀細(xì)胞,而75kDa的跨膜受體β則廣泛表達(dá)。IL-10二聚體結(jié)合兩個IL-10 Rα鏈,激發(fā)兩個IL-10 Rβ鏈的加入。IL-10 Rβ不直接結(jié)合IL-10,但為信號轉(zhuǎn)導(dǎo)所需要。IL-10 Rβ還與IL-20 Rα、IL-22 Rα1及IL-28 Rα形成IL-22、IL-26、IL-28和IL-29的受體復(fù)合物。
IL-10參與的免疫調(diào)節(jié)包括抑制作用和刺激作用。它通過抑制Th1細(xì)胞和Th17細(xì)胞的擴增和活化,促進M2型巨噬細(xì)胞發(fā)揮抗炎作用。免疫調(diào)節(jié)T細(xì)胞(Treg)和調(diào)節(jié)性B 細(xì)胞對IL-10表達(dá)的調(diào)節(jié)對Treg增殖有重要意義。然而,在腫瘤環(huán)境中,IL-10抑制Treg及髓源性抑制細(xì)胞的增殖。IL-10誘導(dǎo)CD8 T細(xì)胞在腫瘤中的積累和活化。IL-10通過限制關(guān)節(jié)炎的組織損傷,促進肌肉損傷后再生發(fā)揮保護作用,但它可能導(dǎo)致病毒感染的持久性。IL-10水平在干燥綜合征(唾液)、原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤(腦脊液)、卵巢癌(血清和腹水)中升高。其水平在心臟病復(fù)發(fā)或子嫻前期患者血清和男性不育患者精液中降低。
IL-1α和IL-1β是結(jié)構(gòu)相關(guān)的多肽,在氨基酸水平約有25%的同源性。兩者都是先合成為31kDa前體,然后裂解為大約17.5kDa的成熟蛋白。由Caspase-1/ICE對IL-1β的前體切割是炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵步驟。盡管IL-1α和IL-1β都不含有一個典型的疏水信號肽,但有證據(jù)表明,它們可以經(jīng)非經(jīng)典途徑分泌到胞外。未處理的IL-1α部分可在細(xì)胞膜上展示,并可能保留生物活性。與IL-1β前體不同,IL-1β前體與成熟的IL-1β相比,具有很少或根本不具有生物活性。IL-1β前體與成熟的IL-1β都運至胞外。
IL-1α和IL-1β通過免疫球蛋白超家族受體與IL-1RA結(jié)合發(fā)揮其效應(yīng)。80kDa的I型跨膜受體(IL-1RI)在多種細(xì)胞中表達(dá),包括T細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、滑膜襯里細(xì)胞、軟骨細(xì)胞和肝細(xì)胞。68kDa的II型跨膜受體(IL-1RII)在B細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和骨髓細(xì)胞中表達(dá)。IL-1RI和IL-1RII的胞外區(qū)域享有28%的同源性。但其他區(qū)域有顯著不同:II型受體的胞內(nèi)域只有29個氨基酸,而I型受體的胞內(nèi)域有213個氨基酸。IL-1RII似乎對IL-1信號沒有響應(yīng),其功能是作為誘騙受體從而削弱IL-1的作用。IL-1受體配體蛋白(IL-1RAcP)與IL-1RI相互作用是IL-1RI信號傳導(dǎo)所必需的。IL-1RA是分泌型分子,是IL-1的競爭性抑制劑。可溶性IL-1RI和IL-1RII存在于人的血漿、關(guān)節(jié)液、及幾種細(xì)胞株的條件培養(yǎng)基中。此外,牛痘病毒編碼類似于可溶性IL-1RII的IL-1結(jié)合蛋白。
關(guān)鍵字: 人白介素10 elisa試劑盒;Human IL-10 ELISA Kit
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