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兩管式RT-PCR試劑盒(AMV-Taq)
  • 兩管式RT-PCR試劑盒(AMV-Taq)

兩管式RT-PCR試劑盒(AMV-Taq)

價(jià)格 1190
包裝 50次
最小起訂量 50次
發(fā)貨地 上海
更新日期 2024-12-24
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產(chǎn)品詳情

中文名稱:兩管式RT-PCR試劑盒(AMV-Taq)保存條件: 常溫運(yùn)輸和保存
純度規(guī)格: 99.99%產(chǎn)品類別: 分子生物學(xué) 核酸擴(kuò)增
2024-12-24 兩管式RT-PCR試劑盒(AMV-Taq) 50次/1190RMB 1190 常溫運(yùn)輸和保存 99.99% 分子生物學(xué) 核酸擴(kuò)增

兩管式RT-PCR試劑盒(AMV-Taq)

 

產(chǎn)品及特點(diǎn)本產(chǎn)品使用重組禽類成髓纖維病毒逆轉(zhuǎn)錄酶(Avian Myeloblastosis Virus Reverse Transcriptase, AMV RT),從總 RNA 或者 Poly(A)+ RNA 合成一鏈 cDNA 的試劑盒, 含有 cDNA 一鏈合成所需的所有試劑。AMV RT 具有 RNA 聚合酶活性和 RNase H 的 活性,能夠作用于 GC 含量高,二級結(jié)構(gòu)復(fù)雜的 RNA。合成的一鏈 cDNA 可廣泛應(yīng)用于 第二鏈合成、雜交、PCR 擴(kuò)增、Real-time PCR 反應(yīng)等。

1. 即開即用,足夠 50 次 RT 反應(yīng)(20μL 體系)和 600 次 PCR 反應(yīng)(30μL 體系)。

2. cDNA 一鏈合成試劑盒可靈活選用隨機(jī)引物、Oligo dT 引物或基因?qū)R灰?,適合 各種情況。

3. 兩管式操作,RT 和 PCR 在不同試管中進(jìn)行,便于單獨(dú)優(yōu)化 RT 反應(yīng)或 PCR 反應(yīng)條件。

4. 全長的一鏈 cDNA 產(chǎn)量高,最長可合成 8 kb 的 cDNA。
規(guī)格及成分 成 分 編 號 十孔盒包裝
AMV 逆轉(zhuǎn)錄酶 (含 RI) 130921a 50 μL
AMV RT Buffer(含 dNTP) 130921b 300 μL
Oligo (dT)18引物(0.5 μg/μL) 100814 50 μL
隨機(jī)引物(0.5 μg/μL) 100409 50 μL
PCR MagicMix 3.0,含染料 90805 9 mL
RNase-free 水 80403 5 mL
使用手冊 130921sc 1 份

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 有效期一年。

自備試劑 樣品 RNA、模板專一正向和反向引物。

使用方法 一、樣品 RNA 的制備(本試劑盒不提供相關(guān)試劑)

1. 可用自本公司各種 RNA 提取方法提取樣品的 RNA,也可以選用其他供應(yīng)商的產(chǎn)品,但得到的 RNA 一定要溶解在 RNase-free 的超純水中。

二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA

2. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系):

RNA 模板

總 RNA < 5 μg

或 poly(A) mRNA

或隨機(jī)引物(0.5 μg/μL) 1 μL

或自備模板專一反向引物(20 pmol/μL) 1-2 μL

RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 μL

注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。隨機(jī)引物與 RNA 模板的比例將決定cDNA 合成的平均長度(成反比)。一般情況下隨機(jī)引物效率好于 OligodT 引物,但如果只想轉(zhuǎn)錄總 RNA 中的 mRNA(只占 5%左右),則可優(yōu)先選用 OligodT 引物,這樣就可以排除非 mRNA 的干擾。

3. 輕輕混勻后離心 3-5 sec,反應(yīng)混合物在 65℃溫浴 5 min 后冰浴 30 sec,離心 3-5 sec。

將試管冰浴,再加入如下組分:

AMV RT Buffer(含 dNTP) 6 μL

AMV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI) 1 μL

輕輕混勻后離心 3-5 sec。

在 PCR 儀上按下列條件進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng):

cDNA 合成 42℃ 30-60 min;

終止反應(yīng) 85℃ 5 min(酶失活),處理后,置于冰上放置。

注意:若使用 Oligo dT 引物或序列特異性引物,進(jìn)行 42℃,30-60 min 反應(yīng); 若

使用隨機(jī)引物,應(yīng)先進(jìn)行 25℃,10min 反應(yīng),然后進(jìn)行 42℃,30-60 min 反應(yīng)。

三、PCR(30 μL 體系)

4. 在 PCR 管中加入下列成分:

成分 加入量

PCR MagicMix 3.0,含染料 15 μL

cDNA 樣品(上步的 RT 反應(yīng)液) 1-5 μL

模板專一性正向引物(10 pmol/μL) 1-2 μL

模板專一性反向引物(10 pmol/μL) 1-2 μL

補(bǔ)水到 30 μL

注意:cDNA 也可以稀釋后作 PCR 模板。是否稀釋或稀釋倍數(shù)取決于靶基因的豐度。

5. PCR 反應(yīng)參數(shù)(需要根據(jù)模板和引物決定,下面的只做參考):

過程 溫度 時(shí)間

預(yù)變性 94℃ 5 min

PCR 反應(yīng)

(35 個(gè)循環(huán))

94℃ 1 min

55℃ 1 min

20191012ww

72℃ 2 min

后延伸 72℃ 10 min

四、電泳檢測

取 5-10μL PCR 產(chǎn)物直接在 PAGE 或瓊脂糖凝膠上電泳,跟分子量標(biāo)準(zhǔn)比較估計(jì)出擴(kuò)增產(chǎn)物的大小。注:本試劑盒中的 PCR mix 含有甘油和染料,可以直接上樣,不需要額外再加電泳上樣液。

 

關(guān)鍵字: 兩管式RT-PCR試劑盒(AMV-Taq)廠家;兩管式RT-PCR試劑盒(AMV-Taq)價(jià)格;兩管式RT-PCR試劑盒(AMV-Taq)說明書

公司簡介

上海澤葉生物科技有限公司是一家服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域的高新技術(shù)企業(yè),主要為科研機(jī)構(gòu)、高校、院所及企業(yè)產(chǎn)品開發(fā)研究提供所需要的科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)等。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)、材料科學(xué),通用試劑、藥物合成試劑、手性化合物、催化劑及配體、分析試劑、生物試劑,檢測試劑等等
成立日期 2016-08-08 (9年) 注冊資本 100萬元整
員工人數(shù) 1-10人 年?duì)I業(yè)額 ¥ 100萬以內(nèi)
主營行業(yè) 生物化工,有機(jī)原料,化學(xué)試劑,醫(yī)藥原料,技術(shù)服務(wù) 經(jīng)營模式 貿(mào)易,試劑,定制,服務(wù)
  • 上海澤葉生物科技有限公司
VIP 6年
  • 公司成立:9年
  • 注冊資本:100萬元整
  • 企業(yè)類型:貿(mào)易
  • 主營產(chǎn)品:主營產(chǎn)品:ELISA試劑盒、重組蛋白、抗體、生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、分子生物學(xué)試劑、細(xì)胞生物學(xué)等科研用品
  • 公司地址:松江區(qū)新橋鎮(zhèn)賣新公里2077號8309室
詢盤

兩管式RT-PCR試劑盒(AMV-Taq)相關(guān)廠家報(bào)價(jià)

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