柱式醬油DNAout
產品及特點醬油中的 DNA 主要是來自于大豆細胞,用醬油進行 DNA 提取后得到的 DNA 樣品可以作為轉基因檢測的模板。 本產品具有下列特點:
1. 本產品足夠 15 次提取,采用濃縮后提取策略,每次可以處理多達 500mL 樣品。
2. 操作簡單,整個過程室溫操作約 40 分鐘,適合大規(guī)模樣品處理。
3. 安全無毒,本試劑盒對人體無毒,無腐蝕性和刺激性氣味。
4. 由于醬油所含 DNA 很少,所以得到的 DNA 一般不能用于電泳檢測,只能用于PCR 檢測或其他擴增檢測。
5. 性價比高,質量和國外同類產品相當,但價格更便宜。
規(guī)格及成分 成 份 編 號 大扁盒包裝
醬油 DNA 濃縮液 LM130956a 23 mL(棕色瓶) 醬油 DNA 洗滌液 LM130956b 250 mL 醬油 DNA 溶解液 LM130956c 9 mL 載體 DNA LM130956c 1.5 mL 上柱結合液 LM190602 15 mL 硅膠膜離心吸附柱(窄口) LM170606 15 套 通用洗柱液 LM60408 15 mL DNA 洗脫液 3.0 LM170603 10 mL 使用手冊 LM130956sc 1 份
運輸及保存 常溫運輸及保存,醬油 DNA 裂解液長期(1 月以上)放置時需要放 4℃,有效期一年。DNA 載體需要低溫運輸,-20℃保存。
自備試劑 250mL 塑料瓶、50mL 塑料離心管、15mL 塑料離心管、1.5mL 塑料離心管
使用方法
一:樣品的濃縮:
1. 如果有 N 個樣品,標記 N 個 250mL 塑料瓶中分別加入 50mL 醬油。注意:玻璃能夠吸附 DNA,故不能使用玻璃器皿。
2. 加入 0.1 mL DNA 載體,充分顛倒 10 次搖晃均勻。
3. 加入 1.5 mL DNA 濃縮液,充分顛倒搖晃 10 次。
4. 室溫靜置 10 分鐘,此步非常關鍵,不能省略。
5. 8000 rpm 常溫離心 10 分鐘(需要 50mL 臺式離心機)。
6. 小心移棄上清,注意不要觸及管底離心面的 DNA 沉淀(此沉淀也許看不見)。
7. 加入 15 mL 醬油 DNA 洗滌液,震蕩半分鐘混勻后,8000rpm 常溫離心 5 分鐘。
8. 小心移棄上清,注意不要觸及管底離心面的 DNA 沉淀(此沉淀也許看不見)。
9. 在沉淀中加入 0.6 mL 醬油 DNA 溶解液,振蕩 30 秒混勻后。注意:醬油 DNA溶解液在 4℃放置后可能會產生沉淀,如果有沉淀,使用前必須放在 65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。
10. 加入 0.8mL 上柱結合液到離心管中,吹打混勻后轉移一半的混合液(0.8mL)到硅膠膜離心吸附柱中,室溫放置 2 分鐘。
11. 13,000 rpm 室溫離心 1 分鐘(需要 1.5mL 臺式離心機),棄收集管中的穿透液,把離心吸附柱放回到收集管中。
12. 將剩余的另外一半裂解液(0.8mL)轉移到硅膠膜離心吸附柱中,室溫放置 2 分鐘。
13. 12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘,棄收集管中的穿透液,把離心吸附柱放回到收集管中。
14. 加入 0.7 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中,12,000 rmp 室溫離心 1 分鐘,棄收集管中的穿透液,把離心吸附柱放回到收集管中。
15. 加入 0.3 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中,12,000 rmp 室溫離心 1 分鐘,棄收集管中的穿透液,把離心吸附柱放回到收集管中。此為第二次洗滌,可以跳過。
16. 12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘(干甩),棄含穿透液的離心管。
17. 將干甩后的離心吸附柱套入到一個自備的 1.5 mL 離心管中,在離心吸附柱的濾膜的中部加入 30 uL DNA 洗脫液 3.0,然后室溫放置 2 分鐘。
18. 12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘,離心管中的溶液即為醬油 DNA 溶液。
19. DNA 樣品可以直接用于 PCR 或其他擴增,也可放-20℃長期保存。
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