胚胎裂解液
產(chǎn)品及特點(diǎn) 單細(xì)胞裂解液(RNA 專用)是單細(xì)胞 RNA 提取專用裂解液,產(chǎn)品經(jīng)過多次優(yōu)化,含有多種去污劑、變性劑和鹽,可有效抑制核酸酶在裂解過程中對(duì)核酸的破壞,維持核酸的穩(wěn)定性。單細(xì)胞裂解物可以直接用于測(cè)序和 RT-PCR 等試驗(yàn)。本產(chǎn)品足夠使用 200 次以上。
胚胎裂解液用于將卵裂球(blastomere,含 2-8 個(gè)細(xì)胞)分離成單個(gè)胚胎的溶液,得到的單個(gè)細(xì)胞如果用于 DNA 分析(如全基因組擴(kuò)增或 PCR),則可直接用于單細(xì)胞裂解液(DNA 型)裂解;如果用于 RNA 分析(如 RT-PCR),則可直接用于單細(xì)胞裂解液(RNA 型)裂解。本產(chǎn)品不能用于胚囊(blastocyst,含 70-100個(gè)細(xì)胞)。
胚胎裂解液
規(guī)格及成分 單細(xì)胞裂解液(RNA 型)成分表:
成 份 編 號(hào) 熱封袋包裝
單細(xì)胞裂解液(RNA 型) 130804 1 mL
使用手冊(cè) 130804sc 1 份
胚胎裂解液成分表:
成 份 編 號(hào) 熱封袋包裝
胚胎裂解液 130806 1 mL
使用手冊(cè) 130806sc 1 份
胚胎裂解液運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,=20℃保存,有效期一年。
自備試劑 PBS 溶液(CAT#:100215,可向天恩澤另購)
使用方法 如何制備單個(gè)細(xì)胞取決于實(shí)驗(yàn)樣品和實(shí)驗(yàn)者所擁有的儀器設(shè)備,此處所列步驟僅針對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞、實(shí)體組織、淋巴細(xì)胞和卵裂球(2-8 細(xì)胞胚胎)等材料,對(duì)其
他材料(如干細(xì)胞克隆、胚囊、胚胎組織等),用戶需自行選用合適的方法制備單細(xì)胞。對(duì)已經(jīng)處于單細(xì)胞懸浮狀態(tài)的細(xì)胞(如 FACS 分離細(xì)胞、卵細(xì)胞等),則可以跳過制備過程而直接進(jìn)入單細(xì)胞裂解步驟:
一、用培養(yǎng)細(xì)胞或?qū)嶓w組織制備單細(xì)胞:
1. 按常規(guī)胰酶方法處理培養(yǎng)細(xì)胞或組織,將細(xì)胞重懸于自備的液體細(xì)胞培養(yǎng)基中。
2. 按常規(guī)方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。
3. 轉(zhuǎn)移 100-4000 個(gè)細(xì)胞到新離心管中,400 g 離心 4 分鐘沉淀細(xì)胞,小心棄上清(培養(yǎng)基)。
4. 將細(xì)胞沉淀重懸于 50 uL 自備的 PBS 溶液中,使其終濃度為 2-80 個(gè)細(xì)胞/uL。
5. 在干凈的培養(yǎng)皿上點(diǎn)加數(shù)個(gè)含 5 uL PBS 溶液的小液滴,加入 5 uL 細(xì)胞懸浮液到個(gè)小液滴中,然后再從個(gè)小液滴中轉(zhuǎn)移 5 uL 到第二個(gè)小液滴,如此系列稀釋樣品數(shù)次,使得其濃度接近每 2.5 uL 液體中含 1 個(gè)細(xì)胞,放冰上待用。
二、用卵裂球(blastomere,2-8 細(xì)胞胚胎)制備單個(gè)細(xì)胞:
6. 在培養(yǎng)皿中點(diǎn)數(shù)個(gè)含 5 uL 胚胎裂解液(CAT#:130806)的小液滴。
7. 顯微鏡下用微量注射液加入一個(gè)卵裂球到一個(gè)胚胎裂解液小液滴中。
8. 轉(zhuǎn)移幾次到后面的幾個(gè)液滴中以便將帶入的培養(yǎng)基稀釋掉。
9. 在最后一個(gè)液滴中,卵裂球的幾個(gè)細(xì)胞將彼此分開成單個(gè)細(xì)胞。
10. 取單個(gè)細(xì)胞,轉(zhuǎn)移到數(shù)個(gè)含 5 uL PBS 溶液的小液滴中洗滌掉胚胎裂解液。
11. 在顯微鏡下用顯微注射儀取只含一個(gè)細(xì)胞的 2.5 uL 樣品并轉(zhuǎn)移到一個(gè) 200uL 的 PCR 管中待用。同時(shí)設(shè)置無樣品的陰性對(duì)照(2.5 uL 樣品中不含細(xì)胞)。
三、用單細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞
12. 在顯微鏡下用顯微注射儀取 2.5 uL 樣品,確認(rèn)含一個(gè)細(xì)胞后,將其轉(zhuǎn)移到一個(gè)含 2.5 uL 單細(xì)胞裂解液的 PCR 管中。同時(shí)設(shè)置無樣品的陰性對(duì)照(2.5uL 樣品中不含細(xì)胞)。
13. 在 2.5 uL 樣品中,顯微鏡下細(xì)胞懸液可直接用于單細(xì)胞裂解反應(yīng)。
14. 裂解后可以放冰上待用,如果長(zhǎng)期不用,可以放-80℃保存。
四、單細(xì)胞裂解物的 RT-PCR 擴(kuò)增
15. 細(xì)胞裂解物從-80℃中取出后,放冰上融化待用。
16. 以上步操作得到的細(xì)胞裂解物為模板,按常規(guī)方法進(jìn)行 RT-PCR 反應(yīng)。
關(guān)鍵字: 胚胎裂解液廠家;胚胎裂解液現(xiàn)貨
上??道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè),專營(yíng)生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細(xì)胞生物學(xué),分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品??偛课挥谏虾?,并在北京、廣東,江西,吉林等全國(guó)30多個(gè)省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國(guó)科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦,上海交大,復(fù)旦醫(yī)學(xué)院,上海中醫(yī)藥大學(xué),華東師范大學(xué),第二軍醫(yī)大學(xué),曙光醫(yī)院,浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用,可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。