可視化LAMP試劑盒
本試劑盒是本公司通用型 LAMP 試劑盒的升級(jí)版，它有下列特點(diǎn)：
1. 將可視化 LAMP 染料和 Bst DNA 聚合酶整合到 2×LAMP MagicMix 中，減少了加樣操作，能降低操作誤差。
2. 變色式可視化肉眼檢測(cè)，不需要任何儀器即可肉眼判斷是否有擴(kuò)增。
3. 使用改良的溫?zé)釂?dòng) Bst DNA 聚合酶，該酶只有在 40℃以上時(shí)才有活性，反應(yīng)特異性更強(qiáng)。
4. 改良的酶既可用于 DNA 為模板的 LAMP 擴(kuò)增，也可用 RNA 模板的RT-LAMP 擴(kuò)增。
5. 高擴(kuò)增效率更高，比 PCR 靈敏一個(gè)數(shù)量級(jí)，可檢測(cè)到單拷貝的 DNA 分子。
6. 本試劑盒足夠 50 次 20uL 體系的 LAMP 擴(kuò)增，只可用于科研。
運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，免 DNA 提取試劑可以常溫保存。有效期一年。本試劑盒中的 2×可視化 LAMP MagicMix 由于含有 Bst DNA 聚合酶，故不能反復(fù)凍融超過 10 次。如果需要反復(fù)凍融 10 次以上，建議收到貨后立即分裝，一次用其中一管，減少凍融次數(shù)。
可視化LAMP試劑盒
規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 十孔盒包裝
2×可視化 LAMP MagicMix 180601a 500 uL（綠蓋）
LAMP 陽性對(duì)照模板-引物混合物 130923a 45 uL（黃蓋）
超純水 100935 1 mL（藍(lán)蓋）
使用手冊(cè) 180601sc 1 份
免費(fèi)贈(zèng)送免 DNA 提取試劑盒試用裝，足夠處理 30 個(gè)樣品。
成 份 編 號(hào) 十孔盒包裝
免 DNA 提取溶液 A 成分一 130985a1 30 uL（白蓋）
免 DNA 提取溶液 A 成分二 130985a2 60 uL（本色蓋）
免 DNA 提取溶液 B 130985b 300 uL（紅蓋）
自備試劑 LAMP 模板、RT-LAMP 模板及 LAMP 引物
使用方法
1. 制備DNA或RNA樣品：用合適的DNA或RNA提取試劑盒提取樣品DNA或RNA。本試劑盒含免DNA提取試劑盒試用裝（足夠處理30個(gè)樣品）。具體操作見使用方法后的
引物混合液。如果需要配制的5×LAMP引物混合液體積大于或小于1mL，
則各成分的用量請(qǐng)按比例調(diào)整。此混合液可以在-20℃放置2年。
引物名稱 母液濃度 加入量 在混合液中濃度
FIP 引物 100 uM 80 uL 8 uM
BIP 引物 100 uM 80 uL 8 uM
F3 引物 100 uM 10 uL 1 uM
B3 引物 100 uM 10 uL 1 uM
Loop F 100 uM 20 uL 2 uM
Loop B 100 uM 20 uL 2 uM
超純水 780 uL
3. 在新的反應(yīng)管中設(shè)置LAMP反應(yīng)（PC為陽性對(duì)照、NC1為不加模板陰性對(duì)照、NC2為不加引物陰性對(duì)照。注意：為便于可視化顏色比較，每次實(shí)驗(yàn)必須設(shè)置至少一個(gè)陰性對(duì)照。本試劑盒只提供LAMP的陽性對(duì)照模板，不提供RT-LAMP的陽性對(duì)照模板）：
成份 樣品管 PC NC1 NC2
2×可視化 LAMP MagicMix 10 uL 10 uL 10 uL 10 uL
自備 5×LAMP 引物混合液 4 uL - 4 uL -
自備模板 DNA 或 RNA 1-100ng - - -
LAMP 陽性對(duì)照模板-引物混合物 - 4.5 uL - -
補(bǔ)超純水到 20 uL 20 uL 20 uL 20 uL
4. 混勻，此時(shí)反應(yīng)液呈現(xiàn)非常淡的藍(lán)色。置于60-65℃保溫60-120分鐘（具體溫度跟用戶設(shè)計(jì)的LAMP引物序列相關(guān)，一般選擇63℃。如果是在PCR儀中保溫，必須加熱蓋。如果用金屬浴保溫，沒有熱蓋，建議覆蓋30uL石蠟油，否則保溫期間反應(yīng)體系的水分會(huì)蒸發(fā)，影響反應(yīng)效率）。
5. 80℃10分鐘滅活Bst DNA聚合酶。
6. 觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。將反應(yīng)管放置在白色背景前觀察，觀察反應(yīng)液顏色。陽性對(duì)照（PC）將呈現(xiàn)淡藍(lán)色，無模板和無引物陰性對(duì)照將呈現(xiàn)無色或非常淺的藍(lán)色，樣品管的顏色如果接近陽性對(duì)照則說明有擴(kuò)增，如果接近陰性對(duì)照則說明無擴(kuò)增。標(biāo)準(zhǔn)的反應(yīng)結(jié)果如下圖（左邊為陰性，右邊為陽性）：
7. 如果結(jié)果不明確，則需要電泳確認(rèn)：取擴(kuò)增產(chǎn)物5 uL跟上樣液（loadingbuffer）混合后上樣，出現(xiàn)LAMP特征性電泳圖譜則表示有擴(kuò)增。由于電泳需要打開反應(yīng)管的蓋子，非常容易污染實(shí)驗(yàn)環(huán)境，所以LAMP電泳區(qū)域必須跟反應(yīng)設(shè)置區(qū)域分開。
8. 結(jié)果分析：如果陽性對(duì)照能夠擴(kuò)增而陰性對(duì)照不能擴(kuò)出，則實(shí)驗(yàn)有效。如果陽性對(duì)照沒有擴(kuò)增出條帶，則試劑盒的問題，請(qǐng)跟廠家聯(lián)系。如果陰性對(duì)照出現(xiàn)擴(kuò)增條帶，則說明LAMP樣品或試劑被上次擴(kuò)增產(chǎn)物污染，需要注意操作的規(guī)范性，重新設(shè)計(jì)針對(duì)另一區(qū)域的新引物。
附錄：免DNA提取操作步驟
1. 配制免 DNA 提取溶液 A 工作液 1mL（足夠 10 個(gè)樣品，如果待測(cè)樣品數(shù)量為其他數(shù)字，各成份用量需要相應(yīng)調(diào)整）：在一干凈塑料管中加入 10uL 溶液 A 成分一，20uL 溶液 A 成分二和 970uL 超純水，充分混合均勻即得1mL 溶液 A 工作液。處理一個(gè)樣品需要 100uL 溶液 A 工作液。沒用完的溶液 A 工作液可室溫放置，但在一周內(nèi)用完，不要長(zhǎng)期放置。
2. 對(duì)檢測(cè)基因組 DNA，按參考下取樣到一干凈的塑料離心管中（對(duì)表中未列
出的植物，用戶需要自己摸索用量）：
樣品種類 取用量
動(dòng)物組織 1-5 mg
鼠尾 2mm 長(zhǎng)
血液樣品 不超過 20 uL
植物葉片 1-5 mg，多酚多醌植物不要超過 0.5mg
植物種子（去皮） 1-5 mg
細(xì)菌或酵母培養(yǎng)物 0.2-0.5mL 培養(yǎng)物的沉淀
3. 加入 100 uL 溶液 A 工作液，確保樣品被溶液淹埋。95℃保溫 10 分鐘。
4. 待冷卻到常溫后加入 10uL 溶液 B 并混勻得細(xì)胞裂解液，放冰上待用。每次 LAMP 擴(kuò)增取 1-2uL 細(xì)胞裂解液當(dāng)模板即可。如果細(xì)胞裂解液暫時(shí)不用，可以放-20℃長(zhǎng)期保存。
關(guān)鍵字： 可視化LAMP試劑盒廠家；可視化LAMP試劑盒現(xiàn)貨
上?？道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè)，專營(yíng)生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細(xì)胞生物學(xué)，分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品?？偛课挥谏虾＃⒃诒本?、廣東，江西，吉林等全國(guó)30多個(gè)省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國(guó)科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦，上海交大，復(fù)旦醫(yī)學(xué)院，上海中醫(yī)藥大學(xué)，華東師范大學(xué)，第二軍醫(yī)大學(xué)，曙光醫(yī)院，浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用，可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。