柱式骨骼DNAout
產(chǎn)品及特點(diǎn)本產(chǎn)品是專門用于從動物骨骼(包括骨粉)樣品中提取 DNA 的產(chǎn)品,20次規(guī)格足夠 50 次微量提取。它具有下列特點(diǎn):
1. 微量提取,一次可以處理 300 mg 左右的骨骼(但需要先將骨粉變成骨粉)。
2. 柱式操作,方法簡單,整個(gè)過程只需要 40-60 分鐘。
3. 得到的 DNA 分子量不均勻,一般在 20 Kb 到 100 bp 之間,具體取決于骨骼的新鮮程度,骨粉的加工方法等。
4. 得到的 DNA 可以直接用于 PCR 或熒光 PCR 反應(yīng)。
柱式骨骼DNAout
規(guī)格及成分 成份 編號 大紙盒包裝
柱式骨骼 DNAout 溶液 A 91102a 50 mL 柱式骨骼 DNAout 溶液 B 91102b 15 mL(棕色瓶) 柱式骨骼 DNAout 溶液 C 91102c 30 mL 離心吸附柱 60911 50 套 通用洗柱液 60408 50 mL DNA 洗脫液 2.0 111205 10 mL 使用手冊 91102sc 1 份
柱式骨骼DNAout運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸和保存,有效期一年。自備試劑 氯仿
使用方法 1. 骨粉的制備:用自備酒精將骨骼表面擦洗干凈,以防污染物對后續(xù) PCR的影響,然后用骨鉆在處理干凈的骨骼區(qū)域鉆取骨粉。對于已經(jīng)制備好的、商品化的骨粉,可以跳過此步,直接進(jìn)入下一步。
2. 用天平稱取 0.2 克骨粉,轉(zhuǎn)移到 2 mL 塑料離心管中。
3. 加入 1 mL 溶液 A 到骨粉中,充分振蕩 30 秒混勻。(注意:溶液 A 在 4℃放置后可能會產(chǎn)生沉淀,使用前必須放在 65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用,且骨粉加到溶液 A 中后會特別黏稠,需使勁振蕩混勻。)
4. 65℃水浴放置 30 分鐘。
5. 加入 0.3 mL 的溶液 B 和 0.2 mL 的自備氯仿,充分振蕩 30 秒混勻。
6. 12,000 rpm 室溫離心 3 分鐘,小心將上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的塑料離心管中。
7. 加入 0.5 mL 溶液 C,顛倒混勻。
8. 將混合液分兩次轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,每次轉(zhuǎn)移后需要 12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘,并棄收集管中的穿透液。
9. 加入 0.5 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中,12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘,棄收集管中穿透液。
10.再加入 0.5 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中,12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘,棄收集管中穿透液。
11.12,000 rpm 室溫離心半分鐘,棄含穿透液的收集管。此步干甩十分重要,否則殘留的液體會抑制后續(xù)的 PCR。
12.將離心吸附柱套入到一個(gè)自備的干凈的 1.5 mL 塑料離心管中,在離心吸附柱的濾膜的中部加入 30 uL DNA 洗脫液,然后室溫放置 2 分鐘。如果先將 DNA 洗脫液預(yù)熱到 60-80℃再使用,效果更佳。
13.12,000-15,000 g 室溫離心 1 分鐘,離心管中收集的樣品即為骨骼 DNA。
14.取少量進(jìn)行電泳檢測。注意:一般 DNA 都呈現(xiàn)彌散狀,分布在 20 Kb 到100 bp 這一廣泛的范圍,其比例跟骨骼(或骨粉)的新鮮程度、加工過程(對骨粉)等因素密切相關(guān)。
15. DNA 樣品可以直接用于 PCR,也可放-20℃長期保存。
關(guān)鍵字: 柱式骨骼DNAout廠家;柱式骨骼DNAout現(xiàn)貨
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