柱式細(xì)菌DNAout
產(chǎn)品及特點(diǎn)本產(chǎn)品是在基因在細(xì)菌 DNAOUT 基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)的柱式升級(jí)產(chǎn)品,可以用于絕大多數(shù)革氏陽(yáng)性和陰性細(xì)菌基因組 DNA 的快速提取。
1. 操作簡(jiǎn)單,整個(gè)過(guò)程不到 20 分鐘。
2. 產(chǎn)率一般在 5-20 ug/mL 過(guò)液培養(yǎng)的飽和菌液(108-109個(gè)細(xì)胞)。
3. OD260/280 一般在 1.8 以上,可直接用于 PCR、酶切、雜交等實(shí)驗(yàn)。
4. DNA 片段長(zhǎng)度一般在 40-50 Kb 左右。
5. 每次提取可以處理 0.1-1.5 mL 的細(xì)菌,也可以使用菌落。
6. 價(jià)廉物美,與國(guó)外同類(lèi)產(chǎn)品相比質(zhì)量相當(dāng),但價(jià)格便宜。
7. 安全無(wú)毒,本試劑盒對(duì)人體無(wú)害,無(wú)腐蝕性和刺激性氣味。
柱式細(xì)菌DNAout
規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 大紙盒包裝
溶菌酶干粉 100406 600 mg 溶液 A 60802A 15 mL 溶液 B 60802B 7.5 mL 溶液 C 60802C 30 mL 離心吸附柱 60911 50 套 通用洗柱液 60408 50 mL DNA 洗脫液 2.0 111205 10 mL 使用手冊(cè) 60802sc 1 份
柱式細(xì)菌DNAout運(yùn)輸及保存常溫運(yùn)輸及保存(溶菌酶干粉需要 4℃或-20℃保存),有效期一年。 自備試劑 氯仿、自備菌水。
使用方法注意:溶液 A 和溶液 B 容易產(chǎn)生沉淀,溶液 B 十分粘稠,均需要放置在 65℃預(yù)熱使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分搖勻。
一: 對(duì)革氏陰性細(xì)菌樣品, 不需用溶菌酶
1. 將 0.1-1.5 mL 過(guò)夜培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到 1.5 mL 塑料離心管中, 12,000 rpm室溫離心 1 分鐘沉淀細(xì)菌,棄上清。
2. 加入 300 uL 預(yù)熱的溶液 A 到細(xì)菌沉淀中,充分吹打均勻。
3. 再加入 150 uL 預(yù)熱的溶液 B 到離心管中,顛倒數(shù)次混勻。此時(shí)溶液中可能有白色絲狀懸浮物產(chǎn)生。由于溶液 B 比較粘稠,可以采取稱(chēng)量方法取用,150uL 約等于 150-160 mg。也可以將 1 mL 槍頭剪去一截再吸取。
4. 65℃放置 3-5 分鐘。如果室溫放置,DNA 產(chǎn)量會(huì)降低 10-20%。
5. 加入 200 uL 自備氯仿,震蕩混勻 10-30 秒,此時(shí)溶液將呈乳白色。
6. 12,000 rpm 室溫離心 2 分鐘。此時(shí)上清液將變得透明,中間層有白膜。小心轉(zhuǎn)移上清液到一個(gè)新的 1.5 mL 塑料離心管中,避免觸及中間層的白膜。
7. 加入 1.5 倍體積(約 0. 7 mL)的溶液 C,顛倒混勻后全部轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,室溫放置至少 2 分鐘。
8. 12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘,DNA 將吸附在離心吸附柱的膜上,倒棄收集管中的穿透液。
9. 將 0.5 mL 通用洗柱液加入離心柱中,12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘,棄穿透液。
10. 重復(fù)上步操作一次。
11. 空甩半分鐘去除殘留液體,將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到新的 1.5 mL 離心管中。
12. 加 50-100 uL 通用洗脫液,室溫放置 3-5 分鐘。
13. 12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘即得 DNA 溶液。
14. 由于本產(chǎn)品使用的離心吸附柱吸附 DNA 的能力較強(qiáng),可以重復(fù)上步操作一次以便得到更多的 DNA。
15. 直接取 5-10 uL 電泳檢測(cè) DNA,其余放冰箱備用。
二: 對(duì)革氏陽(yáng)性細(xì)菌樣品,需用溶菌酶
1. 將 0.1-1.5 mL 過(guò)夜培養(yǎng)的革氏陽(yáng)性細(xì)菌 12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘后, 重懸于 0.6 mL 溶菌液中(溶菌液配制:30 mL 無(wú)菌水+600 mg 溶菌酶,配制后分裝成小管并放-20℃長(zhǎng)期保存,每次只用一小管),顛倒混勻 5-10 次后放 37℃保溫至少 30 分鐘(有的革氏陽(yáng)性菌種可能需更長(zhǎng)時(shí)間,需要自己根據(jù)不同的細(xì)菌摸索)。
2. 12,000 rpm 室溫離心 10 分鐘,小心棄上清。
3. 后續(xù)處理接上面的革氏陰性細(xì)菌提取步驟中的第 2 步。
三: 其他注意事項(xiàng)
1. 可以直接使用細(xì)菌菌落提取 DNA,操作時(shí)直接將細(xì)菌菌落挑入到溶液 A 中,后續(xù)操作同上。
2. 從單個(gè)菌落中提取到的 DNA 較少,所以只用 30 uL 通用洗脫液洗脫。
關(guān)鍵字: 柱式細(xì)菌DNAout廠家;柱式細(xì)菌DNAout現(xiàn)貨
上??道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè),專(zhuān)營(yíng)生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細(xì)胞生物學(xué),分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品??偛课挥谏虾#⒃诒本?、廣東,江西,吉林等全國(guó)30多個(gè)省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國(guó)科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦,上海交大,復(fù)旦醫(yī)學(xué)院,上海中醫(yī)藥大學(xué),華東師范大學(xué),第二軍醫(yī)大學(xué),曙光醫(yī)院,浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用,可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。