名稱 TMB顯色液(沉淀型，組化或膜HRP顯色用)
規(guī)格 100mL | 500mL
存儲(chǔ) 4℃避光保存；一年有效。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介 
TMB，即 3, 3′,5 ,5′-Tetramethylbenzidine，是辣根過氧化物酶（HRP）的常用底物。在辣根過氧化物酶或其他適當(dāng)過氧化物酶的催化下，TMB 會(huì)產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物。Phygene的TMB 顯色液（沉淀型，組化或膜HRP顯色用，TMB Color Development Solution for IHC or Blotting）采用最新的單一溶液的TMB 顯色技術(shù)，用于Western 或免疫組化等 HRP的顯色檢測(cè)，簡(jiǎn)化了操作步驟，并且使檢測(cè)結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。本顯色液具有高靈敏性，與HRP反應(yīng)后產(chǎn)生藍(lán)紫色沉淀，沉淀吸附于印跡膜上，不會(huì)脫落，方便顯色結(jié)果的保存和觀察。由于產(chǎn)生的是沉淀型藍(lán)色產(chǎn)物，不適用于ELISA檢測(cè)。

用于免疫組化檢測(cè)時(shí)，如果每個(gè)樣品的顯色液用量為0.1ml，則可以檢測(cè)1000個(gè)樣品；對(duì)于膜的顯色檢測(cè)，如果每次使用2.5 ml顯色液，則可以檢測(cè)40次。

特點(diǎn)：

方便：無需其他試劑,直接使用;也無需特別的設(shè)備，能直接觀察；
靈敏：獨(dú)特的配方,顯色時(shí)間短,對(duì)超微量的HRP都能檢測(cè)，不像4-CN等那樣會(huì)褪色；
安全：不含任何有機(jī)溶劑，也無需用有機(jī)溶劑稀釋；
穩(wěn)定：4℃避光保存至少1年有效。


使用說明 

如果發(fā)現(xiàn)TMB顯色液出現(xiàn)混濁或顏色變成藍(lán)色，應(yīng)該停止使用。

一. 免疫組化檢測(cè)：

1. 參考免疫組化的實(shí)驗(yàn)步驟，在與辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體孵育后，用適當(dāng)洗滌液（如PBS）洗滌3-5次，每次3-5分鐘。
2. 洗滌完畢后，去除洗滌液，滴加約100微升TMB顯色液。
3. 室溫避光孵育3-30分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間(可在濕盒中顯色過夜)，直至顯色至預(yù)期深淺。
4. 去除染色液，加入重蒸水孵育10分鐘以終止反應(yīng)。
5. 拍照記錄或適當(dāng)封片后拍照記錄。如果有必要，可以使用中性紅染色液進(jìn)行復(fù)染后再進(jìn)行拍照記錄或適當(dāng)封片后拍照記錄。

二. 膜的HRP顯色檢測(cè)：

1. 參考相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)步驟，在與辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體孵育后，用適當(dāng)洗滌液洗滌3-5次，每次5分鐘左右。
2. 洗滌完畢后，去除洗滌液，
3. 滴加約適量TMB顯色液充分覆蓋膜。
4. 室溫避光孵育3-30分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間(可長(zhǎng)達(dá)數(shù)小時(shí))，直至顯色至預(yù)期深淺。
5. 直接拍照記錄。

常見問題 


一. 背景顯色太深。
1. 如果背景顯色太深，一方面需考慮使用適當(dāng)?shù)姆忾]液進(jìn)行封閉，例如選購適當(dāng)?shù)姆忾]液或使用和一抗相同來源的血清(10%)進(jìn)行封閉。另一方面，請(qǐng)選購經(jīng)過適當(dāng)吸附的二抗，以減小二抗的非特異性吸附。
2. 可以考慮縮短顯色時(shí)間，或降低二抗?jié)舛取Ａ硗?，選擇適當(dāng)強(qiáng)度的洗滌液，或延長(zhǎng)洗滌時(shí)間也會(huì)有所幫助。

二. 沒有顯色或顯色太弱。

1. 適當(dāng)提高一抗或二抗的濃度。在離心管內(nèi)用稀釋的二抗與染色液反應(yīng)，檢測(cè)二抗是否可以被正常顯色。
2. 可以考慮使用更加靈敏的放大檢測(cè)體系，例如使用生物素檢測(cè)體系。
3. 可以適當(dāng)延長(zhǎng)顯色時(shí)間。
4. 如果上述改進(jìn)不能獲得預(yù)期效果，對(duì)于免疫組化或Western，可以考慮更換效果更好的一抗；對(duì)于Southern、Northern或原位雜交，則可以考慮更換探針。

注意事項(xiàng) 

1）TMB 對(duì)人體有刺激性，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
2）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。