名稱 檸檬酸鈉抗原修復(fù)液(50×)| Citrate Antigen Retrieval Solution(50×) 貨號(hào)&規(guī)格 100mL | 500mL 存儲(chǔ) 2-8℃保存,一年有效。 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本產(chǎn)品是 50×的濃縮液,使用之前按需要量用去離子水或雙蒸水稀釋至 1×。
組織在制作過(guò)程中,由于化學(xué)試劑的作用封閉了抗原,又由于熱的作用致使部分抗原的肽鏈發(fā)生扭曲,致使在免疫組化的染色過(guò)程中不能將其顯示出來(lái),為了解決上述的問(wèn)題,利用化學(xué)試劑和熱的作用將這些抗原重新暴露出來(lái)或修正過(guò)來(lái)的過(guò)程稱為抗原修復(fù)。檸檬酸鹽、EDTA或Tris等緩沖液在熱的條件下可以使被福爾馬林屏蔽的抗原重新暴露出來(lái),同時(shí)又不會(huì)對(duì)抗原表位造成破壞,從而提高抗原的檢出率,降低背景染色,提高診斷的準(zhǔn)確率。
檸檬酸鈉抗原修復(fù)液(Citrate Antigen Retrieval solution,50×)是一種最常用的抗原修復(fù)液,可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)。 Phygene檸檬酸鈉抗原修復(fù)液采用了廣泛使用的檸檬酸鈉緩沖液(pH6.0),可以有效去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián),充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。通常石蠟切片都需進(jìn)行抗原修復(fù)處理,而冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)處理??乖迯?fù)可以提高石蠟切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰凍切片的染色效果。當(dāng)冰凍切片免疫染色效果不理想時(shí),考慮進(jìn)行抗原修復(fù)。按照每個(gè)片子需要10ml抗原修復(fù)液(1×)計(jì)算,100ml抗原修復(fù)液(50×)可以用于500個(gè)樣本的抗原修復(fù)。 自備材料:系列乙醇,雙蒸水或去離子水,加熱設(shè)備,免疫染色洗滌液 使用說(shuō)明 (一)石蠟切片 1、脫蠟至水 ①二甲苯3次,每次3~5min。 ②無(wú)水乙醇脫水2次,每次3~5min。 ③95%的乙醇,3~5min。 ④90%的乙醇,3~5min。 ⑤80%的乙醇,3~5min。 ⑥70%的乙醇,3~5min。 ⑦蒸餾水沖洗2次,每次3~5min。 2、抗原修復(fù) ①用去離子水或雙蒸水稀釋Citrate Antigen Retrieval solution(50×)至1×。 ②將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中,95℃或沸水加熱約10~30min。 ③抗原修復(fù)液(1×)使用前需預(yù)熱到95~100℃。如果使用微波爐加熱,避免暴沸和過(guò)多的水分蒸發(fā)。隨后大約在20~30min內(nèi)冷卻至室溫。 3、免疫染色洗滌液洗滌1~2次,每次3~5min。 4、進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。 (二)冰凍切片 1、用去離子水或雙蒸水稀釋Citrate Antigen Retrieval solution(50×)至1×。 2、免疫染色洗滌液洗滌切片5min。 3、將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中,95℃或沸水加熱約10~30min 4、抗原修復(fù)液(1×)使用前預(yù)熱至95~100℃。如果使用微波爐加熱,避免暴沸和過(guò)多的水分蒸發(fā)。隨后大約在20~30min內(nèi)冷卻至室溫。 5、免疫染色洗滌液洗滌1~2次,每次3~5min。 6、進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。 (三)其它樣品 其它樣品參考石蠟切片或冰凍切片進(jìn)行操作。 注意事項(xiàng) 浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中,的加熱時(shí)間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索。 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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