產(chǎn)品簡(jiǎn)介
雙縮脲是一種用于分析蛋白質(zhì)的方法,雙縮脲反應(yīng)的原理是在呈藍(lán)色的堿性硫酸銅溶液存在的情況下,銅離子與肽鍵形成有色螯合的銅復(fù)合物,呈紫色。所產(chǎn)生的顏色密度與參與反應(yīng)肽鍵數(shù)成比例,可通過(guò)比色法分析濃度,在紫外可見(jiàn)光譜中的波長(zhǎng)為540nm。雙縮脲法測(cè)定蛋白濃度兼容性亦很好,不受大部分樣本中其他成分的影響,但易受銅離子螯合劑影響,對(duì)于血清總蛋白的雙縮脲分析,膽紅素、脂類、血紅蛋白、葡聚糖具有一定干擾作用。
雙縮脲試劑(AB液)由Biuret Reagent A、Biuret Reagent B組成,如組織里含有蛋白質(zhì)或具有兩個(gè)或兩個(gè)以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng),顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比。該試劑是較為粗略的驗(yàn)證蛋白質(zhì)存在的方法,多用于定性檢測(cè)蛋白質(zhì)。
運(yùn)輸與保存:常溫運(yùn)輸與保存
有效期:12個(gè)月
規(guī)格:2×100mL | 2×500mL
操作步驟(僅供參考):
1、先將Biuret Reagent A 3ml加入待測(cè)樣品3ml,振蕩均勻,以便產(chǎn)生堿性環(huán)境。
2、加入2~3滴Biuret Reagent B,振蕩均勻,如果組織里含有蛋白質(zhì)或具有兩個(gè)或兩個(gè)以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng),顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比。
3、如果想采用分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀測(cè)定,應(yīng)于540nm波長(zhǎng)處的吸光值,如無(wú)540nm,520~562nm之間的波長(zhǎng)也可,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品的蛋白濃度。
注意事項(xiàng):
1、 待測(cè)蛋白和蛋白標(biāo)準(zhǔn)加入雙縮脲試劑后,如果發(fā)現(xiàn)檢測(cè)效果不佳,可以室溫放置1h或60℃放置15min,顏色會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)不斷加深。顯色反應(yīng)也會(huì)隨溫度升高而加快。
2、 檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)所有孔都呈暗紫色,可能原因是樣品含有還原劑,應(yīng)適當(dāng)透析或稀釋樣品。
3、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
The biuret test (Piotrowski's test) is a chemical test used for detecting the presence of peptide bonds. In the presence of peptides, a copper(II) ion forms violet-colored coordination complexes in an alkaline solution. Several variants on the test have been developed, such as the BCA test and the Modified Lowry test
The biuret reaction can be used to assess the concentration of proteins because peptide bonds occur with the same frequency per amino acid in the peptide. The intensity of the color, and hence the absorption at 540 nm, is directly proportional to the protein concentration, according to the Beer-Lambert law.
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關(guān)鍵字: 雙縮脲試劑AB液
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