名稱：10×快速轉(zhuǎn)膜液（Rapid Transfer buffer）

規(guī)格：500ml

存儲(chǔ)：室溫保存，一年有效。

 產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

>>快速轉(zhuǎn)膜液使用獨(dú)特配方，能高效快速地將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜（PVDF或硝纖膜）上。使用濕轉(zhuǎn)法（Tank blot）或半干轉(zhuǎn)法（Semi-dry blot）方法，能在15-35分鐘內(nèi)完成轉(zhuǎn)膜過(guò)程。

>>快速和環(huán)保：快速轉(zhuǎn)膜液不使用甲醇，減輕了對(duì)實(shí)驗(yàn)者和環(huán)境的傷害。

>>兼容性好：快速轉(zhuǎn)膜液能兼容Laemmli膠，預(yù)制膠，Bis-Tris膠等多種凝膠。

>>轉(zhuǎn)移效率高：快速轉(zhuǎn)膜液對(duì)分子量跨度較大的蛋白也有很好的轉(zhuǎn)移效率，有效解決了大小蛋白不能在同一張膜上同時(shí)轉(zhuǎn)移的問(wèn)題。

 使用說(shuō)明

轉(zhuǎn)膜前的準(zhǔn)備：

5-6張裁好的濾紙；裁好的轉(zhuǎn)印膜；足夠的1×快速轉(zhuǎn)移buffer

一 濕轉(zhuǎn)法（Tank blot）：

1 按照下表配制1×快速轉(zhuǎn)膜液

2 將濾紙和海綿浸泡在1×快速轉(zhuǎn)膜液中，完全浸濕。

3 將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘，去除膠表面的SDS；隨后將凝膠浸泡在1×快速轉(zhuǎn)膜液中。

注意：水中漂洗時(shí)間一定不能超過(guò)2分鐘，否則分子量較大的蛋白不能完全轉(zhuǎn)移。

4 按照以下順序做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu)：

負(fù)極（陰極）

一塊海綿

2mm濾紙

凝膠

轉(zhuǎn)印膜

1mm濾紙

一塊海綿（根據(jù)三明治的厚度選擇是否使用）

正極（陽(yáng)極）

注意： = 1 \* GB3 ① 要徹底清除三明治結(jié)構(gòu)中的氣泡，適當(dāng)補(bǔ)加1×快速轉(zhuǎn)膜液保持三明治結(jié)構(gòu)濕潤(rùn)。

= 2 \* GB3 ② PVDF膜使用前要用無(wú)水甲醇潤(rùn)濕30秒。

= 3 \* GB3 ③ 三明治結(jié)構(gòu)的制作不能太緊，也不能太松。太緊和太松都會(huì)影響轉(zhuǎn)印效果。如果太緊的話，可以去除陽(yáng)極一側(cè)的海綿或?yàn)V紙。

5 將三明治結(jié)構(gòu)放于轉(zhuǎn)移槽中。

注：轉(zhuǎn)移槽中可以不用1×快速轉(zhuǎn)膜液，可以用1×TGS（Tris-Glycine-SDS）電泳緩沖液取代。三明治結(jié)構(gòu)中的快速轉(zhuǎn)膜液足夠保證轉(zhuǎn)膜的完成。

二 半干轉(zhuǎn)（Semi-dry blot）：

1 按照下表配制1×快速轉(zhuǎn)膜液：

將濾紙浸泡在1×快速轉(zhuǎn)膜液中，完全浸濕。

3 將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘，去除膠表面的SDS；隨后將凝膠浸泡在1×快速轉(zhuǎn)膜液中。

注意：水中漂洗時(shí)間一定不能超過(guò)2分鐘，否則分子量較大的蛋白不能完全轉(zhuǎn)移。

4 按照以下順序做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu)：

負(fù)極（陰極）

下層濾紙

凝膠

轉(zhuǎn)印膜

上層濾紙

正極（陽(yáng)極）

半干轉(zhuǎn)時(shí)，濾紙、膠、膜之間的大小，一般是下層濾紙>=膜>=膠>=上層濾紙。上下兩層的濾紙一定不能接觸；濾紙、膠、膜之間千萬(wàn)不能有氣泡。接觸的濾紙和氣泡會(huì)造成短路。

注意：PVDF膜使用前要用無(wú)水甲醇潤(rùn)濕30秒。

三 轉(zhuǎn)移條件：

推薦使用恒流轉(zhuǎn)移

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