存儲 4℃避光保存
產(chǎn)品簡介
Schiff試劑又稱雪夫試劑、希夫試劑等,是Schiff于1866年發(fā)現(xiàn)的一種有效的醛試劑,用于檢測醛基(-CHO)。Schiff試劑主要成分是副品紅堿,為三氨基三苯甲烷的氯化物,其中的醌基是品紅顯色原因。在酸化的品紅液中加入亞硫酸或者亞硫酸鹽,品紅被還原為品紅-亞硫酸(或稱白亞磺酸),即Schiff試劑。
主要成分:主要由堿性品紅、偏重亞硫酸鈉、雙蒸水等組成,過濾并且無色處理。
希夫試劑的用途: Schiff試劑主要用于糖原、黏液物質(zhì)等染色,常與過碘酸(也稱高碘酸)配合使用,過碘酸是一種強(qiáng)氧化劑,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛與Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。配制好的Schiff試劑接近于無色。
操作步驟(僅供參考):
1、常規(guī)固定,常采用10% 的福爾馬林,常規(guī)脫水包埋。
2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水;冰凍切片直接入蒸餾水。
3、自來水沖洗2~3min,再用蒸餾水浸洗2 次。
4、置于過碘酸溶液中,室溫放置5~8min,一般不宜超過10min。
5、自來水沖洗1 次,再用蒸餾水浸洗2 次。
6、樣本放入Schiff Reagent,置于室溫陰暗處,浸染10~20 m in。
7、自來水沖洗10min。
8、樣本置于蘇木素染色液中,染細(xì)胞核1~2min。
9、酸性乙醇分化液分化。
10、自來水沖洗10~15min 后,更換雙蒸水清洗,使其返藍(lán)。
11、逐級常規(guī)乙醇脫水。
12、二甲苯透明。
13、中性樹膠封固。
染色結(jié)果:
PAS 反應(yīng)陽性物質(zhì)(糖原或多糖)呈紅色或紫紅色
陰性對照(可選):
1、對照切片可以用唾液,取唾液片(過濾后用)處理30~60 min 后,與其他切片共同入過碘酸溶液。
2、對照片可以淀粉酶,取淀粉酶1g 于雙蒸水或PBS(pH 5.3) 100ml,處理30~60min后,與其他切片共同入過碘酸溶液。
3、如果對照片采用其自身樣本,對照片不經(jīng)過碘酸溶液這一步,直接入Schiff Reagent。
染色結(jié)果:對照片呈陰性反應(yīng),無紫紅色顆粒。
注意事項
1、Schiff Reagent 應(yīng)置于4℃密閉保存,使用時避免接觸過多的陽光和空氣。
2、Schiff Reagent 在室溫過低(小于15℃)情況下反應(yīng)緩慢,可以置于適宜溫水(小于30℃)中恢復(fù)后再使用。
3、理想的Schiff Reagent接近于無色,如果試劑顏色呈極輕微粉紅色亦可考慮使用。如試劑顏色呈明顯的紅色,應(yīng)棄用。
4、顏色深淺很大程度上取決于樣品在過碘酸溶液和Schiff Reagent中作用時間的長短。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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關(guān)鍵字: 希夫試劑
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