染色劑的配制：染色劑是由A液、B液混合配制而成的。取A液20mL和B液80mL混合，就是實(shí)驗(yàn)中所用的吡羅紅甲基綠染色劑。應(yīng)該注意的是該試劑應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。A液避光保存。

產(chǎn)品說明

甲基綠-派洛寧染色液(Methyl Green-Pyronin Staining Solution，也稱 MGP染色液)是一種組織或細(xì)胞染色時(shí)常用的可以把細(xì)胞核染成綠色或藍(lán)綠色，把細(xì)胞漿和細(xì)胞核中的核仁染成紅色的染色液。甲基綠可以和細(xì)胞核中的 DNA 結(jié)合，從而產(chǎn)生細(xì)胞核染色；而派洛寧可以和細(xì)胞漿或核仁中的 RNA 結(jié)合，從而可以使細(xì)胞漿和核仁被染色。

可以和免疫熒光染色或免疫組化染色配合使用。一方面可以在本甲基綠-派洛寧染色液染色后進(jìn)行免疫熒光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫組化染色后再進(jìn)行甲基綠-派洛寧復(fù)染。

一個(gè)包裝的本染色液至少可以染色 200 個(gè)樣品。

染色方法:（僅供參考）

1. 樣品處理

a. 對(duì)于石蠟切片：

二甲苯中脫蠟 5-10 分鐘。
換用新鮮的二甲苯，再脫蠟 5-10 分鐘。
無水乙醇 5 分鐘。
90%乙醇 2 分鐘。
70%乙醇 2 分鐘。
蒸餾水 2 分鐘。

b. 對(duì)于冰凍切片：蒸餾水 2 分鐘。

 
c. 對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞：用 4%多聚甲醛固定 10 分鐘以上。
蒸餾水洗滌 2 分鐘。
換用新鮮的蒸餾水，再洗滌 2 分鐘。

2. 甲基綠-派洛寧染色

對(duì)于上述處理好的樣品： 甲基綠-派洛寧染色液染色 5 分鐘左右(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。 蒸餾水洗滌 2-3 次(每次數(shù)秒鐘)。

3.脫水、透明、封片或進(jìn)行其它染色

丙酮脫水 3 次，每次 1-2 秒。換用丙酮/二甲苯(1:1)洗滌 2 次，每次 1-2 分鐘。 二甲苯透明 1-2分鐘。 換用新鮮的二甲苯，再透明 1-2 分鐘。

用中性樹膠或其它封片劑封片。

 
顯微鏡下觀察，細(xì)胞核呈綠色或藍(lán)綠色，而細(xì)胞漿和核仁呈紅色或紅紫色。

注意事項(xiàng)：

1. 需自備 4%多聚甲醛、70%乙醇和 95%乙醇。如果需要脫水、透明和封片處理，還需自備二甲苯，中性樹膠或其它封片劑。如果樣品是石蠟切片，需自備 90％乙醇，無水乙醇以及二甲苯。

2. 樣品數(shù)量較多時(shí)，可以使用染色架和染色缸，便于操作。

3. 次使用本試劑盒時(shí)建議先取 1-2 個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。

4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

Methyl green-pyronin (MGP) is a classical histological staining technique using two basic (cationic) dyes for the demonstration and differentiation of DNA and RNA. Methyl green is specific for phosphate radicals in the DNA double helix staining it green-blue. Pyronin does not possess this affinity and binds to the remaining negatively charged RNA staining it red. The method is useful in identifying the distribution of Nissl substance in neuronal cell bodies.