內(nèi)容成分:
溶液?A濃縮液(20×)????????????????????????1ml/10ml
溶液?B濃縮液(20×)????????????????????????1ml/10ml
溶液?C濃縮液(20×)????????????????????????1ml/10ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
AEC底物顯色試劑是一種可以通過過氧化物酶催化底物3-氨基-9-乙基咔唑氧化形成紅色不溶性產(chǎn)物,以此鑒定過氧化物酶活性,從而確定目標(biāo)分子表達(dá)情況,該種方法權(quán)威而經(jīng)典。其適用于辣根過氧化酶標(biāo)記蛋白的免疫學(xué)檢測(cè)(蛋白質(zhì)免疫印記、免疫組織化學(xué)、以及原位雜交染色等)。產(chǎn)品性能穩(wěn)定,操作便捷,敏感度高,顯色清晰,重復(fù)性好。
3-氨基-9-乙基咔唑(3-amino-9-ethylcarbazole;AEC)是過氧化物酶(Peroxidase)的生色底物,其分子式為C14H14N2,分子量為210.3。在過氧化物酶的催化下,電子供體AEC底物在過氧化氫氧化下,失去電子而呈現(xiàn)出顏色變化和沉積,形成穩(wěn)定性紅色不溶性產(chǎn)物(能溶于有機(jī)試劑)。
3-氨基-9-乙基咔唑?(3-amino-9-ethylcarbazole,AEC) 是過氧化物酶?(Peroxidase) 的生色底物,在過氧化物酶的催化下,過氧化氫氧化AEC形成穩(wěn)定的紅色沉淀產(chǎn)物。該紅色產(chǎn)物不溶于水,但溶于有機(jī)溶劑。該AEC底物顯色試劑盒加入了增強(qiáng)顯色試劑,敏感度大大提高。產(chǎn)品操作便捷,顯色清晰,重復(fù)性好,適用于HRP系統(tǒng)的?IHC 和?Western Blot實(shí)驗(yàn)的酶促顯色。
使用說明:
1.工作液配制:
取850ul無菌雙蒸水,依次加入50ul溶液A、50 ul溶液B、50ul溶液C、混合均勻,即配成AEC工作液。如需要更大體積工作液,可按相應(yīng)比例放大。此溶液必須現(xiàn)用現(xiàn)配,配好后避光保存,半小時(shí)內(nèi)使用,過期后請(qǐng)將剩余的液體廢棄。
2.顯色:
1)蛋白質(zhì)印跡膜顯色:將配制好的工作液滴加在印跡膜上(或?qū)⒂≯E膜浸入AEC工作液中),顯色時(shí)間一般為10-30min。顯色完畢后,將膜浸入蒸餾水中,終止反應(yīng)。
2)組織切片染色:向組織切片上加入適量AEC工作液,確保能充分覆蓋樣品。室溫孵育10-30 min,避免光照,直至顯色至預(yù)期深淺??稍陲@微鏡下觀察控制顯色時(shí)間。顯色后用蒸餾水洗滌即可終止顯色反應(yīng)。
3)對(duì)于組織切片或細(xì)胞樣品,顯色反應(yīng)終止后,可對(duì)其進(jìn)行其他染料復(fù)染。對(duì)于膜,顯色反應(yīng)終止后,可以室溫晾干避光保存。
注意事項(xiàng):
1.?由于AEC生成的顏色產(chǎn)物為脂溶性,因此用于IHC顯色后不適合梯度酒精脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片,須用水性封片劑封片。
2.?根據(jù)情況自行優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,調(diào)整顯色時(shí)間,獲得顯色效果。
3.?AEC有一定毒性,操作時(shí)請(qǐng)采取必要的防護(hù)措施。
關(guān)鍵字: AEC顯色試劑盒(20×);蛋白與免疫
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