2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride，TTC)，分子量為 334.80，分子式為 C19H15ClN4，CAS 號(hào)為 298-96-4。TTC是脂溶性光敏感復(fù)合物，最初用于檢測種子生存能力，后來用于染色檢測哺乳動(dòng)物組織的缺血梗塞。TTC 是呼吸鏈中吡啶核苷結(jié)合酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體，TTC 與正常組織中的呼吸酶反應(yīng)而呈紅色，而缺血組織內(nèi)呼吸酶活性下降，不能反應(yīng)，故不會(huì)產(chǎn)生變化呈蒼白色，該染色是一種用于評(píng)價(jià)組織內(nèi)脫氫酶活性的大體染色方法。
TTC 染色液(2%)對(duì)心肌梗死及腦組織壞死區(qū)的觀測較電鏡早 3～6h，較光鏡早 24h，多用于尸檢中的新鮮心臟組織和腦組織以及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型早期梗死組織的染色。
其特點(diǎn)：①TTC 染色直接取材于新鮮組織即可染色，無需固定、包埋等步驟；②TTC 染色時(shí)間短，一般 20~30min；③TTC 染色液可重復(fù)使用，10ml 可染 20 張片子。
自備材料：1、 生理鹽水；2、 低溫冰箱；3、 4%多聚甲醛或 10%中性福爾馬林
使用參考( 僅供參考)：
1、 取待檢腦組織樣本(一般可麻醉后直接取腦或經(jīng)生理鹽水灌注后取腦)，取出后-20℃速凍 20～30min，便于切片。
2、 將待檢腦組織切片，一般動(dòng)物樣本層厚 2～3mm，人的樣本層厚 3～5mm，可連續(xù)切 4～5 張。刀在腦前極與視交叉連線中點(diǎn)處；第二刀在視交叉部位；第三刀在漏斗柄部位；第四刀在漏斗柄與后葉尾極之間(參考:張均田主編，現(xiàn)代藥理試驗(yàn)方法)。
3、 切片入 TTC Stain(2%)，避光浸染 25～35min。
4、 切片入 4%多聚甲醛或 10%中性福爾馬林中固定 4～24h。
5、 吸干組織表面清水，應(yīng)用 IPP 等圖像分析系統(tǒng)測量腦梗死面積并計(jì)算大腦梗死體積。
染色結(jié)果
正常心肌或腦組織 紅色
心肌或腦梗壞死區(qū) 蒼白色
缺血腦組織 介于紅色與蒼白色之間
注意事項(xiàng)
1、TTC Stain(2%)對(duì)人體有輕微刺激性，請(qǐng)注意小心防護(hù)。
2、取腦時(shí)應(yīng)仔細(xì)保持大腦的完整性。
3、如果染色效果不佳，應(yīng)適當(dāng)延長染色時(shí)間。
4、樣本越新鮮越好，為了防止正常心肌及腦組織的酶活性減弱或消失，應(yīng)盡快染色。
5、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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