一、生物技術(shù)級(jí):
截留分子量較精準(zhǔn),采用無(wú)重金屬和硫化物的工藝流程。
因而膜純度較高,適用于對(duì)截留分子量和膜純度要求嚴(yán)格的應(yīng)用。有纖維素酯(CE)和再生纖維素(RC)兩種材料的膜。
1、CE膜: 預(yù)濕型的,用的0.05%NaN?溶液濕包裝,使用前用去離子水沖洗
2、RC膜:干型包裝(使用前用50%的乙醇水浸泡約6小時(shí),再用純水沖洗)
二、標(biāo)準(zhǔn)級(jí)
截留分子量精確,金屬雜質(zhì)含量極低,是實(shí)驗(yàn)室常規(guī)脫鹽、換液以及大分子純化的理想選擇。只有再生纖維素(RC)材料的一種膜。
1、預(yù)濕型的,用的0.05%NaN?溶液濕包裝,使用前用去離子水沖洗
2、干型包裝(使用前用50%的乙醇水浸泡約6小時(shí),再用純水沖洗)
三、普通干型透析袋
需要預(yù)處理,處理步驟如下
(1) 把透析袋剪成適當(dāng)長(zhǎng)度(10-20cm)的小段;
(2) 在大體積的2%(WM)碳酸氫鈉和1 mmol/L EDTA(pH8.0)沖將透析袋煮沸10分鐘;
(3) 用蒸餾水徹底清洗透析袋;
(4) 放在1 mmol/L EDTA(pH8.0沖將之煮沸10分鐘;
(5) 冷卻后,存放于4度,必須確保透析袋始終浸沒(méi)在溶液內(nèi)。從此時(shí)起取用透析袋時(shí)必須戴手套;
(6) 用前在透析袋內(nèi)裝滿水然后排出,將之清洗干浄;
實(shí)驗(yàn)要求不高的可以用簡(jiǎn)易處理方法:
在沸水中煮10分鐘即可使用。
透析袋的選擇
(1)根據(jù)樣品溶劑和確定的透析液,選擇CE或RC材料的膜
(2)根據(jù)實(shí)驗(yàn)純度需求選擇生物技術(shù)級(jí)或標(biāo)準(zhǔn)級(jí)的透析袋
(3)正確選擇扁平寬度
透析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。較小的透析管透析更快;較大的透析管因擴(kuò)散距離較長(zhǎng)透析較慢。為易于使用,建議使用總長(zhǎng)(包括閉合夾和頂部空間)為大約10-15cm的透析袋。
(4)根據(jù)雜質(zhì)和要保留的物質(zhì)的分子量選擇一定截留分子量的透析袋。
a.透析袋的截留分子量是指對(duì)該分子量的物質(zhì)的截留率能達(dá)到90-95%,如10000截留分子量的透析袋對(duì)于10000的物質(zhì),截留率是90-95%(5~10%會(huì)出去)
b.對(duì)于雜質(zhì),若想去除的干凈,需選擇100倍的截留分子量的透析袋,如雜質(zhì)是1000,那選擇10萬(wàn)截留分子量的透析袋才能將雜質(zhì)完全去除;但同時(shí)考慮要保留的物質(zhì)的分子量;所以,要想得到純度較高的物質(zhì),就盡量選擇大ー點(diǎn)的截留分子量,產(chǎn)品收率會(huì)降低;若想獲得較高的產(chǎn)品收率就選擇要和保留的產(chǎn)品的分子量相同的透析袋。
注意事項(xiàng)
1.對(duì)于預(yù)型和甘油處理的透析袋,使用前一定要用去離子水完全沖洗掉防腐劑和甘油后使用
2.透析袋不能在純水中長(zhǎng)期儲(chǔ)存,會(huì)長(zhǎng)菌,用0.05%NaN?溶液儲(chǔ)存
3.樣品按推薦的單位長(zhǎng)度容量加樣,不可多加,樣品濃度不可太大,否則容易導(dǎo)致膜漲破
4.樣品和透析液體積比一般是150-500
5.對(duì)于高濃度污染物,樣品可能需要較長(zhǎng)的時(shí)間透析,透析液需要更頻繁的更換
6.透析溫度主要取決于樣品。溫度限制主要取決于膜的類型。纖維素透析袋可以承受的溫度高達(dá)37℃,再生纖維素透析袋可以承受的溫度高達(dá)60℃
7.在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存情條件下,保質(zhì)期為兩年
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