RNeasy Mini Kit 可從少量起始樣本中（最多30 mg 組織或 1 x 107 細胞）有效純化總 RNA （見圖 "RT-PCR of RNA from ≥100 Cells"）。總RNA可方便地從動物細胞及組織、革蘭氏陽性或革蘭氏陰性細菌*或酵母?（見表"Total RNA Yields Obtained with RNeasy Mini Kits" 和圖"High-Quality RNA from a Variety of Samples"）中純化出來。還提供從真核細胞中分離細胞質(zhì)RNA?，回收未完全純化的RNA、體外轉(zhuǎn)錄和酶促反應(yīng)得到的RNA。此外，QIAGEN提供其他特殊應(yīng)用的操作方法，包括真空處理RNeasy mini 分離柱的流程，還可用QIAshredder Homogenizers 方便地將細胞裂解物勻質(zhì)化。 * 提供溶菌酶 (細菌樣品必需)。 ?不提供溶壁酶、消解酶、玻璃微珠 (酵母樣品必需)。 ?需要加入額外的緩沖液。實驗方法中提供緩沖液配方。 RNeasy Mini Kit 特性 規(guī)格： 帶1.5 ml 和2 ml 收集管的Mini離心柱 起始樣本量： 10 - 1 x 107 細胞；0.5-30 mg 組織；<5 x 107 酵母細胞 制備時間： 20 分鐘 結(jié)合能力： 最多 100 μg RNA 產(chǎn)量： 根據(jù)樣本類型不同而有所不同， 見表 洗脫體積： 30-100 μl RNeasy技術(shù)將高效的的異硫氰酸胍裂解技術(shù)與快速高純度的硅膠膜純化技術(shù)相結(jié)合，使總RNA分離變得簡單化。該技術(shù)無需通過氯化銫（CsCl）梯度離心或氯化鋰/乙醇沉淀。RNeasy樣本制備技術(shù)已被完全注冊，純化得到的核酸可用于任何分子檢測或其他下游應(yīng)用中，而無侵犯專利的風險。 RNeasy試劑盒提供高品質(zhì)RNA，幾乎無DNA殘留。對微量DNA非常敏感的RNA應(yīng)用，殘留的DNA可在RNeasy流程中使用RNase-Free DNase Set方便地通過DNA酶柱上消化去除。 Total RNA yields obtained with the RNeasy Mini Kit? 起始樣品 平均產(chǎn)量（μg） 動物細胞 LMH (1 x 106) HeLa (1 x 106) COS-7 (1 x 106) 淋巴細胞（未刺激）(1 x 106) 12 15 35 0.5 小鼠組織 肝臟(10 mg) 肺 (10 mg) 脾(10 mg) 40 10 35 酵母細胞 S. cerevisiae (1 x 107) 25 * 提供溶菌酶、消解酶或玻璃珠（處理酵母細胞需要）。 ? 由于發(fā)育期、種類和生長條件的不同所需的量也不同。由于應(yīng)用RNeasy 處理可富集 >200 nt的RNA，RNA 產(chǎn)量不包括5S rRNA、tRNAs或其他小分子RNA。 操作流程 首先裂解并勻質(zhì)化樣品。在裂解液中加入乙醇來提供合適的結(jié)合條件，接著將裂解液上樣到RNeasy硅膠膜上。RNA與硅膠膜結(jié)合，有效洗滌去除其他各種污染物。最后將濃縮的純RNA洗脫到無RNA酶的水中。 應(yīng)用 經(jīng)RNeasy技術(shù)純化得到的RNA，A260/A280比值可達1.9-2.1（測于10 mMTris-Cl，pH7.5），非常適合于各種下游應(yīng)用，包括： Northern雜交、點雜交和狹縫雜交 RT-PCR（見QIAGEN RT-PCR Systems Overview） Real-time RT-PCR（見Quantitect SYBR Green PCR and RT-PCR System） 芯片分析（Array analysis） Poly A+ RNA純化 提供一系列經(jīng)優(yōu)化的試劑盒，用于從組織樣品中純化RNA。應(yīng)用產(chǎn)品搜索選擇正確的試劑盒。 Images RNeasy Mini spin column. High-quality RNA from a variety of samples. RT-PCR of RNA from >100 cells. Name Details Cat. no. List price RNeasy Mini Kit (50) 50 RNeasy Mini Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml), RNase-free Reagents and Buffers 74104 ￥3,380.00 RNeasy Mini Kit (250) 250 RNeasy Mini Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml), RNase-free Reagents and Buffers 74106 ￥14,860.00 Customers who ordered the above product(s) also ordered: RNase-Free DNase Set (50) 用于RNA純化過程中的DNA酶消化. Contents: 1500 units RNase-free DNase I, RNase-free Buffer RDD, and RNase-free water for 50 RNA minipreps 79254 ￥1,160.00 Real-Time PCR Assays QuantiTect Primer Assays - 預(yù)制mRNA檢測引物 Varies Varies QIAshredder (50) 對細胞和組織裂解液進行簡單、快速勻漿. Contents: 50 disposable cell-lysate homogenizers for use in nucleic acid minipreps, caps 79654 ￥949.00 QIAGEN OneStep RT-PCR Kit (100) 快速成功的一步式RT-PCR. Contents: For 100 x 50 ul reactions: QIAGEN OneStep RT-PCR Enzyme Mix (1 x 200 ul), 5x QIAGEN OneStep RT-PCR Buffer (1 x 1 ml), dNTP Mix (1 x 200 ul, 10 mM each), 5x Q-Solution (1 x 2 ml), RNase-free water (2 x 1.9 ml) 210212 ￥6,110.00 QIAquick PCR Purification Kit (50) 純化PCR產(chǎn)物，100bp-10kb. Contents: For purification of 50 PCR reactions: 50 QIAquick Spin Columns, Buffers, Collection Tubes (2 ml) 28104 ￥1,150.00