"A549[A-549]細胞系|人肺癌細胞
HS-C03６６９２８
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
A549[A-549]細胞系|人肺癌細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
JS１細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
PL-４５細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Hs ６０６.T細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞傳代方法：１：２—１：３傳代，２—３天換液一次
SN１２C細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：２x１０^４ cells/ml
COLO-６９９細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
WRL６８細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
A549[A-549]細胞系|人肺癌細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
購買細胞注意事項：１)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系；２)仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等；３)用７５%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次；４)建議客戶收到細胞后前３天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流?！炯毎麄鞔僮鞑襟E】一、貼壁細胞傳代：１)提前將培養(yǎng)基、PBS放入３７℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用７５%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)；２)吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞；３)加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，３７℃孵育，每隔２~３min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用；４)用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡；５)將細胞懸液分別接種到另外的２~３個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細胞傳代：１)將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，１０００rpm離心５min；２)棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液；３)將細胞懸液分別接種到另外的２~３個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
T１-７３細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞傳代方法：１：２-１：４傳代；每周換液２-３次。
CHG-５細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Sf-２１細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Hep-３B細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Hepa １-６細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：２傳代
RASMC細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
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C５１８細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-BL１３３９細胞系；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣 ；細胞傳代方法：３-４天換液１次。
３２D Clone３細胞系；細胞生長特性：懸浮；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
RPMC細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HCC２１８５細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
GRC-１細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
３D４/２１細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SK-N-AS細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：５-１：１０傳代；每周換液２-３次。
G-３６１細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞傳代方法：１：２-１：４傳代，２-３天換液１次。
bend.３細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：２傳代
TB １ LU細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
G４０１細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
c９１８細胞系；細胞生長特性：貼壁生長 ；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２傳代
NCI-H１７９２細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：３-１：８傳代。
MDCK-２細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SFPAC-１細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
K７M２ wt[K７M２-WT]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
TCAM-２細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HuH-２８細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HEK２９３F細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
PIG３細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H１６５１[H１６５１]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MSCs(mUCMSCs)細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Jurkat D,E細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
RPC細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
PAa細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HFLS-OA細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
２９３FT細胞系；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：圓形；細胞傳代方法：１：２傳代
NCI-H６６１細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：３—１：５傳代，每周換液２—３次
CCD-１９Lu細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
COR-L２３細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H１７７０細胞系；細胞生長特性：懸浮；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MC/CAR細胞系；細胞生長特性：懸??；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Ishikawa細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：３傳代，３-４天換液一次
LC-１sq細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
RIN-m５f細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
L４２８細胞系；細胞生長特性：懸?。患毎螒B(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HCC-２１８５細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
DT４０細胞系；細胞生長特性：貼壁生長 ；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２傳代
BC-００９細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
VK２/E６E７細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SMC細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
B１６-F１０細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
A１８４７細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CAL６２細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
RF９５２細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HCC１８０６細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MC-３８細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２傳代
M１４細胞系；細胞生長特性：混合生長；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：３傳代
QSG７７０１細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MT２細胞系；細胞生長特性：懸??；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HCE-T細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HCC２９３５細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：４-１：６傳代，每周２-３次。
CP７０細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H８３８[H８３８]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H７１６[H７１６]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
A549[A-549]細胞系|人肺癌細胞
WISH細胞系；細胞生長特性：貼壁生長 ；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２-１：４傳代，每周２-３次。
７８６-０細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HIC細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Tcam-２細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HCAEC細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
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