"BT-474[BT474]細胞系|人乳腺導管癌細胞
HS-C03６６９０４
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞株(系)的使用，為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化，因而細胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前，細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍，細胞內外的水分會很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質濃度增高，pH值改變，部分蛋白質由于上述原因而變性，引起細胞內部空間結構紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細胞內結構成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變，使細胞內容物丟失。如果細胞內冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷，而致細胞死亡。因此，細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內水分，減少細胞內冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質分子量小，溶解度大，易穿透細胞，可以使冰點下降，提高細胞膜對水的通透性，且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內的水分滲出細胞外，減少胞內形成冰結晶的機會，從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
BT-474[BT474]細胞系|人乳腺導管癌細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因實驗需要，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內取１０ml培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
SNU-３５４細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２傳代
MDA-MB-１７５細胞系；細胞生長特性：松散貼壁；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２—１：６傳代，每周換液２—３次
HTR-８細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：２傳代
NCI-H１６９４[H１６９４]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HBVAF細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HUH-７.５細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
BT-474[BT474]細胞系|人乳腺導管癌細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。【凍存細胞】１)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內水分在凍結前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩吞K細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
A３７５細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２傳代
２５３J-BV細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SNU-４２３細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：２傳代
TM３細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：２傳代
HCMEC-D３細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NRK-４９F細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
BT-474[BT474]細胞系|人乳腺導管癌細胞
UACC-８９３細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Caco-２細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
KATO Ⅲ細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
LIXC-０１１細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
３T６-Swissalbino細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HME４細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H９２９細胞系；細胞生長特性：懸浮；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
IGROV-１細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
L１３２細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
OE-３３細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：２傳代
HAC-８４細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HCM細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
BV１７３細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
A-７２細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NAMALWA細胞系；細胞生長特性：懸浮生長 ；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣；細胞傳代方法：１：２傳代。３天內可長滿。
G-２９２, clone A１４１B１細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞傳代方法：１：４—１：８傳代；每周換液２-３次
hADSCs細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Hs ２７４.T細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞傳代方法：１：２傳代,每周換液２-３次。
NCI-H２１７１[H２１７１]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HOEC細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
KM９３３細胞系；細胞生長特性：懸?。患毎螒B(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CAL ２７細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：２-１：４傳代；２-３天換液１次
CCD ８４１ CoN細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H２１７０細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞傳代方法：１：３—１：６傳代，３—５天換液１次
８５０５C細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞傳代方法：１：６傳代
Hep ３B(Hep ３B２.１-７)細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SL-１細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HTR８-SVneo細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Hela２９９細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
UACC-８１２細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：３傳代；５-７天１次。
IMR-３２細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：存在兩種細胞類型，小的神經母細胞樣細胞和大的透明成纖維樣細胞；細胞傳代方法：１：２傳代
SW ９５４細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Hela細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：３傳代，２-３天換液一次
HPNC細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Jiyoye細胞系；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞；細胞傳代方法：每周２-３次。
SW２６０細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MEL細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CTV-１細胞系；細胞生長特性：懸??；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
EC８７１２１４細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
LK-２細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H４４１[H４４１]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
PA-１細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞傳代方法：１：４-１：１０傳代；每周２-３次。
SW１９９０細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H２１４１細胞系；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：聚團懸??；細胞傳代方法：３-４天換液１次。
Hce-８６９３細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HaCaT細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：３—１：６傳代，每周換液２—３次
MIHA細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SW １０８８[SW-１０８８,SW１０８８]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
LK-２細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
C６４３細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
OVISE細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CV-１細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣；細胞傳代方法：１：２傳代
NB１-RGB細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HCE-２ [５０.B１]細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
RPPVEC細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
FAK+/+細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞傳代方法：１：４-１：８傳代； 
BT-474[BT474]細胞系|人乳腺導管癌細胞
JEG-３細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：消化３-５分鐘，１：２,３天內可長滿
SW ９５４細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
BC-０２８細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
３T３L１細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
T/G HAVSMC細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
"