30次566.00元來(lái)源用途交叉反應(yīng)性抗體識(shí)別位點(diǎn)HistoneH3分子量Rabbi" />
??????WB, Western blot; IF, Immunofluorescence. ??????H, human. ??????本Histone?H3抗體(Histone?H3?antibody)為進(jìn)口分裝,用人工合成的人histone?H3氨基端aa 1-20該段多肽進(jìn)行適當(dāng)修飾后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽親和柱經(jīng)過(guò)兩步純化得到的高純度抗體。 ??????本Histone H3抗體識(shí)別的是總histone H3(total histone H3),可檢測(cè)內(nèi)源性的Histone H3,未發(fā)現(xiàn)和其它組蛋白有交叉反應(yīng)。 ??????組蛋白histone H2A,H2B,H3和H4各兩個(gè)分子組成的八聚體和與該八聚體相結(jié)合的DNA構(gòu)成了染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)核小體 (necliosome)。組蛋白的存在確保了基因組DNA可以被相對(duì)致密而有序地堆放在細(xì)胞核中。人一個(gè)細(xì)胞的基因組DNA完全拉成線性的總長(zhǎng)度約為1.4米,但染色質(zhì)的總長(zhǎng)度僅為9厘米,而有絲分裂時(shí)染色體的總長(zhǎng)度僅為0.12毫米。除了核心組蛋白(core? histone)histone?H2A,H2B,H3和H4外,還有一類(lèi)linker?histone?H1和H5。Histone?H1可以結(jié)合核小體和DNA在核小體中進(jìn)出的位點(diǎn),從而使DNA的位置被鎖定,有利于在核小體基礎(chǔ)上形成更高級(jí)的空間結(jié)構(gòu)(參考下圖)。組蛋白結(jié)合區(qū)域的DNA長(zhǎng)度為147bp,核小體間的DNA長(zhǎng)度大約為50bp。染色質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的松散還是致密很大程度上決定了該區(qū)域基因轉(zhuǎn)錄水平的高低(參考下圖)。
??????組蛋白是真核生物中呈強(qiáng)堿性的蛋白。組蛋白可以被乙?;⒘姿峄?、甲基化和泛素化修飾。這些修飾會(huì)改變?nèi)旧|(zhì)的空間結(jié)構(gòu),從而在基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控、染色體裝配等過(guò)程中起重要作用。通常,histone H2B的Lys5,Lys12和Lys15會(huì)發(fā)生乙?;揎?。 Histone?H3的Lys9,Lys14,Lys18和Lys23會(huì)發(fā)生乙?;揎?。Histone?H3的Ser10,Ser28和Thr11都會(huì)發(fā)生磷酸化修飾。Histone H3的這些磷酸化和有絲分裂或減數(shù)分裂過(guò)程中的染色質(zhì)濃縮密切相關(guān)。Histone?H3?Thr3的磷酸化在很多物種中都非常保守,可以被激酶haspin所催化。Histone?H3的Thr3磷酸化發(fā)生在有絲分裂早期(prophase),在有絲分裂的晚期(anaphase)則被去磷酸化。Histone?H3和H4是甲基化修飾的主要組蛋白,哺乳動(dòng)物細(xì)胞中histone?H3和H4是高度甲基化的。組蛋白可以被單、雙或三甲基化(mono-, di-, and tri-methylated),和基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控和染色體裝配密切相關(guān)。 ??????Histone?H3在其氨基端有一個(gè)較長(zhǎng)的N?terminal?tail,在核小體的裝配過(guò)程中起關(guān)鍵作用。Histone H3是各種histone中修 飾程度最高的,在表觀遺傳(epigenetics)中起重要作用。Histone?H3包括H3A1、H3A2和H3A3。人的hitone H3由近15個(gè)基因 分別單獨(dú)編碼。 ??????配套提供了Western一抗稀釋液,可以用于Western檢測(cè)時(shí)的一抗稀釋。 ??????建議抗體使用時(shí)的稀釋比例如下(實(shí)際使用時(shí)需根據(jù)抗原水平的高低作適當(dāng)調(diào)整):
??????本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測(cè),至少可以檢測(cè)30次。 包裝清單:
保存條件: ??????Histone H3抗體-20℃保存,Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存,長(zhǎng)期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。 注意事項(xiàng): ??????在Western實(shí)驗(yàn)后,請(qǐng)注意回收稀釋的抗體?;厥盏目贵w在進(jìn)行Western實(shí)驗(yàn)時(shí)至少可以重復(fù)使用10次。稀釋后的抗體,包括已經(jīng)使用過(guò)的稀釋抗體,4℃保存。 ??????回收后重復(fù)使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續(xù)檢測(cè)。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長(zhǎng)霉長(zhǎng)菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。 ? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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