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NADP+/NADPH檢測試劑盒(WST-8法),NADP+/NADPH檢測試劑盒(WST-8法)
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NADP+/NADPH檢測試劑盒(WST-8法)

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發(fā)貨地 上海
更新日期 2024-12-25

產品詳情

中文名稱:NADP+/NADPH檢測試劑盒(WST-8法)英文名稱:NADP+/NADPH檢測試劑盒(WST-8法)
有效期: 一年產品類別: 信號小分子檢測 代謝小分子相關
2024-12-25 NADP+/NADPH檢測試劑盒(WST-8法) NADP+/NADPH檢測試劑盒(WST-8法) RMB 一年 信號小分子檢測 代謝小分子相關
產品編號 產品名稱 產品包裝 產品價格
S0179 NADP+/NADPH檢測試劑盒(WST-8法) 100次 1299.00元

??????碧云天的NADP+/NADPH檢測試劑盒(WST-8法) (NADP+/NADPH Assay Kit with WST-8)是一種基于WST-8的顯色反應,通過比色法來檢測細胞、組織或其它樣品中NADP+?(氧化型輔酶II)和NADPH?(還原型輔酶II)各自的量、比值和總量的檢測試劑盒。
??????NADP+/NADPH以及NAD+/NADH的傳統檢測方法是檢測NADPH或者NADH在340nm處吸收波長的變化,該方法靈敏度較低并易受樣品中有類似紫外吸收物質的干擾,并且在紫外檢測過程中通常需要加大檢測樣品量以彌補NADPH在340nm處吸光度過小的不足,因此該檢測方法具有很大的局限性。
??????WST-8是MTT的一種升級替代產品,和MTT或其它MTT類似產品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點。首先,MTT被一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶液來溶解;而WST-8和XTT、MTS產生的formazan都是水溶性的,可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次,WST-8產生的formazan比XTT和MTS產生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更加穩(wěn)定,使實驗結果更加穩(wěn)定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比,線性范圍更寬,靈敏度更高。
??????WST-8和WST-1相比,檢測靈敏度更高,更易溶解,并且更加穩(wěn)定。
??????本試劑盒使用便捷,無需分離純化細胞、組織或其它樣品中的NADP+和NADPH,且特異性檢測NADP+和NADPH,而不檢測NAD+和NADH。本試劑盒可以檢測含量低至0.05μM?(2.5pmol)的NADP+或NADPH,在0.05μM?(2.5pmol)至6μM (300pmol)之間呈現良好的線性關系。
??????NADP (Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸)是很多氧化還原反應的輔酶,包括NADP+ (氧化型)和NADPH (還原型)兩種形式。NADP+也參與到生物合成反應中,比如脂質和核酸的合成。在動物細胞中,戊糖磷酸途徑(pentose phosphate pathway,PPP)的氧化階段是NADPH最主要的來源。
??????本試劑盒可檢測樣品中的NADP+、NADPH以及它們的比值,具體原理如下:

a.?測定NADP+/NADPH的總量:葡萄糖-6-磷酸(glucose-6-phosphate,?G6P)在葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(glucose-6-phosphate?dehydrogenase,?G6PDH)的作用下氧化生成6-磷酸葡萄糖酸內酯(6-phosphogluconate,6-PG),在這一反應過程中NADP+被還原為NADPH;生成的NADPH在電子耦合試劑1-mPMS (1-Methoxy-5-methylphenazinium?Methyl?Sulfate)的作用下將WST-8還原生成橙黃色的formazan,在450nm左右檢測有吸收峰。反應體系中生成的formazan與樣品中總的NADP+/NADPH的總量呈比例關系。WST-8法檢測NADP+和NADPH總量的原理參考圖1。
b.?單獨測定NADPH的量:60℃水浴加熱30分鐘后,樣品中NADP+會分解而只保留NADPH。NADPH將WST-8還原成formazan,通過比色法確定反應生成的formazan的量,最終可以確定樣品中NADPH的量。
c.?測定NADP+以及NADP+/NADPH比值:根據前兩步檢測獲得的NADP+和NADPH總量以及NADPH的量,即可得到樣品中NADP+的量以及NADP+/NADPH的比值。


圖1. WST-8法檢測NADP+和NADPH總量的原理圖。

??????本試劑盒適用于檢測細胞、組織以及其它適當樣品中的NADP+和NADPH各自的量、比值和總量。

當僅檢測NADP+和NADPH的總量或者樣品中的NADPH的量時,一個本試劑盒可以進行100次檢測;當檢測NADP+或者NADP+/NADPH的比值時,一個本試劑盒可以進行50次檢測。 包裝清單:


產品編號 產品名稱 包裝
S0179-1 G6PDH 220μl
S0179-2 顯色液 1.1ml
S0179-3 NADPH 5mg
S0179-4 NADP+/NADPH提取液 50ml
S0179-5 反應緩沖液 11ml
說明書 1份

保存條件:
??????-20℃保存,一年有效。顯色液(S0179-2)和NADPH?(S0179-3)須-20℃避光保存。NADPH配制成溶液后,須適當分裝后-80℃保存。所有試劑避免反復凍融。
注意事項:
??????本試劑盒中的所有試劑均需要冷凍保存,請嚴格按照保存條件進行保存。如果不是一次用完,為避免反復凍融導致產品失效,請適當分裝后保存。
??????NADPH不太穩(wěn)定,取出NADPH后請盡快使用。如果發(fā)現標準曲線不理想,很有可能是標準品發(fā)生了降解。
??????由于NADP+/NADPH提取液本身比較粘稠,以該提取液作為稀釋液時,無論對標準品還是樣品進行稀釋,在稀釋過程中務必保證稀釋均勻,否則易造成實驗數據產生較大波動。
??????在樣品加樣和混勻過程中,須盡量避免產生氣泡,以免影響最終的吸光度測定。
??????如果不能非常嚴格地控制反應溫度和反應時間,每次檢測都需要設置標準曲線。
??????如果樣品溶液中NADP+和NADPH濃度過高或過低,不在試劑盒的線性檢測范圍內時,可適當調整樣品或者提取液的用量。
??????由于NADP+和NADPH很不穩(wěn)定,在凍存過程中較易降解,所以宜盡量使用新鮮樣品進行檢測。
??????本產品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
??????為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

關鍵字: NADP+/NADPH檢測試劑盒(WST-8法)

公司簡介

碧云天由美國哈佛大學的留學人員創(chuàng)辦于2001年,為上海市高新技術企業(yè),公司核心團隊由來自美國哈佛大學、NIH、UCLA、香港大學、南京大學、中國科技大學、中國科學院等著名大學和科研機構的高水平科研人員及默克、諾華等頂尖醫(yī)藥企業(yè)的管理人員組成。十多年來,碧云天已經成為世界一流的生物、醫(yī)學研究用試劑、試劑盒和消耗品的研發(fā)和生產企業(yè),同時提供生命科學研究的技術服務和一站式實驗儀器設備采購平臺。目前已有近50000篇注明使用碧云天產品的研究論文發(fā)表在包括Nature、Cell等國際高水平學術期刊,日均逾33.37篇!碧云天將繼續(xù)致力于科研用技術和產品的研發(fā),用我們最頂尖的技術、最成熟的產品、最熱情的服務,服務科研人員,造福生命健康
成立日期 2007-07-19 (18年) 注冊資本 1000.000000萬人民幣
員工人數 500人以上 年營業(yè)額 ¥ 500萬-1000萬
主營行業(yè) 生化試劑,核苷,核苷酸,寡核苷酸,抗體,蛋白組學,生物活性小分子 經營模式 試劑
  • 碧云天生物技術有限公司
非會員
  • 公司成立:18年
  • 注冊資本:1000.000000萬人民幣
  • 企業(yè)類型:有限責任公司(自然人投資或控股)
  • 主營產品:生物領域內的技術研發(fā)、技術服務、技術轉讓?;瘜W試劑(除危險品),實驗室消耗品,實驗室儀器設備的生產和銷售,從事貨物及技術的進出口業(yè)務。
  • 公司地址:上海市松江區(qū)新飛路1500弄30號
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內容聲明:
以上所展示的信息由商家自行提供,內容的真實性、準確性和合法性由發(fā)布商家負責。 商家發(fā)布價格指該商品的參考價格,并非原價,該價格可能隨著市場變化,或是由于您購買數量不同或所選規(guī)格不同而發(fā)生變化。最終成交價格,請咨詢商家,以實際成交價格為準。請意識到互聯網交易中的風險是客觀存在的
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