??????pCMV-N-YFP是碧云天自行研發(fā)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒，用于表達(dá)N端含YFP(Yellow Fluorescent Protein, 黃色熒光蛋白)標(biāo)簽的融合蛋白。該質(zhì)粒含有CMV啟動(dòng)子，可以高效啟動(dòng)目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)。在多克隆位點(diǎn)的前面有一個(gè)YFP的完整編碼序列，因此在多克隆位點(diǎn)根據(jù)閱讀框插入目的基因就可以表達(dá)N端含有YFP標(biāo)簽的融合蛋白。利用YFP的熒光特性可以比較容易地觀察融合蛋白的表達(dá)水平和細(xì)胞內(nèi)定位，也可以利用YFP抗體來檢測(cè)或免疫沉淀融合蛋白。YFP與GFP高度相似，可以嘗試用GFP抗體檢測(cè)YFP。該質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，可以使用G418篩選穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。
??????pCMV-N-YFP質(zhì)粒的主要信息如下：

??????pCMV-N-YFP質(zhì)粒(5003bp)的圖譜如下：

??????pCMV-N-YFP的多克隆位點(diǎn)的詳細(xì)圖譜如下：

??????pCMV-N-YFP中沒有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-YFP)包括：

??????pCMV-N-YFP中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pCMV-N-YFP once)包括：

??????pCMV-N-YFP質(zhì)粒中推薦使用的測(cè)序引物序列如下：
??????N-YFP primer (1284-1303): 5'-GCTACCAGTCCGCCCTGAGC-3'
??????T7 primer (1503-1524): 5'-GTAATACGACTCACTATAGGGC-3'
??????pCMV-N-YFP的全序列信息：D2716 pCMV-N-YFP-seq.txt
??????pCMV-N-mCherry質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的表達(dá)效果請(qǐng)參考圖1。

圖1. pCMV-N-YFP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的表達(dá)效果圖。左側(cè)為明場(chǎng)照片，右側(cè)為熒光照片。

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??????本質(zhì)粒未經(jīng)碧云天書面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實(shí)驗(yàn)室外的任何個(gè)人或單位。
??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。