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pET-Dual-N-GST,pET-Dual-N-GST
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pET-Dual-N-GST

價(jià)格 詢(xún)價(jià)
包裝 100μg
最小起訂量 100μg
發(fā)貨地 上海
更新日期 2024-12-25

產(chǎn)品詳情

中文名稱(chēng):pET-Dual-N-GST英文名稱(chēng):pET-Dual-N-GST
有效期: 一年產(chǎn)品類(lèi)別: 菌種與質(zhì)粒 原核載體
2024-12-25 pET-Dual-N-GST pET-Dual-N-GST RMB 一年 菌種與質(zhì)粒 原核載體
產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱(chēng) 產(chǎn)品包裝 產(chǎn)品價(jià)格
D2931-100μg pET-Dual-N-GST 100μg 1086.00元

??????pET-Dual-N-GST是一種用于在大腸桿菌中高效共表達(dá)兩種目的蛋白的質(zhì)粒，其中一種蛋白可以帶上GST標(biāo)簽(Glutathione?S-transferase?tag,?GST?tag)。本質(zhì)粒包含兩個(gè)多克隆位點(diǎn)(MCS)，每個(gè)多克隆位點(diǎn)前都有一個(gè)T7啟動(dòng)子/lac操作子和一個(gè)核糖體結(jié)合位點(diǎn) (rbs)，因此都可以在異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的誘導(dǎo)下高效啟動(dòng)目的蛋白的表達(dá)。本質(zhì)粒為氨芐青霉素抗性。
??????在共表達(dá)兩個(gè)蛋白的復(fù)合物時(shí)，通常宜把較難表達(dá)的基因克隆到個(gè)多克隆位點(diǎn)，并在其N(xiāo)端引物設(shè)計(jì)時(shí)加入PreScission蛋白酶識(shí)別的八肽序列(LEVLFQGP)，宜把較易表達(dá)的基因克隆到第二個(gè)多克隆位點(diǎn)。這樣通過(guò)GST柱純化，可分離純化獲得帶有GST標(biāo)簽的蛋白復(fù)合物，配合使用碧云天生產(chǎn)的PreScission Protease (P2302/P2303) 4℃酶切過(guò)夜，第二天收集穿柱液即可獲得蛋白復(fù)合物，這為后續(xù)進(jìn)行蛋白復(fù)合物的功能檢測(cè)、蛋白結(jié)晶等工作帶來(lái)了極大的便利。PreScission蛋白酶酶切發(fā)生在八肽序列的Q和G之間，因此在酶切去除GST標(biāo)簽的時(shí)候會(huì)在目的蛋白的N端留下兩個(gè)額外的氨基酸殘基GP。當(dāng)然，本質(zhì)粒也可以只在個(gè)多克隆位點(diǎn)插入目的基因，這樣就會(huì)僅表達(dá)一個(gè)含有N端GST標(biāo)簽的目的蛋白。
??????pET-Dual-N-GST質(zhì)粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide Position
T7 transcription start-1 1
GST-taq coding sequence 71-727
Multiple cloning sites-1(BamH I – NotI) 730-780
T7 promoter-2 838-854
T7 transcription start-2 855
Multiple cloing sites-2(Nde I – XhoI) 922-983
S Tag coding sequence 990-1034
T7 terminator 1086-1133
f1 origin 1171-1618
bla(Ap) coding sequence 1743-2600
pBR322 origin 3361
lacI coding sequence 4555-5637
T7 promoter-1 6028-6044

??????pET-Dual-N-GST質(zhì)粒(6044bp)的圖譜如下：

??????pET-Dual-N-GST的多克隆位點(diǎn)的詳細(xì)圖譜如下：

Lacoperator
? 1 ?GGGGAATTGT????GAGCGGATAA????CAATTCCCCT????CTAGAAATAA????TTTTGTTTAA
?CCCCTTAACA????CTCGCCTATT????GTTAAGGGGA????GATCTTTATT????AAAACAAATT
rbsGST
?51 ?CTTTAAGAAG????GAGATATACC????ATGGGCTCCC????CTATACTAGG????TTATTGGAAA
?GAAATTCTTC????CTCTATATGG????TACCCGAGGG????GATATGATCC????AATAACCTTT
101 ?ATTAAGGGCC????TTGTGCAACC????CACTCGACTT????CTTTTGGAAT????ATCTTGAAGA
?TAATTCCCGG????AACACGTTGG????GTGAGCTGAA????GAAAACCTTA????TAGAACTTCT
151 ?AAAATATGAA????GAGCATTTGT????ATGAGCGCGA????TGAAGGTGAT????AAATGGCGAA
?TTTTATACTT????CTCGTAAACA????TACTCGCGCT????ACTTCCACTA????TTTACCGCTT
201 ?ACAAAAAGTT????TGAATTGGGT????TTGGAGTTTC????CCAATCTTCC????TTATTATATT
?TGTTTTTCAA????ACTTAACCCA????AACCTCAAAG????GGTTAGAAGG????AATAATATAA
251 ?GATGGTGATG????TTAAATTAAC????ACAGTCTATG????GCCATCATAC????GTTATATAGC
?CTACCACTAC????AATTTAATTG????TGTCAGATAC????CGGTAGTATG????CAATATATCG
301 ?TGACAAGCAC????AACATGTTGG????GTGGTTGTCC????AAAAGAGCGT????GCAGAGATTT
?ACTGTTCGTG????TTGTACAACC????CACCAACAGG????TTTTCTCGCA????CGTCTCTAAA
351 ?CAATGCTTGA????AGGAGCGGTT????TTGGATATTA????GATACGGTGT????TTCGAGAATT
?GTTACGAACT????TCCTCGCCAA????AACCTATAAT????CTATGCCACA????AAGCTCTTAA
401 ?GCATATAGTA????AAGACTTTGA????AACTCTCAAA????GTTGATTTTC????TTAGCAAGCT
?CGTATATCAT????TTCTGAAACT????TTGAGAGTTT????CAACTAAAAG????AATCGTTCGA
451 ?ACCTGAAATG????CTGAAAATGT????TCGAAGATCG????TTTATGTCAT????AAAACATATT
?TGGACTTTAC????GACTTTTACA????AGCTTCTAGC????AAATACAGTA????TTTTGTATAA
501 ?TAAATGGTGA ???TCATGTAACC????CATCCTGACT????TCATGTTGTA????TGACGCTCTT
?ATTTACCACT????AGTACATTGG????GTAGGACTGA????AGTACAACAT????ACTGCGAGAA
551 ?GATGTTGTTT ???TATACATGGA????CCCAATGTGC????CTGGATGCGT????TCCCAAAATT
?CTACAACAAA????ATATGTACCT????GGGTTACACG????GACCTACGCA????AGGGTTTTAA
601 ?AGTTTGTTTT????AAAAAACGTA????TTGAAGCTAT????CCCACAAATT????GATAAGTACT
?TCAAACAAAA????TTTTTTGCAT????AACTTCGATA????GGGTGTTTAA????CTATTCATGA
651 ?TGAAATCCAG????CAAGTATATA????GCATGGCCTT????TGCAGGGCTG????GCAAGCCACG
?ACTTTAGGTC????GTTCATATAT????CGTACCGGAA????ACGTCCCGAC????CGTTCGGTGC
BamHIEcoRISacIAscI
701 ?TTTGGTGGTG????GCGACCATCC????TCCAAAACAG????GATCCGAATT??? CGAGCTCGGC
?AAACCACCAC????CGCTGGTAGG????AGGTTTTGTC????CTAGGCTTAA????GCTCGAGCCG
NotI
PstISalIHindIII
751 ?GCGCCTGCAG????GTCGACAAGC????TTGCGGCCGC????ATAATGCTTA????AGTCGAACAG
?CGCGGACGTC????CAGCTGTTCG????AACGCCGGCG????TATTACGAAT????TCAGCTTGTC
T7 promoter2
801 ?AAAGTAATCG????TATTGTACAC????GGCCGCATAA????TCGAAATTAA????TACGACTCAC
?TTTCATTAGC????ATAACATGTG????CCGGCGTATT????AGCTTTAATT????ATGCTGAGTG
T7??transcription-2 →
? Lac??operator
851 ?TATAGGGGAA????TTGTGAGCGG????ATAACAATTC????CCCATCTTAG????TATATTAGTT
?ATATCCCCTT????AACACTCGCC????TATTGTTAAG????GGGTAGAATC????ATATAATCAA
rbsNdeIBglIIMunIEcoRVFseI
901 ?AAGTATAAGA????AGGAGATATA????CATATGGCAG????ATCTCAATTG????GATATCGGCC
?TTCATATTCT????TCCTCTATAT????GTATACCGTC????TAGAGTTAAC????CTATAGCCGG
AatIIKpnI XhoI
951 ?GGCCACGCGA????TCGCTGACGT????CGGTACCCTC????GAGTCTGGTA????AAGAAACCGC
?CCGGTGCGCT????AGCGACTGCA????GCCATGGGAG????CTCAGACCAT????TTCTTTGGCG

??????pET-Dual-N-GST中沒(méi)有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pET-Dual-N-GST)包括：

AgeI AleI BbvCI BmgBI BmtI BseRI BsiWI
BsmI Bsu36I CspCI NheI NruI NsiI PmeI
PmlI PspAI RsrII SacII SexAI SfiI SmaI
SnaBI SpeI SrfI StuI TspMI XmaI

??????pET-Dual-N-GST中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pET-Dual-N-GST once)包括：

XbaI T`CTAG,A 30 AvaI C`YCGR,G 978
NcoI C`CATG,G 69 PaeR7I C`TCGA,G 978
MscI TGG|CCA 281 XhoI C`TCGA,G 978
BstBI TT`CG,AA 471 AvrII C`CTAG,G 1057
SwaI ATTT|AAAT 501 BlpI GC`TNA,GC 1075
BamHI G`GATC,C 730 DraIII CAC,NNN`GTG 1404
EcoRI G`AATT,C 736 PsiI TTA|TAA 1528
Eco53kI GAG|CTC 744 SspI AAT|ATT 1608
SacI G,AGCT`C 742 AhdI GACNN,N`NNGTC 1812
BfuAI ACCTGCNNNN`NNNN, 748 BsaI GGTCTCN`NNNN, 1874
BspMI ACCTGCNNNN`NNNN, 748 BglI GCCN,NNN`NGGC 1930
AscI GG`CGCG,CC 749 FspI TGC|GCA 2035
PstI C,TGCA`G 755 AlwNI CAG,NNN`CTG 3006
SalI G`TCGA,C 761 BstZ17I GTA|TAC 3651
HindIII A`AGCT,T 767 Tth111I GACN`N,NGTC 3676
NotI GC`GGCC,GC 774 PflFI GACN`N,NGTC 3676
AflII C`TTAA,G 787 Bpu10I CC`TNA,GC 4313
BsrGI T`GTAC,A 814 PpuMI RG`GWC,CY 4413
NdeI CA`TA,TG 922 HpaI GTT|AAC 4780
BglII A`GATC,T 929 PspoMI G`GGCC,C 5075
MunI C`AATT,G 935 ApaI G,GGCC`C 5075
EcoRV GAT|ATC 943 BstEII G`GTNAC,C 5100
FseI GG,CCGG`CC 948 MluI A`CGCG,T 5282
AsiSI GCG,AT`CGC 959 BstAPI GCAN,NNN`NTGC 5603
ZraI GAC|GTC 968 SphI G,CATG`C 5811
AatII G,ACGT`C 966 SgrAI CR`CCGG,YG 5963
Acc65I G`GTAC,C 972 BspDI AT`CG,AT 6007
KpnI G,GTAC`C 972 ClaI AT`CG,AT 6007
PspXI VC`TCGA,GB 978

??????pET-Dual-N-GST質(zhì)粒中推薦使用的測(cè)序引物序列如下：
??????MCS1-N Primer (626-647): 5′-GCTATCCCACAAATTGATAAGT-3′
??????MCS1-C Primer (832-813): 5′-GATTATGCGGCCGTGTACAA-3′
??????MCS2-N Primer (813-832): 5′-TTGTACACGGCCGCATAATC-3′
??????T7 terminator Primer (1072-1090): 5′-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3′
??????pET-Dual-N-GST的全序列信息：D2931 pET-Dual-N-GST.txt。
??????不同原核表達(dá)質(zhì)粒的比較和選擇，以及標(biāo)簽、蛋白酶切位點(diǎn)和蛋白共表達(dá)的考慮可以參考如下網(wǎng)頁(yè)：
??????http://www.beyotime.com/support/prokaryotic-plasmids.htm
包裝清單：

產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱(chēng) 包裝
D2931-1μg pET-Dual-N-GST 1μg
D2931-100μg pET-Dual-N-GST 100μg
— 說(shuō)明書(shū) 1份

保存條件：
??????-20℃保存。
注意事項(xiàng)：
??????本質(zhì)粒未經(jīng)碧云天書(shū)面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實(shí)驗(yàn)室外的任何個(gè)人或單位。
??????本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

關(guān)鍵字： pET-Dual-N-GST

公司簡(jiǎn)介

碧云天由美國(guó)哈佛大學(xué)的留學(xué)人員創(chuàng)辦于2001年，為上海市高新技術(shù)企業(yè)，公司核心團(tuán)隊(duì)由來(lái)自美國(guó)哈佛大學(xué)、NIH、UCLA、香港大學(xué)、南京大學(xué)、中國(guó)科技大學(xué)、中國(guó)科學(xué)院等著名大學(xué)和科研機(jī)構(gòu)的高水平科研人員及默克、諾華等頂尖醫(yī)藥企業(yè)的管理人員組成。十多年來(lái)，碧云天已經(jīng)成為世界一流的生物、醫(yī)學(xué)研究用試劑、試劑盒和消耗品的研發(fā)和生產(chǎn)企業(yè)，同時(shí)提供生命科學(xué)研究的技術(shù)服務(wù)和一站式實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備采購(gòu)平臺(tái)。目前已有近50000篇注明使用碧云天產(chǎn)品的研究論文發(fā)表在包括Nature、Cell等國(guó)際高水平學(xué)術(shù)期刊，日均逾33.37篇！碧云天將繼續(xù)致力于科研用技術(shù)和產(chǎn)品的研發(fā)，用我們最頂尖的技術(shù)、最成熟的產(chǎn)品、最熱情的服務(wù)，服務(wù)科研人員，造福生命健康
成立日期 2007-07-19 （18年） 注冊(cè)資本 1000.000000萬(wàn)人民幣
員工人數(shù) 500人以上 年?duì)I業(yè)額 ￥ 500萬(wàn)-1000萬(wàn)
主營(yíng)行業(yè) 生化試劑,核苷，核苷酸，寡核苷酸,抗體,蛋白組學(xué),生物活性小分子 經(jīng)營(yíng)模式 試劑
  • 碧云天生物技術(shù)有限公司
非會(huì)員
  • 公司成立：18年
  • 注冊(cè)資本：1000.000000萬(wàn)人民幣
  • 企業(yè)類(lèi)型：有限責(zé)任公司(自然人投資或控股)
  • 主營(yíng)產(chǎn)品：生物領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)研發(fā)、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓?；瘜W(xué)試劑（除危險(xiǎn)品），實(shí)驗(yàn)室消耗品，實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的生產(chǎn)和銷(xiāo)售，從事貨物及技術(shù)的進(jìn)出口業(yè)務(wù)。
  • 公司地址：上海市松江區(qū)新飛路1500弄30號(hào)
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