"LOVO|人結(jié)腸癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：LoVo建自1971年，從診斷為結(jié)腸腺癌的56歲男性白人的一個(gè)轉(zhuǎn)移到左鎖骨上區(qū)的腫瘤結(jié)節(jié)建系。癌基因Ｃ-myc,K-ras,H-ras,N-ras,Myb,sis和fos的表達(dá)呈陽性。癌基因N-myc的表達(dá)未做檢測。它在裸鼠中能成瘤。與107細(xì)胞聯(lián)合皮下接種５只裸鼠21天后全部成瘤。表達(dá)腫瘤特異的核基質(zhì)蛋白蛋白CC-3和CC-4。

細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時(shí)間過長或過短：時(shí)間過長，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

LOVO Cell

603-81-6

貼壁細(xì)胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞，顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓，細(xì)胞間隙明顯，部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細(xì)胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，將細(xì)胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長，此時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)良好，當(dāng)補(bǔ)液時(shí)，需避免反復(fù)吹打。

LOVO|人結(jié)腸癌細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁生長

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

NCI-H1672細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：小細(xì)胞肺癌；男性

HSC/mHSC細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：肝星狀細(xì)胞

H1563細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

Hs 675.T細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代，每周2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞；細(xì)胞生長特性：貼壁生長；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

BCPAP/B-CPAP細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：甲狀腺乳頭狀癌；女性

OV3121細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

SP2/o細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系

LOVO|人結(jié)腸癌細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細(xì)胞傳代方法：1：3傳代，2-3天換液一次

SL-1細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

NCI-H2227[H2227]細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

TE-5細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：消化3-5分鐘。1：2。3天內(nèi)可長滿；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣；細(xì)胞生長特性：貼壁生長；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

D341 Med細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：髓母細(xì)胞樣；細(xì)胞生長特性：懸浮生長；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

COLO829細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：皮膚；黑色素瘤；男性

細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)培養(yǎng)基選購基本指南：如何選擇培養(yǎng)基：經(jīng)常聽到有人問，這種細(xì)胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?其實(shí)這個(gè)問題的答案可以很簡單，也可以好復(fù)雜。為什么這樣說呢?如果這種細(xì)胞是購自一些細(xì)胞庫，那很簡單，問供應(yīng)商就行了?；蛘哒业较嚓P(guān)的文獻(xiàn)，作為參考。培養(yǎng)基這么多種，要選擇起來也是個(gè)頭疼的事情。除了部分培養(yǎng)基是公開配方的，或者是專門針對某一種細(xì)胞的，如昆蟲基本培養(yǎng)基和神經(jīng)祖細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基， 但是大部分液體培養(yǎng)基都是專利配方的，也就是說其中的成分是保密的。那么你只能是檢索文獻(xiàn)、讓供應(yīng)商推薦，然后用自己的細(xì)胞做幾次傳代培養(yǎng)來選出最合適的培養(yǎng)基。畢竟實(shí)踐出真知。怎么樣才可以買到好的培養(yǎng)基產(chǎn)品：首先，當(dāng)然需要找對品牌，其次是找對自己所在區(qū)域的品牌代理商，針對自己所養(yǎng)的細(xì)胞，咨詢供應(yīng)商該選用哪種的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，這樣就可以買到好的而且適合自己的培養(yǎng)基產(chǎn)品。關(guān)于培養(yǎng)基品牌，目前公司所知道的高校實(shí)驗(yàn)室有些同學(xué)在用Corning系列培養(yǎng)產(chǎn)品，也有同學(xué)在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品牌的產(chǎn)品。培養(yǎng)基的選擇和使用；MEM：成分簡單，貼壁細(xì)胞；DMEM：分高糖型和低糖型；IDMEM：適合細(xì)胞密度低，生長困難的細(xì)胞。如雜交細(xì)胞的篩選，DNA轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選培養(yǎng)；RPM１６４０：應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基之一。懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，主要針對淋巴細(xì)胞，也適合其他細(xì)胞；１９９、１０９培養(yǎng)基：成分齊全，培養(yǎng)效果較好；F１０培養(yǎng)基：適合小鼠及人類二倍體細(xì)胞培養(yǎng)；F１２培養(yǎng)基：適合單細(xì)胞分離培養(yǎng)及無血清培養(yǎng)；McCoy’s５A(chǔ)培養(yǎng)基：特別適合原代細(xì)胞及較難培養(yǎng)細(xì)胞的生長。

DMS 79細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：4傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：懸浮生長；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

MAEC細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：主動脈；內(nèi)皮細(xì)胞

NEI-H209細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

786-0細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

C3H10T1 2 Clone 8細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

MEF(CF-1)細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

MT-4細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：淋巴母細(xì)胞樣；圓形；細(xì)胞生長特性：懸浮生長；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

ATDC5細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：消化3-5分鐘，1：2,3天內(nèi)可長滿；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁生長；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

22Rv1細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：消化3-5分鐘。1：2。3天內(nèi)可長滿；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞；細(xì)胞生長特性：貼壁生長；細(xì)胞背景資料：22RV1是來自異種移植(在閹割引起前列腺癌衰退又在其父親的雄性激素信賴型CWR22嫁接后復(fù)發(fā)的小鼠中連續(xù)傳代)的人前列腺癌上皮細(xì)胞系。此細(xì)胞系表達(dá)前列腺特異抗原。二羥基睪丸脂酮輕微刺激細(xì)胞生長，經(jīng)westernblot檢測溶解產(chǎn)物與抗雄性激素受體抗體起免疫反應(yīng)。EGF刺激細(xì)胞生長，但TGFβ-1不能抑制細(xì)胞生長。該細(xì)胞在裸鼠中成瘤。

Huh7.5細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

HARA細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

CAMA-1細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：3—1：4傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞貼壁斑塊；緊湊，很少匯合；細(xì)胞生長特性：貼壁生長；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

DMS153細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

OCI-AML3細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：懸浮；細(xì)胞背景資料：急性髓系白血?。荒行?/div>