"A427|人肺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書

在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

A427 Cell

69951-03-7

貼壁細(xì)胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞，顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓，細(xì)胞間隙明顯，部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細(xì)胞小心吹打下來(lái)，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，將細(xì)胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長(zhǎng)，此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，當(dāng)補(bǔ)液時(shí)，需避免反復(fù)吹打。

A427|人肺癌細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

Calu-6細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：消化20分鐘。1：2。5-6天長(zhǎng)滿；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

C3H/10T1/2,Clone 8細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

U-CH1細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：骶骨脊索瘤；男性

GA-10細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：每周2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：淋巴母細(xì)胞；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

SW756細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

WPMY-1細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：消化3-5分鐘。1：2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿；細(xì)胞形態(tài)特性：成肌細(xì)胞；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：肌成纖維基質(zhì)細(xì)胞株,WPMY-1,與RWPE-1cells(ATCCCRL-11609)一樣，來(lái)源于同一張成人前列腺組織切片的周圍區(qū)域的基質(zhì)細(xì)胞。通過(guò)一個(gè)pRSTV質(zhì)料結(jié)構(gòu)，用SV40大T抗原對(duì)基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行永生化。WPMY-1細(xì)胞，與RWPE-1細(xì)胞及其它上皮細(xì)胞衍生株一樣，屬于來(lái)源于同一個(gè)前列腺的一系列細(xì)胞株。由于它們來(lái)源于同一個(gè)前列腺的周圍區(qū)域，WPMY-1細(xì)胞株對(duì)于研究分泌和基質(zhì)與上皮細(xì)胞相互作用尤其有用。

COLO 684細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系

A427|人肺癌細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。

COLO 684細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

AtT20細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

U-2OS[U2OS,U2-OS,U-2OS]細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

Kit225-k6細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

HR8348細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：直腸腺癌；男性

幾種實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)基成分的作用：１)NaHCO３的作用是什么？與CO２一起形成緩沖系統(tǒng)，保持培養(yǎng)基PH值穩(wěn)定；２)酸鈉的作用是什么？酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是如果沒(méi)有葡萄糖的話，細(xì)胞也可以代謝酸鈉。酸鈉的貯存液濃度一般為５０mM，-２０℃保存，培養(yǎng)基中的終濃度為１mM；３)加入HEPES有何好處？培養(yǎng)基中最常用的Buffer system是碳酸鹽，它可提供營(yíng)養(yǎng)，但卻在生理PH值條件下會(huì)降低緩沖能力。而HEPES是一種很強(qiáng)的Buffer，加入HEPES能使細(xì)胞培養(yǎng)基在PH７.２-７.６條件下緩沖能力增強(qiáng)。Hepes的貯存液濃度一般為１M，常溫保存。培養(yǎng)基中的終濃度為２５mM，即５ml １M的Hepes加入到２００ml完全培養(yǎng)基中；４)紅的作用是什么？紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為PH值指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色；５)谷酰胺的作用是什么？幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷酰胺都有膠高的要求。谷酰胺脫掉基后，可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來(lái)源，參與蛋白質(zhì)的合成和能量代謝。在缺少谷酰胺時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡。所以，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置-２０℃冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中。加有谷酰胺的液體培養(yǎng)基４度冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí)，應(yīng)重新加入原來(lái)量的谷酰胺。試驗(yàn)操作中常配制高濃度(１００倍)的谷酰胺溶液(１ml/支)，分裝使用，-２０℃保存。使用時(shí)，每支１ml的谷酰胺加入到９９ml完全培養(yǎng)基中，使其終濃度為２mM培養(yǎng)基。

HLF細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞樣；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

G361細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：黑色素瘤；男性

HR-8348細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

Hs 766T細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2—1：8傳代，每周換液2—3次；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

HUASMC細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：臍動(dòng)脈平滑肌

MBMEC細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：腦微血管；內(nèi)皮細(xì)胞

Kuffer細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

HIMEC細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞

GI-1細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

CAL-27細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：6傳代，2—3天換液一次；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞1982年由J. Gioanni建系，源自一位56歲白人男性的舌頭中倍的病變部位，角蛋白強(qiáng)陽(yáng)性

HCC-2279細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：肺腺鱗癌細(xì)胞；女性

BxPC3細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

NCI-H1648[H1648]細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

H1563細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

NCI-H2029[H2029]細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

A427|人肺癌細(xì)胞

JG細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：腎小球旁細(xì)胞

SK-BR-3[SKBR-3,SKBR3]細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

KBM7細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮；細(xì)胞背景資料：慢性髓原白血?。荒行?/div>