"KMS26|人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：多發(fā)性骨髓瘤

細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書

收到常溫復(fù)蘇細(xì)胞后，具體操作步驟1)首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。2)用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。3)仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。4)靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。5)貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。6)懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。溫馨提醒：1)可將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管中，備用；細(xì)胞首次傳代時(shí)，可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合使用，讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。2)確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好后，應(yīng)及時(shí)將部分細(xì)胞凍存，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)，避免后期實(shí)驗(yàn)失誤可能發(fā)生細(xì)胞污染或死亡而導(dǎo)致的細(xì)胞丟失，影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。建議客戶收到細(xì)胞后前3天，100X、200X、400X各拍3張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于后續(xù)和技術(shù)支持溝通交流。

KMS26 Cell

329-59-9

貼壁細(xì)胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞，顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓，細(xì)胞間隙明顯，部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細(xì)胞小心吹打下來(lái)，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，將細(xì)胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長(zhǎng)，此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，當(dāng)補(bǔ)液時(shí)，需避免反復(fù)吹打。

KMS26|人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

HPMEC細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：肺微血管；內(nèi)皮細(xì)胞

TT細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：3-1：4傳代，每周換液2次；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：TT細(xì)胞由LeongSS等，自一位77歲白人女性甲狀腺髓樣癌患者的穿刺活檢樣本中建立。TT細(xì)胞持續(xù)產(chǎn)生高水平的降血素和CEA。更換培養(yǎng)基后24h和72h，在培養(yǎng)基中檢測(cè)到的免疫活性的降血素濃度分別為3900pg/106個(gè)細(xì)胞和7700pg/106個(gè)細(xì)胞。72小時(shí)后CEA積累濃度超過(guò)27ng/106個(gè)細(xì)胞；該細(xì)胞最初是在RPMI1640培養(yǎng)液中培養(yǎng)，可產(chǎn)生神經(jīng)肽，但還不知道在F12培養(yǎng)液中培養(yǎng)是否會(huì)產(chǎn)生。

Human2508wnt細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說(shuō)明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

SK-N-BE(2)細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：1972年11月從一們多次化療及放療的擴(kuò)散性神經(jīng)母細(xì)胞瘤患兒骨髓穿刺物中建立了SK-N-BE(2)神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株。 該細(xì)胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。 有報(bào)道稱SK-N-BE(2)細(xì)胞的飽和濃度超過(guò)1x106細(xì)胞/平方厘米。細(xì)胞形態(tài)多樣，有的有長(zhǎng)突觸，有的呈上皮細(xì)胞樣。 細(xì)胞會(huì)聚集，形成團(tuán)塊并浮起

Toledo細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：每2-3天換液；細(xì)胞形態(tài)特性：淋巴母細(xì)胞樣；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng) ；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

NCI-H2073細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：3-1：6傳代 ；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

DMS-53細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系

KMS26|人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。

SGC-790細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說(shuō)明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

NCI-H295細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說(shuō)明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

OCI-LY19細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮；細(xì)胞背景資料：彌漫大B淋巴瘤；女性

NCI-H1666細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：4傳代；每周換液2次；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)，松散；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

Okul BclxL C3細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：淋巴母細(xì)胞；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

傳代細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)：１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：瘤細(xì)胞懸液接種１)無(wú)菌選取生長(zhǎng)良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過(guò)濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０(７)～１０(８)/ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml/部位，＞１０(６)細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間。腹水瘤的建立與腹水瘤的接種：將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過(guò)程如下：１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１×１０(６)腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７-１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號(hào)針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３-５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/div>