"COLO-679|人黑色素瘤細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

COLO-679 Cell

29968-78-3

一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時，易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化，對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化，細胞密度過高超過80%時，采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C，解凍在4°C進行，次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°C，避免反復冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關鍵步驟：消化過度細胞碎片增多，黑渣子增多，細胞會成片脫落，嚴重影響細胞活性，并有部分細胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下，反復吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同，胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲存時間，胰酶的儲存溫度，是否反復凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細胞的密度有關。對于新購買的細胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間，可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓，記錄消化時間，下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。

COLO-679|人黑色素瘤細胞

細胞生長特性：貼壁生長　

細胞產品包裝：復蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

SW 1088[SW-1088,SW1088]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

HP615細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：肺癌

TPC1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：甲狀腺乳頭狀癌；女性

MGC80-3細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

OV-1063細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：卵巢上皮細胞癌

RPMI6666細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

DU145細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：DU 145 是從一位有3年淋巴細胞白血病史的前列腺癌患者的腦部轉移灶中建立的。該細胞系未檢測到激素敏感性，酸性磷酸酶陽性，單個的細胞可在軟瓊脂中形成集落。對此細胞和原始腫瘤的亞顯微結構分析可見微絨毛、微絲、細胞橋粒、線粒體、發(fā)達的高爾基體和異質溶酶體。該細胞不表達前列腺抗原。

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系

COLO-679|人黑色素瘤細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細胞傳代方法：1：2傳代

CL187/CCL187細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

Calu-6細胞系；細胞傳代方法：消化20分鐘。1：2。5-6天長滿；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

T.T細胞系；細胞傳代方法：10^5 cells/60mm dish；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

TE353.SK細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

EFM-192B細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

以下對初次培養(yǎng)細胞人員來說，是非常好的開門教程：準備室的設備：單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲品柜(放置未消毒物品)、儲品柜(放置消毒過的物品)、包裝臺；配液室的設備：扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(測量培養(yǎng)用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液)；培養(yǎng)室的設備：液氮罐、儲品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱(-８０℃)、空調、二氧化碳缸瓶、邊臺(書寫實驗記錄)；必須放在無菌間的設備：離心機(收集細胞)、超凈工作臺、倒置顯微鏡、CO２孵箱(孵育培養(yǎng)物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機、４℃冰箱(放置serum和培養(yǎng)用液)。無菌室的滅菌：定期打掃無菌室：每周打掃一次，先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺等，然后用３‰來蘇爾或者新潔爾滅或者０.５％擦拭；CO２孵箱(培養(yǎng)箱)滅菌：先用３‰新潔爾滅擦拭，然后用７５％酒精擦拭或者０.５％，再用紫外燈照射；實驗前滅菌：打開紫外燈、三氧殺菌機、空氣凈化器系統(tǒng)各２０-３０分鐘；實驗后滅菌：用７５％酒精(３‰新潔爾滅)擦拭超凈臺、邊臺、倒置顯微鏡的載物臺；實驗人員的無菌準備：肥皂洗手、穿好隔離衣、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋、用７５％酒精棉球擦凈雙手。

DMS 273細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

HOK細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：口腔角質細胞

DLD-1細胞系；細胞傳代方法：消化5分鐘。1：2。4-5天長滿；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：DLD-1是1977-1979年間D.L.Dexter和同事分離的兩株結直腸腺癌細胞株中的一株。在ATCC和其它地方進行的DNAfingerprinting和染色體組型分析表明這株細胞與HCT-15(CCL-225)相似，說明這兩者是來自同一個人的不同克隆。他們的遺傳起源可通過DNAfingerprinting證實，但染色體組型分析顯示它們缺乏染色體標記一致改變或數(shù)目上一致改變。細胞的CSAp陰性(CSAp-)。DLD-1細胞的p53抗原表達呈陽性(p53抗原產生了一個C->

M619細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：脈絡膜黑色素瘤；女性

GRSL細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

KOPN-8細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸浮；細胞背景資料：B淋巴細胞白血?。慌?/div>