"SW1463細胞：人結(jié)腸腺癌細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

SW1463 Cell

細胞形態(tài)特性：上皮細胞

3061-36-7

很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié)，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近300種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。

SW1463細胞：人結(jié)腸腺癌細胞

細胞生長特性：貼壁生長

KFB細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：腎；成纖維細胞

MDA-MB-157細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：該細胞源自一位患有乳腺髓樣癌的44歲黑人女性，表達WNT7B癌基因，細胞與細胞邊界處有細胞橋粒、微絨毛、張力細絲。

NCI-H226細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：1980年分離建立。

NK­92細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

BeWo細胞系；細胞傳代方法：1：3傳代，3-4天換液一次；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：取自人絨癌腦轉(zhuǎn)移組織，在倉鼠頰囊移植傳代8年。利用移植瘤組織進行體外培養(yǎng)，建立細胞系。利用不同傳代方法建立了不同亞系，JEG-3是其衍生克隆。該細胞可以產(chǎn)生雌激素、孕激素、雌酮、雌二醇、雌三醇、hCG、胎盤催乳素、角蛋白。

接收細胞相關(guān)問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T25及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在37度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置1-2天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-80度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復(fù)蘇細胞。T25瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導(dǎo)致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T25瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(1200rpm，5min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(1000rpm，3min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。

BEL-7404細胞系；細胞傳代方法：消化3-5分鐘。1：2。3天內(nèi)可長滿；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：用Northernblot方法，未能檢測到細胞中1.3kbLFIRE-1/HFREP-1mRNA的表達。

THP-1細胞系；細胞傳代方法：維持細胞濃度在2-4×105-8×105/ml，勿超過1×106/ml；2-3天換液1次；細胞形態(tài)特性：單核細胞；細胞生長特性：懸浮生長；細胞背景資料：該細胞從一名1歲的患有急性單核細胞性白血病的男孩的外周血中分離建立。該細胞可以吞噬乳膠顆粒和激活的紅細胞，細胞膜和胞漿內(nèi)均沒有免疫球蛋白，表達C3R和FcR；可受佛波酯TPA誘導(dǎo)向單核系方向分化；可作為轉(zhuǎn)染宿主。

RKO-AS45-1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

MX-1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

PC9細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

OKT3細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

SW1463細胞：人結(jié)腸腺癌細胞

細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系

購買細胞注意事項：1)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系；2)仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等；3)用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次；4)建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流?！炯毎麄鞔僮鞑襟E】一、貼壁細胞傳代：1)提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)；2)吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞；3)加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用；4)用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡；5)將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細胞傳代：1)將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min；2)棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液；3)將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

SW1463細胞：人結(jié)腸腺癌細胞

細胞傳代方法：1：3—1：8傳代，每周換液1-2次

細胞培養(yǎng)相關(guān)培養(yǎng)基選購基本指南：如何選擇培養(yǎng)基：經(jīng)常聽到有人問，這種細胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?其實這個問題的答案可以很簡單，也可以好復(fù)雜。為什么這樣說呢?如果這種細胞是購自一些細胞庫，那很簡單，問供應(yīng)商就行了?；蛘哒业较嚓P(guān)的文獻，作為參考。培養(yǎng)基這么多種，要選擇起來也是個頭疼的事情。除了部分培養(yǎng)基是公開配方的，或者是專門針對某一種細胞的，如昆蟲基本培養(yǎng)基和神經(jīng)祖細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基， 但是大部分液體培養(yǎng)基都是專利配方的，也就是說其中的成分是保密的。那么你只能是檢索文獻、讓供應(yīng)商推薦，然后用自己的細胞做幾次傳代培養(yǎng)來選出最合適的培養(yǎng)基。畢竟實踐出真知。怎么樣才可以買到好的培養(yǎng)基產(chǎn)品：首先，當然需要找對品牌，其次是找對自己所在區(qū)域的品牌代理商，針對自己所養(yǎng)的細胞，咨詢供應(yīng)商該選用哪種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，這樣就可以買到好的而且適合自己的培養(yǎng)基產(chǎn)品。關(guān)于培養(yǎng)基品牌，目前公司所知道的高校實驗室有些同學在用Corning系列培養(yǎng)產(chǎn)品，也有同學在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品牌的產(chǎn)品。培養(yǎng)基的選擇和使用；MEM：成分簡單，貼壁細胞；DMEM：分高糖型和低糖型；IDMEM：適合細胞密度低，生長困難的細胞。如雜交細胞的篩選，DNA轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)化細胞的篩選培養(yǎng)；RPM1640：應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基之一。懸浮細胞培養(yǎng)，主要針對淋巴細胞，也適合其他細胞；199、109培養(yǎng)基：成分齊全，培養(yǎng)效果較好；F10培養(yǎng)基：適合小鼠及人類二倍體細胞培養(yǎng)；F12培養(yǎng)基：適合單細胞分離培養(yǎng)及無血清培養(yǎng)；McCoy’s5A培養(yǎng)基：特別適合原代細胞及較難培養(yǎng)細胞的生長。

A-427細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：肺腺癌；男性

NCI-H2141[H2141]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

E.G7-OVA細胞系；細胞傳代方法：細胞密度保持在1×105—1×106 cells/ml，每周換液2—3次 ；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸浮生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

AZ-521細胞系；細胞傳代方法：1：4傳代；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HPAC細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

AZ521細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：十二指腸腺癌；男性

SW 954細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

SW1463細胞：人結(jié)腸腺癌細胞

HUV-EC-C細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

IGROV-1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HCAEC細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：冠狀動脈；內(nèi)皮細胞

RPMC細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：腹膜間皮細胞

CCLP1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：肝內(nèi)膽管癌；女性

FBHE細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

CL187/CCL187細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HCE-T細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：角膜上皮細胞；Ad-SV40轉(zhuǎn)化；女性

HRMC細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：腎；系膜細胞

HCCLM6細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：肝癌

OCI-AML2細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸?。患毎尘百Y料：急性髓系白血?。荒行?/div>